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    致病性大腸埃希氏菌及其檢驗(1)



    錄入時(shí)間:2011-3-24 10:25:27 來(lái)源:食品伙伴網(wǎng)

     

    致病性大腸埃希氏菌是指能使人、動(dòng)物(尤其是嬰兒和幼齡動(dòng)物)感染及人食物中毒的一群大腸桿菌。

    在自然界中本菌分布廣泛,主要寄居場(chǎng)所是人和其它溫血動(dòng)物的腸道中,是一類(lèi)條件性致病菌。致病性大腸埃希氏菌的形態(tài)特點(diǎn)、培養特性和生化特性均與非致病性大腸埃希氏菌非常相似,以至難以區分,只能通過(guò)血清學(xué)的方法,從抗原結構的差異來(lái)區別。在致病性大腸埃希氏菌中,有些血清型能夠引起人的食物中毒,有些血清型能夠引起人的腸道內外感染。還有一些血清型的菌株能夠使畜禽發(fā)病,危害畜牧業(yè),降低畜產(chǎn)食品的質(zhì)量。致病性大腸埃希氏菌可從飲用水,未消毒牛乳,病畜臟器、禽類(lèi)及其人畜糞便污染的各種食品中分離出來(lái)。

    致病性大腸埃希氏菌屬主要分為五大類(lèi),首先根據發(fā)病機理分為三大類(lèi),

    1、產(chǎn)毒素型大腸埃希氏菌(ETEC),

    2、侵襲型大腸埃希氏菌(EIEC)

    3、腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)

    近來(lái)又提出另外兩類(lèi)

    4、即出血性大腸埃希氏菌(EHEC)

    5、腸粘附性大腸埃希氏菌(EAEC)

    但是,致病性大腸埃希氏菌的致病性是一個(gè)很復雜的問(wèn)題,也并非由某一方面的因素所決定。

    致病性大腸埃希氏菌中,一般認為能產(chǎn)生耐熱{ST)和不耐熱(LT)腸毒素的兩種菌株均可引起人的食物中毒。引起大腸埃希氏菌幣毒的主要是一些動(dòng)物性食品,如乳與乳制品、肉類(lèi)、水產(chǎn)品等,牛和豬是傳播這種病菌、引起中毒的主要原因。

    19967月在日本就發(fā)生了大腸桿菌0157型引起的食物中毒,造成9017多人中毒,10人死亡,其原因與生食蘿卜苗有關(guān),其中92例并發(fā)出血性腸炎及出血性尿毒癥。2001年,再江蘇、安徽等地爆發(fā)的腸出血性大腸桿菌0157:H7食物中毒,造成177人死亡,中毒人數超過(guò)2萬(wàn)人。

    如仔豬黃、白痢、豬水腫病、牛腹瀉和敗血癥等均可由大腸桿菌引起。

    一、生物學(xué)特性

    1.形態(tài)與染色特性

    菌體兩端鈍圓、中等大小,桿狀(有時(shí)呈卵圓形)、1—3um X 0.6um、周生鞭毛,能運動(dòng),不產(chǎn)生莢膜,革蘭氏陰性,而且一般是對堿性染料著(zhù)色較好,但有時(shí)兩端著(zhù)色較濃,要與巴氏桿菌區分開(kāi)來(lái)。

    2.培養特性

    1)需氧及兼性厭氧菌

    2)對營(yíng)養的要求不高,在普通瓊脂上就生長(cháng)良好,在15C-45℃范圍內均可生長(cháng),但最適生長(cháng)溫度為37℃,最適pH7.2—7.4。

    3)在普通瓊脂平板上培養24小時(shí),可形成圓形、凸起、光滑、濕潤、半透明、邊緣整齊、中等大小的菌落.其菌落與沙門(mén)氏菌比較相似,但是,大腸桿菌菌落對光(45角折射)觀(guān)察可見(jiàn)熒光。

    4)在肉湯培養基中生長(cháng)1824小時(shí)變?yōu)榫鶆驕,而后底部出現粘性沉淀物,并伴有臭味。

    5)部分菌落可出現β溶血。

    6)在遠藤瓊脂上長(cháng)成帶金屬光澤的紅色菌落

    7)在SS瓊脂平板上多不生長(cháng),少數生長(cháng)的細菌,也因發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸而形成紅色菌落;

    8)在伊紅美蘭瓊脂上形成具有金屬光澤的黑色菌落

    9)在麥康凱瓊脂上培養24小時(shí)后孤立菌落呈紅色

    3.生化特性

    1)可發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有些不典型的菌株不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵乳糖;

    2)不同菌株對蔗糖,衛矛醇、水楊苷發(fā)酵結果不一致。

    3)本菌可使賴(lài)氨酸脫鞍、不能使苯丙氨酸脫羧。

    4)不產(chǎn)生H2S,不液化明膠,不分解尿素,

    5)、不能在氰化鉀培養基上生長(cháng),靛基質(zhì)試驗陽(yáng)性,V-P試驗陰性,不利用枸櫞酸鹽。后四項生化特性是典型的大腸埃希氏菌,與此不一致的即為非典型大腸埃希氏菌菌。

    IMViC試驗:如IMViC試驗為+、+、-、-,且乳糖發(fā)酵,表明被檢物已有糞便污染,有發(fā)生腸道傳染病的危險,這是衛生細菌中常用的檢測指標。(I:吲哚形成試驗,M:甲基紅試驗,ViV-P試驗,C:枸櫞酸鹽利用試驗)

    4.血清學(xué)特性

    大腸埃希氏菌的抗原構造主要由菌體抗原(O),鞭毛抗原(H)和莢膜抗原(K)三部分組成。

    1O抗原

    成分為細胞壁上的糖、類(lèi)脂和蛋白質(zhì)復合物,也是細菌的內毒素,熱穩定性較強,高壓蒸汽處理2小時(shí)不被破壞。每一血清型只含有一種O抗原,本菌已發(fā)現有167O抗原,分別以阿拉伯數字表示。

    2H抗原

    為蛋白質(zhì);一種大腸埃希氏菌只有一種H抗原,無(wú)鞭毛則無(wú)H抗原,H抗原能在80度被破壞,也能被酒精破壞。H抗原共有64種。

    3K抗原

    是細胞外部的莢膜或的表面物質(zhì),又稱(chēng)包膜抗原。新分離的大腸埃希氏菌70%具有K抗原。根據K抗原耐熱的敏感性.可把K抗原分為A、B、L三類(lèi),共有103種,致病性大腸埃希氏菌的抗原主要為B抗原,少數為L抗原,B抗原與L抗原均可在煮沸后被破壞,A抗原耐熱性強,可耐受煮沸1小時(shí)而不被破壞。,

    O抗原可將大腸埃希氏菌分成若干血清群,再根據K抗原和H抗原進(jìn)一步分為若干個(gè)血清型或亞型,根據大腸埃希氏菌抗原的鑒定結果,寫(xiě)出其抗原式如O111K58(B)H12,一般認為H抗原與致病性無(wú)關(guān),因此,一般不需要進(jìn)行H抗原的鑒定。

    5.抵抗力

    抵抗力中等,各菌型之間存在差異。此菌對青霉素有中等抵抗力,對一般消毒劑都比較敏感。對氯尤為敏感,水中游離氯達到02mgL時(shí),即可殺死此菌。此菌在土壤中、水中及糞便中可存活數月以上。

    6.毒素特性

    有些大腸埃希氏菌產(chǎn)生腸毒素,

    1)不耐熱(LT)腸毒素(heat-labile enterotoxin,LT):化學(xué)成分為蛋白質(zhì),分子量較大,60℃ 30分破壞,具有免疫原性,可引起腸道分泌增加,出現腹瀉。

    2)、耐熱腸毒素(heat-stable enterotoxin,ST):分子量較小,無(wú)抗原性,100℃ 30分鐘,仍有活性,可引起腸分泌增加。

     

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