麝香百合組培快繁技術(shù)

百合是世界上著(zhù)名的切花品種之一,靠常規的小鱗莖分株方法繁殖,繁殖系數較低,1株百合每年只能得到1～3個(gè)小鱗莖[1]。有些種類(lèi)可用鱗片扦插繁殖,但往往容易腐爛。另外,百合長(cháng)期靠營(yíng)養繁殖,容易感染病毒病,而影響百合品質(zhì)[2]。組織培養快速繁殖技術(shù),能夠迅速去除病毒和更新品種,具有較高的經(jīng)濟價(jià)值和開(kāi)發(fā)潛力,因而得到廣泛的應用。近年來(lái),很多花卉研究者進(jìn)行了百合的組織培養繁殖研究,所選的外植體有珠芽、幼莖段、葉片、鱗片等[3 6],主要側重于不同外植體對百合成苗和脫毒效果的研究,而關(guān)于利用組培苗葉片基部進(jìn)行快速繁殖和結鱗莖的研究,報道較少[7]。本試驗以組培苗葉片基部為材料,對影響百合成苗和結鱗莖的兩類(lèi)主要激素進(jìn)行了系統研究,省去了對外植體消毒處理的過(guò)程,減少了污染機率,為將來(lái)大規模生產(chǎn)百合小苗和鱗球莖在理論和實(shí)踐上提供參考依據。 

     1　材料與方法 

     1.1　材料 

　　采用的百合品種為麝香百合(Liliumlongi flornm Thumb),英文名字為Easterlily。 

    1.2　方法 

　　取百合鱗片經(jīng)消毒后,接種于MS培養基上,誘導叢芽體,叢芽體繼代擴增后,剝取叢芽葉片基部進(jìn)行處理。 

    1.2.1　6BA和NAA處理　以MS為基本培養基,設計系列濃度的6 BA和NAA處理組合,6 BA(mg/L)為:0,0.5,1.0,2.0;NAA(mg/L)為:0,0.1,0.2,0.4。共16個(gè)處理組合,代號分別為:D11、D12至D44。每個(gè)處理組合接種3瓶,每瓶接10個(gè)葉片基部,長(cháng)度約為1cm。2個(gè)月后觀(guān)察統計,生根率以長(cháng)根植株占成苗植株的百分數進(jìn)行統計;結鱗莖率以結鱗莖植株占成苗植株的百分數進(jìn)行統計。 

    1.2.2　培養條件　百合適宜的培養溫度為22～25℃,光照強度為1000～1500lx,每日光照10～16h,相對濕度約為70%。 

    2　結果與分析 

 　 不同濃度激素組合對葉片成苗和結鱗莖的處理效果見(jiàn)表1。 

    2 1　成苗率 

　　成苗率是指所出的苗數占接種的葉基部總數的百分數。隨著(zhù)6 BA濃度的加大,成苗率呈降低趨勢。從4個(gè)濃度的6 BA看,不加6 BA的處理(D11、D12、D13、D14)成苗率最高,平均值為76 25%,說(shuō)明6 BA對成苗有抑制作用。而適量的NAA對成苗有一定的促進(jìn)作用,在這16個(gè)處理中,以D12處理成苗率最高。 

    2 2　增殖系數 

　　組培百合的基本目標之一是在短時(shí)間內大量繁殖小苗和球莖,所以提高增殖系數,可在短時(shí)間內獲得更多的小苗或球莖。綜合這16個(gè)處理,以D22和D43處理增殖系數最高,分別為:1.7和2.0;其次為D12、D24和D34,均為1.6。 

    2 3　結鱗莖率和鱗莖直徑 

　　結鱗莖率以不加6 BA的為最高,隨6 BA濃度加大,結鱗莖率下降;鱗莖直徑也有類(lèi)似的結果。表明6 BA對結鱗莖率和鱗莖直徑有抑制作用。 

    2 4　株高和生根率 

　　株高隨著(zhù)6 BA濃度的加大而降低,從1.7cm降到0.6cm;生根率以不加6 BA的為最高,平均值為90 5%,加大6 BA濃度明顯抑制百合生根。這說(shuō)明NAA對株高和生根的促進(jìn)作用,隨著(zhù)6 BA濃度加大被抵消一部分或完全被抑制。 

    2 5　小苗的栽培和處理 

　　對于苗高3～4cm的已生根帶有鱗莖的小苗,可打開(kāi)瓶口煉苗3～5d,然后移入沙∶土(1∶1)的基質(zhì)中,保持溫度15～25℃,濕度70%以上,50%自然光照,可得到較高成活率。所用沙土最好是經(jīng)過(guò)滅菌的,如果用未滅菌的沙土,小苗莖部容易受細菌和霉菌的侵染而腐爛,影響成活率;用高溫滅菌的沙土混合物,小苗不容易得病,長(cháng)勢較未滅菌的健壯,且成活率較高。對處于芽苗階段的小苗,可繼代至MS+NAA0 03ｍｇ/Ｌ的培養基中,促進(jìn)其生長(cháng);對沒(méi)有生根的小苗可繼代至1/2MS+活性炭5%的生根培養基中,進(jìn)行生根培養,然后再進(jìn)行移栽。 

    3　小結與討論 

綜合以上試驗結果得出:6 BA主要有提高增殖系數的作用,但抑制結鱗莖和減小鱗莖直徑,同時(shí)抑制植株長(cháng)高和生根,這與趙祥云[5]的研究結果相似。NAA有促進(jìn)成苗、植株長(cháng)高和生根的作用,但過(guò)多NAA會(huì )使氣生根增多,不利于小苗生長(cháng)。從成苗和結鱗莖率角度看,本試驗最優(yōu)組合為D12;從提高增殖系數角度看,以D43最好;如果把成苗和提高增值系數結合起來(lái),則D22最優(yōu)。所以適當地調整6 BA和NAA的濃度比,才能得到理想的結果。本試驗對影響百合成苗和增殖的2種激素進(jìn)行了初步研究,從中選出了利于成苗和增殖的最優(yōu)組合。王愛(ài)勤[7]等認為糖的濃度對試管結鱗莖有影響,關(guān)于糖濃度及如何調控和增加其他一些激素使百合在試管內快速結鱗莖和增大鱗莖直徑等技術(shù),有待于進(jìn)一步研究

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