細菌生化試驗——石蕊牛乳試驗

原理：紫乳培養基中的主要成分為干酪素、乳糖及指示劑等。由于各種細菌對這些成分的作用不同，引起培養基的變化也有不同，觀(guān)察的主要變化為：
產(chǎn)酸：主要從乳糖產(chǎn)生酸，指示劑變酸色（石蕊為紅色，溴甲酚紫為黃色）。
酸凝或加有產(chǎn)氣：產(chǎn)酸，并有牛乳的凝固（pH4.7以下）；如有氣體形成，則凝塊中有裂隙，在魏氏梭菌則呈“暴烈發(fā)酵”。

凝乳酶產(chǎn)生：很少或無(wú)酸產(chǎn)生，牛乳凝固。

胨化：部分或大部分牛奶變清亮。

產(chǎn)堿：細菌產(chǎn)生蛋白酶可將干酪素分解產(chǎn)生胺或氨，使培養基的pH進(jìn)一步升高，呈深紫色。

培養基：加石蕊的酒精飽和溶液于新鮮脫脂牛奶中，使達淺紫色，分裝于小試管，用流動(dòng)蒸汽滅菌，每天1次，每次1小時(shí)，共3天。接種細菌后，培養及觀(guān)察一周。

石蕊酒精溶液的制備：8g石蕊在30ml40％乙醇中研磨，吸出上清液，再如此用乙醇操作兩次。加40％乙醇到總量為100ml，并煮沸1分鐘。取用上清液，必要時(shí)可加幾滴1N鹽酸使達艷紫色�，F在多應用溴甲酚紫代替石蕊，即于100ml脫脂乳中加入1.2ml的1.6％溴甲酚紫的乙醇溶液。

方法：將細菌接種于紫乳培養基中，37℃培養1～7天后觀(guān)察結果，根據細菌的種類(lèi)不同，可呈現上述一種或幾種現象。

 

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