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    怎樣在家庭開(kāi)展組培工作



    錄入時(shí)間:2011-4-14 13:35:11 來(lái)源:中國組培網(wǎng)

    制備
    家庭組培因受到條件的限制,不可能配置大量的配養基,,一般每次配置1升為宜。煮制后用PH試紙測定后,分裝成35-40瓶,塞好棉塞,包好包頭紙。(棉塞一定要用作棉衣的棉花卷制,不能使用脫脂棉,然后用紗布包緊,用棉線(xiàn)扎好。棉塞的松緊以手提棉塞瓶子不滑落為宜。)然后放入高壓鍋里高壓滅菌,待高壓鍋噴嘴噴出蒸汽時(shí),扣上壓力閥,從壓力閥噴氣時(shí)起計時(shí),連續維持15-20分鐘后關(guān)火,壓力消失后,打開(kāi)鍋蓋,取出配養基,放入接種箱內待用。初次實(shí)驗時(shí),滅菌后的培養基應放置三五天后,觀(guān)察無(wú)霉菌生長(cháng)時(shí)才能使用。如有霉菌長(cháng)出,這說(shuō)明滅菌時(shí)間不夠,,需要適當增加滅菌時(shí)間。
     
     
    接種
    將滅菌后的配養基、無(wú)菌水、消毒藥水及使用的器材放入接種箱內,因接種箱內的體積相對較小,所以所用的一切物品都要有序地擺放在相應的位置上,不能隨意擺放,箱內濕度較大,點(diǎn)酒精燈一定要是用打火機,不要使用火柴。要特別注意準備好裝污水、污物的容器,盡可能地大一些,因為操作時(shí)是不容許開(kāi)箱取物的。把所有的物品放置好以后,將一裝有10-20ml福爾馬林的磁杯放入箱內(最好不要使用玻璃杯,因反應時(shí)溫度較高,容易炸裂。),倒入2-5g高錳酸鉀(PP粉),使其蒸氣充滿(mǎn)箱內,達到滅菌的效果。這時(shí)要將接種箱的通氣孔和操作孔封閉好,避免甲醛蒸氣很快散盡。待箱內蒸氣散盡后,才能開(kāi)始接種工作,這段時(shí)間大約需要5-10個(gè)小時(shí)。
     
    接種時(shí),揭去密封在接種箱通氣孔和操作孔上的密封物,取出熏蒸用的磁杯,將接種用的材料送入接種箱內,開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈,十五分鐘后關(guān)閉紫外線(xiàn)燈,開(kāi)啟照明燈,即可開(kāi)始工作。操作時(shí)一定要樹(shù)立無(wú)菌觀(guān)念,要把一切物品都看成是帶菌的,要時(shí)時(shí)都注意防范。工作是由于箱內溫度較高,濕度較大,手容易出汗,所以每接種一瓶后都要用酒精擦拭手指,也可以戴指套。另外,操作時(shí)要注意防火,由于空間較小,一不小心就容易燒傷手指或引起酒精起火。打開(kāi)瓶塞時(shí),要將瓶口置于酒精燈上方,用右手的無(wú)名指和小指夾住棉塞尾,輕輕將棉塞拔出,棉塞不能置于箱內物品上,應用手指夾住,接種后,將瓶口在酒精燈上燒灼一下,棉塞也燒灼一下,,然后在酒精燈火焰上方輕輕塞好,扎好包頭紙,用鉛筆標明品種、接種日期、編號等,然后重復下一瓶。
    其實(shí),用接種箱接種與超凈工作臺相比較,工作時(shí)人要感覺(jué)舒適得多。污染率也是很低的,操作熟練后幾乎沒(méi)有什么污染發(fā)生。接種后愈傷組織分化、小苗分化、生長(cháng)狀態(tài)與在超凈臺上接種的沒(méi)有什么兩樣。
     
     
    培養
    在家庭的業(yè)余條件下培養培養的條件不可能得到專(zhuān)控,所以要充分的利用自然條件,接種后的培養瓶可以放在有較強散射光的地方,如靠窗的書(shū)柜、寫(xiě)字臺上,但要避免日光直射,一般室溫在22-28攝氏度時(shí)都能正常生長(cháng),不是特殊的品種不需要特殊的護理。如室溫太低,可以用紙板、木條、塑料薄膜做一個(gè)簡(jiǎn)單的培養箱,里面裝一兩個(gè)15-25瓦的白織燈,既可以補助光照也可以提高培養的溫度。夏天溫度過(guò)高時(shí),有條件的可以擺放在空調室內,,沒(méi)有空調室的,降溫雖然困難一些,但大多數試管苗是可以耐受的,不至于死去。小苗長(cháng)出后,擺放在書(shū)柜或工作臺上,感到自己培養出來(lái)的生機勃勃的小生靈,無(wú)疑是一種享受。
     
    栽培
    當小苗長(cháng)到一定的時(shí)候,就可以配置一些生根配養基將小苗轉移培養生根,待長(cháng)出一定根系時(shí),就可以出瓶種植了。小苗出瓶種植的時(shí)候一定要注意以下幾個(gè)方面,一是要適當降低溫度;二是要增大濕度;三是要嚴格控制雜菌危害;四是要保證種植介質(zhì)的疏松透氣;五是要保證適當的光照。我通常是用跖石、木屑、稻谷殼混合作基質(zhì),把小苗種植后用百菌清噴霧澆根,蓋上塑料薄膜,少量的小苗干脆用玻璃杯蓋住,大約15天后就能揭去覆蓋物,便可進(jìn)行正常管理了。
     
    家庭開(kāi)展組培其實(shí)也并不是一件什么很困難的事情,只要多開(kāi)動(dòng)腦筋,多想一些辦法,做起來(lái)也是很容易地。萬(wàn)事開(kāi)頭難,辦法總比困難多。我1974年在一個(gè)縣烤煙研究所里當所長(cháng),原來(lái)條件不允許,科研經(jīng)費很緊張,剛開(kāi)始的時(shí)候,一年的科研經(jīng)費只有3000元,那年我做過(guò)煙草的花藥單倍體、水稻花藥培養、柑桔胚乳培養、黑皮果蔗莖尖組織培養、田三七愈傷組織培養、黑節草(石斛)種子的無(wú)菌培養、體細胞融合,都獲得了很好的成績(jì),我們就是用這種方法做的,當時(shí)北京、上海很多的研究單位來(lái)看了很吃驚,他們認為很珍貴的組培小苗,被我們丟得到處都是,覺(jué)的不可思議,他們做不出來(lái)的,竟然在我們一個(gè)十分閉塞的山區里可以做出來(lái)。我說(shuō)這個(gè)話(huà)的意思不是為自己吹噓擺功,而是告訴想從事這個(gè)行業(yè)的朋友,不要自己把自己的能量看得太低,也不要迷信權威、只要自己有信心,嚴格地按照科學(xué)的規律去做,沒(méi)有什么做不了的,沒(méi)有什么辦不到的。

     

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