日本圓葉海棠(MalusprunifoliaBorkhvar.ringoAsami),別名丸葉海棠,是日本培育蘋(píng)果苗木中廣泛應用的一種基砧,其顯著(zhù)特點(diǎn)是扦插繁育能力強,扦插成活率可達90%以上。經(jīng)過(guò)組培脫毒的圓葉海棠生長(cháng)量大,抗逆性強,嫁接親和性好,具有更穩定的生長(cháng)勢,用圓葉海棠扦插繁殖取代實(shí)生播種繁殖是蘋(píng)果育苗中的一次革命。本文建立的Et本圓葉海棠快繁體系,可在短期內獲得大量無(wú)毒無(wú)性系砧木,實(shí)現周年生產(chǎn),滿(mǎn)足蘋(píng)果苗木生產(chǎn)對砧木的需求。
1培養條件
①誘導培養基:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03mg/L;②增殖培養基:MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;③壯苗培養基:MS+6-BA0。1mg/L+NAA0.02mg/L;④生根培養基:1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3種培養基均加蔗糖35g/L,生根培養基蔗糖為23g/L,pH值5.8,培養溫度為25。t2,光照強度為1500~2000Lx,光照時(shí)間為14小時(shí)/天。
2生長(cháng)與分化情況
2.1無(wú)菌材料的處理
選取日本圓葉海棠春季萌發(fā)抽生的新梢莖尖或帶腋芽的莖段,剪成長(cháng)3~5cm的莖段置于三角瓶中,先用少許洗衣粉浸洗2~3分鐘,然后用自來(lái)水沖洗到?jīng)]有泡沫為止,在超凈工作臺上,用0.1%HgCl:消毒8分鐘,再用無(wú)菌水淋洗5~6次,濾紙吸干水分,剪成長(cháng)1~2cm的單芽莖段或帶幾個(gè)較小葉片的莖尖,接種于誘導培養基上。
2.2不定芽的分化及叢生芽增殖
芽在誘導培養基上培養20天后開(kāi)始萌動(dòng),伸長(cháng)成無(wú)菌苗。在無(wú)菌條件下,將上述伸長(cháng)苗再切段,每段1~2個(gè)芽,接人增殖培養基中,30天后可產(chǎn)生大量叢生芽,將叢生芽再切段,接種在相同培養基上繼代培養。增殖系數為7~8。
2.3壯苗培養
在增殖培養基中,獲得大量的叢生芽,但芽分化較多,植株生長(cháng)較細弱,因此,將經(jīng)過(guò)繼代增殖的小植株,在生根前接種在壯苗培養基中,進(jìn)行壯苗培養,獲得健壯的無(wú)根試管苗。
2.4誘導生根及移栽
取株高2.5~3cm小苗接種到生根培養基上培養2周左右,生根率達98%。然后在調控溫室馴化生根20天,當試管苗根長(cháng)2~3cm、莖干微呈紅色、葉大而濃綠時(shí),開(kāi)口練苗3天,然后用鑷子夾出試管苗,栽入已配好營(yíng)養土(珍珠巖、麥茬土和河沙按l:2:1混合)的六棱型營(yíng)養缽中,用0.1%多菌靈消毒后,保持80%的濕度,兩周后開(kāi)始長(cháng)出新根和新葉,成活率達86%。當長(cháng)出2~4片真葉時(shí)開(kāi)始移人大田,成活率達98%。
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