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    常用染色液的配制



    錄入時(shí)間:2011-5-9 9:28:32 來(lái)源:青島海博

    1.黑色素液 水溶性黑素10g,蒸餾水100mL, 甲醛(福爾馬林)0.5mL?捎米髑v膜的背景染色。
     
    2.墨汁染色液  國產(chǎn)繪圖墨汁40mL,甘油2mL,液體石炭酸2mL。先將墨汁用多層紗布過(guò)濾,加甘油混勻后,水浴加熱,再加石炭酸攪勻,冷卻后備用。用作莢膜的背景染色。
     
    3.呂氏(Loeffier)美藍染色液
    A液:美藍(methylene blue, 又名甲烯藍)0.3g, 95%乙醇30mL;
    B液:0.0l% KOH l00mL。
    混合A液和B液即成,用于細菌單染色,可長(cháng)期保存。根據需要可配制成稀釋美藍液,按1:10或1:100稀釋均可。
     
    4.革蘭氏染色液
    (1)結晶紫(crystal violet)液:結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h后過(guò)濾即成。此液不易保存,如有沉淀出現,需重新配制。
    (2)盧戈(Lugol)氏碘液:碘1g,碘化鉀2g,蒸餾水300mL。先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸餾水至300mL即成。配成后貯于棕色瓶?jì)葌溆,如變(yōu)闇\黃色即不能使用。
    (3)95%乙醇:用于脫色,脫色后可選用以下(4)或(5)的其中一項復染即可。
    (4)稀釋石炭酸復紅溶液:堿性復紅乙醇飽和液(堿性復紅1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成堿性復紅乙醇飽和液),取石炭酸復紅飽和液l0mL加蒸餾水90mL即成。
    (5)番紅溶液:番紅O(safranine,又稱(chēng)沙黃O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可貯存于密閉的棕色瓶中,用時(shí)取20mL與80mL蒸餾水混勻即可。
    以上染液配合使用,可區分出革蘭氏染色陽(yáng)性(G+)或陰性(G-)細菌,G-被染成藍紫色,G+被染成淡紅色
     
    5. 鞭毛染色液
    A液:丹寧酸5.0g, FeCl3 1.5g,15%甲醛(福爾馬林)2.0mL,l%NaOH 1.0mL,蒸餾水l00mL;
    B液:AgNO3 2.0g, 蒸餾水100mL。
    待AgNO3溶解后,取出l0mL備用,向其余的90mLAgNO3中滴加NH4OH,即可形成很厚的沉淀,繼續滴加NH4OH至沉淀剛剛溶解成為澄清溶液為止,再將備用的AgNO3慢慢滴入,則溶液出現薄霧,但輕輕搖動(dòng)后,薄霧狀的沉淀又消失,繼續滴入AgNO3,直到搖動(dòng)后仍呈現輕微而穩定的薄霧狀沉淀為止,如霧重,說(shuō)明銀鹽沉淀出,不宜再用。通常在配制當天便用,次日效果欠佳,第3天則不能使用。
     
    6. 0.5%沙黃(Safranine)液:2.5%沙黃乙醇液20mL,蒸餾水80mL。將2.5%沙黃乙醇液作為母液保存于不透氣的棕色瓶中,使用時(shí)再稀釋。
     
    7. 5%孔雀綠水溶液:孔雀綠5.0g,蒸餾水100mL。
     
    8. 0.05%堿性復紅:堿性復紅0.05g,95%乙醇100mL。
     
    9.齊氏(Ziehl)石炭酸復紅液:堿性復紅0.3g溶于95%乙醇l0mL中為A液:0.01%KOH溶液l00mL為B液;旌螦、B液即成。
     
    10.姬姆薩(Giemsa)染液
    (1)貯存液:稱(chēng)取姬姆薩粉0.5g,甘油33mL,甲醇33mL。先將姬姆薩粉研細,再逐滴加入甘油,繼續研磨,最后加入甲醇,在56℃放置1~24h后即可使用。
    (2)應用液(臨用時(shí)配制):取1mL貯存液加19mL pH7.4磷酸緩沖液即成。亦可取貯存液:甲醇=1:4的比例配制成染色液。
     
    11.乳酸石炭酸棉藍染色液(用于真菌固定和染色)  石炭酸(結晶酚)20g,乳酸20mL,甘油40mL,棉藍0.05g,蒸餾水20mL。將棉藍溶于蒸餾水中,再加入其他成分,微加熱使其溶解,冷卻后用。滴少量染液于真菌涂片上,加上蓋玻片即可觀(guān)察。霉菌菌絲和孢子均可染成藍色。染色后的標本可用樹(shù)脂封固,能長(cháng)期保存。
     
    12. 1%瑞氏(Wright’s)染色液:稱(chēng)取瑞氏染色粉6g,放研缽內磨細,不斷滴加甲醇(共600mL)并繼續研磨使溶解。經(jīng)過(guò)濾后染液須貯存一年以上才可使用,保存時(shí)間愈入,則染色色澤愈佳。
     
    13.阿氏(Albert) 異染粒染色液:
    A液:甲苯胺藍(toluidine blue)0.15g,孔雀綠0.2g,冰醋酸lmL,95%乙醇2mL,蒸餾水100mL;
    B液:碘2g, 碘化鉀3g,蒸餾水300ml。
    先用A液染色1min,傾去A液后,用B液沖去A液,并染1min。異染粒呈黑色,其他部分為暗綠或淺綠。

     

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