細菌生化試驗——吲哚試驗

   原理：細菌分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚（靛基質(zhì)），經(jīng)與試劑中的對位二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚。

培養基：鄧亨氏蛋白胨溶液
試劑：常用下述兩種。
1．歐立希氏（Ebrlich′s）吲哚試劑
對位二甲基氨基苯甲醛（P-dimethyl aminobenzaldehyde）   1g
純乙醇                                              95ml          
濃鹽酸                                              20ml
先以乙醇溶解試劑，后加鹽酸，要避光保存。
2．Kovacs試劑
對位二甲基氨基苯甲醛                                5g    
戊醇（聚異戊醇）                                    75g
濃鹽酸                                              25ml

方法：以接種環(huán)接種待試細菌的新鮮斜面培養物于鄧亨氏蛋白胨溶液中， 37℃培養24～48小時(shí)后（可延長(cháng)4～5天）。于培養液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，搖勻，靜置片刻后，沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液體變紅色者為陽(yáng)性反應。

      也可將一指頭大的脫脂棉，滴上兩滴歐立希氏試劑，再在同處加滴兩滴高硫酸鉀（K2S2O4）飽和水溶液，置于含培養液的被檢試管中，離液面約半寸，置燒杯內水浴煮沸為止，脫脂棉上出現紅色為陽(yáng)性。此法略繁，但省試劑且準確，因為將試劑加到液體中，吲哚和糞臭素均呈陽(yáng)性，而用此法，只是吲哚（它能揮發(fā)）呈陽(yáng)性反應。

      亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10％濃HCl溶液，然后以接種環(huán)刮取一環(huán)瓊脂的純培養物涂布于該濾紙上。

      細菌涂印周?chē)�呈藍色者為陽(yáng)性，細菌涂印周?chē)鸁o(wú)色澤變化或淡黃色者為陰性。

厭氧菌用蛋白胨水
蛋白胨                  20g   
葡萄糖                  10g   
硫乙醇酸鈉               1g  
Na2HPO4（無(wú)水）         2g
瓊脂                     1g
蒸餾水                  1000ml
加熱溶解，調整pH至7.4～7.6，過(guò)濾，分裝小試管，15磅高壓15分鐘。

 

上一篇：細菌生化試驗——枸櫞酸鹽利用試驗

下一篇：細菌生化試驗——硫化氫試驗