用全封閉薄膜過(guò)濾法進(jìn)行控制菌的檢查

【摘要】  目的  將智能集菌儀用于微生物限度檢查中控制菌的檢查 方法  用智能集菌儀的全封閉薄膜過(guò)濾系統檢查氯霉素滴眼液中的金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌。結果  陽(yáng)性對照呈陽(yáng)性，陰性對照呈陰性，供試品澄清無(wú)菌生長(cháng)。結論  該方法簡(jiǎn)便、準確，可用于微生物限度檢查。

    【關(guān)鍵詞】  全封閉薄膜過(guò)濾;控制菌;檢查

    在微生物限度檢查中，具有抑菌成分的藥物控制菌的檢查， 采用沉降法、離心沉淀法和薄膜過(guò)濾法， 些方法由于暴露于空氣中時(shí)間過(guò)長(cháng)而污染供試品，影響實(shí)驗結果的可靠性�，F將智能集菌儀用于控制菌的檢查，不僅可避免上述缺點(diǎn)，還能提高檢品的陽(yáng)性檢出率。

    1.1  儀器  HTY22000 集菌儀(杭州泰林醫療器械廠(chǎng)) ，HTY集菌培養器。 電熱恒溫培養箱。

    1.2  試劑  氯霉素滴眼液，0.9 %氯化鈉注射液。膽鹽乳糖增菌液、營(yíng)養肉湯培養基、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，均由中國生物制品檢定所提供。

    2.1  金黃色葡萄球菌的檢查　取氯霉素滴眼液10ml，加0.9 %氯化鈉注射液90ml ，制成1:10 的供試液。取供試液20ml 置裝有0.9%氯化鈉注射液的滅菌具橡皮塞的瓶中，將雙芯針頭插入橡皮塞內，通過(guò)集菌儀定向蠕動(dòng)加壓作用使供試品中微生物被截留在集菌培養器的濾膜上。用0.9%氯化鈉注射液500ml 沖洗濾膜，消除抑菌成分。然后將營(yíng)養肉湯培養液通過(guò)進(jìn)樣管直接注入兩 菌培養器中，其中1 瓶加入金黃色葡萄球菌1ml ，作陽(yáng)性對照實(shí)驗，同時(shí)用0.9%氯化鈉注射液做陰性對照。并將培養器放置在電熱恒溫箱中，經(jīng)37℃培養18～24h。觀(guān)察并記錄是否有菌生長(cháng)。其中接種金黃色葡萄球菌的應在24h內有菌生長(cháng)，陰性對照無(wú)菌生長(cháng)。

    2.2  銅綠假單胞菌的檢查  用膽鹽乳糖增菌液，方法同2.1。

    氯霉素滴眼液經(jīng)24h 培養后無(wú)菌生長(cháng)，陽(yáng)性對照呈陽(yáng)性，陰性對照呈陰性。符合《中華人民共和國藥典》2005 年版二部微生物限度檢查中控制菌的規定。

    具有抑菌成分的供試品，用HTY22000集菌儀與HTY集菌培養器組成的全封閉檢測系統進(jìn)行控制菌的檢查，具有簡(jiǎn)便、快速、準確、免受外源性污染的優(yōu)點(diǎn)，避免用其他方法而出現繁瑣的操作過(guò)程，確保了實(shí)驗結果的準確可靠。此法不僅適用于溶液劑、合劑、滴眼劑等液體制劑，某些固體制劑、軟膏劑以適當的溶劑溶解后，也可用此方法進(jìn)行控制菌的檢查，并能大大提高供試品的陽(yáng)性檢出率，使結果準確可靠。

作者：王淑杰，薛輝，于百青《中華醫藥雜志》