原理:某些細菌能產(chǎn)生尿素酶。尿素酶可分解尿素,產(chǎn)生大量的氨,使培養基的pH值升高。
培養基:應用Christenrsen氏培養基
蛋白胨 1g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
KH2PO4 2g
0.2%酚紅溶液 6ml
瓊脂 20g
蒸餾水加至 1000ml
調整pH至6.9。需生長(cháng)因子的細菌,可加入酵母浸膏0.1%。
121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻到55℃時(shí)加入十分之一的20%尿素液(經(jīng)濾過(guò)法除菌)使尿素含量為2%(即每1000ml中有20g),制成短斜面。接種細菌時(shí),同時(shí)作劃線(xiàn)及穿刺,置37℃培養24小時(shí)后觀(guān)察,培養基從黃色變紅色時(shí)為陽(yáng)性。接種量多,反應快的細菌,數小時(shí)即可使培養基變紅。陰性者應繼續觀(guān)察4天。
可以省去瓊脂,將各物(包括20g尿素)溶解后,過(guò)濾除菌,無(wú)菌分裝,培養2日,無(wú)菌者應用。
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