血液增菌肉湯、雙相血培養瓶與全自動(dòng)血培養系統應用對比

1 材料和方法

　　1.1 材料

   

　　1.1.1 標本來(lái)源

　　本院2000年1月～2002年12月門(mén)診及住院患者的血液及骨髓標本    

　　1.1.2 培養基

　　法國生物梅里埃公司的miniVITAL專(zhuān)用需氧血培養瓶、上海奧普生物技術(shù)公司的雙相需氧血培養瓶、浙江軍區后勤部衛生防疫檢驗所的血液增菌肉湯。   

　　1.1.3 儀器

　　法國生物梅里埃公司的miniVITAL全自動(dòng)血培養系統及VITEK32全自動(dòng)微生物分析系統。   

　　1.2 方法

  　成人采血5～10ml，嬰幼兒采血1～3ml，骨髓采1～2ml，2000年1～12月標本449份注入血液增菌肉湯、2001年1～12月標本1001份注入雙相需氧血培養瓶、2002年1～12月標本1028份注入miniVITAL專(zhuān)用需氧血培養瓶，分別按操作規程 ［2］  、miniVITAL全自動(dòng)血培養系統及VITEK32全自動(dòng)微生物分析系統操作說(shuō)明培養、分離、鑒定。

　　2 結果   

　　2.1 分離菌株 類(lèi)

　　增菌肉湯449份標本，陽(yáng)性48份，陽(yáng)性率10.69%，檢出5屬7種菌;雙相瓶1001份標本，陽(yáng)性245份，陽(yáng)性率24.48%，檢出9屬12種菌（含苛養菌2種）;miniVITAL培養系統1028份標本，陽(yáng)性228份，陽(yáng)性率22.18%，檢出11屬16種菌（含苛養菌4種）。  見(jiàn)表1。

　　表1 增菌肉湯、雙相瓶及miniVITAL培養系統檢出菌株種類(lèi) （略）

    　　

　　2.2 陽(yáng)性檢出時(shí)間及污染率

　　增菌肉湯陽(yáng)性檢出時(shí)間最快24h，最慢168h;24h檢出率2.08%（1/48），48h檢出率27.08%（13/48）;污染率1.11%（5/449）。雙相瓶陽(yáng)性檢出時(shí)間最快16h，最慢168h;24h檢出率9.39%（23/245），48h檢出率58.78%（144/245）;污染率0.60%（6/1001）。miniVIˉTAL培養系統檢出時(shí)間最快2.5h，最慢168h;24h檢出率60.53%（138/228），48h檢出率89.04%（203/228）;污染率0.39%（4/1028）。

　　3 討論

　　3.1 增菌肉湯、雙相瓶、miniVITAL 培養系統的血培養陽(yáng)性率分別 10.69%、24.48%、22.18%，分別檢出5屬7種菌、9屬12種菌（含苛養菌2種）、11屬16種菌（含苛養菌4種），說(shuō)明雙相瓶、miniVITAL培養系統比增菌肉湯 適于細    菌，特別是苛養菌生長(cháng)。

3.2 由于雙相瓶加入瓊脂斜面，減少了轉種環(huán)節，有利于細菌特別是苛養菌生長(cháng)，因此血培養陽(yáng)性檢出時(shí)間較增菌肉湯有所加快，而miniVITAL培養系統采用同源熒光技術(shù)，以CO 2 生成、pH值改變、氧化還原電位變化所致熒光下降的程度反映微生物的生長(cháng)，它可以15min判讀1次，因而使血培養陽(yáng)性檢出時(shí)間 大提高，實(shí)驗表明miniVITAL培養系統的24h、48h陽(yáng)性檢出率均遠高于雙相瓶及增菌肉湯。3.3 實(shí)驗顯示，由于采用了塑蓋和膠塞結合的瓶蓋工藝，使雙相瓶、miniVITAL培養系統血培養污染率僅分別為0.60%、0.39%，而無(wú)此工藝的增菌肉湯血培養污染率則高達1.11%�？傊�，由于富含細菌，尤其是苛養菌生長(cháng)所需的氨基酸、維生素及生長(cháng)因子等營(yíng)養素，含有可抗凝、抗補體、抗吞噬、拮抗某些抗菌藥物的聚茴香腦磺酸鈉，使雙相瓶、miniVITAL培養系統比增菌肉湯更有利于各類(lèi)病原菌快速生長(cháng);而采用塑、膠結合瓶蓋可減少雙相瓶、miniVITAL培養系統污染可能性;由于使用了同源熒光技術(shù)，自動(dòng)偵測技術(shù)，miniVITAL培養系統陽(yáng)性檢出時(shí)間大大快于雙相瓶及增菌肉湯。本次實(shí)驗表明miniVITAL培養系統能高速、準確地檢出包括苛養菌在內的 種病原菌，但成本較高，適于在省、市級的大、中型醫院及條件較好的縣級醫院使用，雙相瓶能較快、較準地檢出病原菌，適于在 般縣級醫院使用，而傳統增菌肉湯因其檢出率低，檢出速度慢而應逐步淘汰。

 

作者：郭 民 孟 偉

　　參考文獻    

　　1 周貴民.努力提高血液細菌培養陽(yáng)性率.中華醫學(xué)檢驗雜志，1999，22:69-70.

　　2 葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程，第2版.南京:東南大學(xué)出版社，1997:475-548.