小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗(1)

小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica）廣泛分布于自然界，是一種人畜共患的病原微生物，對人以腸道感染為主，并可成為各種疾病的病原。在食品和飲水等受到本菌污染時(shí)，往往可引起人的胃腸炎暴發(fā)，其癥狀表現與沙門(mén)氏菌食物中毒相似。檢驗以檢出該菌為主，用生化和血清學(xué)進(jìn)行鑒定。該菌生長(cháng)的最適溫度為22~29℃，但它可在0~4℃發(fā)育，為嗜冷性致病性細菌，因此，應特別引起注意的是，如被該菌污染的食品，雖在低溫保存，但不能防止其生存和繁殖，這與其他腸道致病菌所不同。

為加強食品衛生管理，必須提高對該菌的檢驗技術(shù)，建立和完善檢驗方法，根據實(shí)際應用，對該菌檢驗在原國家標準方法中所發(fā)現的問(wèn)題進(jìn)行了試驗研究后，對一些檢驗項目作了改進(jìn)，提出了本修訂方法，以代替原GB 4789.8－84。

 

 

一、檢驗方法

　

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　　1. 樣品采集和處理：與沙門(mén)氏菌食物中毒采集和處理相同。

2. 增菌培養：將食品校品接種到改良磷酸鹽緩沖液中，增菌液以1:10的比例混合，置4℃冰箱進(jìn)行冷增菌。

3. 堿處理：取肉及其制品等的冷增菌液0.5mL與堿處理液4.5mL混合15s。

4. 分離培養：將冷增菌液和堿處理的冷增菌液分別接種CIN-I和改良y培養基，培養于26℃48h后，在CIN-I平板上挑取紅色牛眼狀菌落。在改良y培養基上挑取無(wú)色透明不粘稠的菌落，進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。

5. 改良克氏雙糖試驗：將上述可疑菌落接種到改良克氏雙糖管中，于26℃、24h培養，將斜面和底部皆變黃者做進(jìn)一步生化鑒定。

6. 尿素酶試驗和動(dòng)力觀(guān)察：將改良克氏雙糖上的可疑培養物接種到尿素培養基上，注意接種量要大，挑取一接種環(huán)，振搖數秒鐘，放置26℃培養2~4h，然后將陽(yáng)性者接種兩管半固體，分別放26℃和37℃溫箱，培養24h檢查，如在26℃有動(dòng)力者，可進(jìn)行鏡檢和進(jìn)一步生化試驗。

7. 染色鏡檢：將上述可疑菌落做涂片染色，進(jìn)行顯微鏡觀(guān)察，呈革蘭氏陰性球桿菌，有時(shí)呈橢圓或桿狀，大小為0.8~3.0μm×0.8μm者做進(jìn)一步生化檢驗。

8. 生化試驗：將上述可疑菌落做下列主要生化試驗與其他相似細菌進(jìn)行鑒別。

V-P試驗、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗，山梨醇、甘露醇、蔗糖、棉子糖、鼠李糖等發(fā)酵試驗。

所有以上生化反應皆為26℃培養。

9. 血清學(xué)鑒定：除進(jìn)行生化學(xué)鑒定外，亦可做血清型別的鑒定。目前國內可生產(chǎn)27種O型血清因子，供各地使用，具體操作方法與沙門(mén)氏菌O因子血清分型相同。