葡萄組織培養快速繁育技術(shù)

用組織培養法繁殖葡萄, 可達到優(yōu)良萄萄快速育苗的目的, 以滿(mǎn)足生產(chǎn)需要。同時(shí)也是工廠(chǎng) 化育苗和脫毒苗木快速繁殖的重要手段, 并能常年進(jìn)行, 縮短了苗木繁殖周期,加快新品種的推廣應用。��

　　1 試管苗的初代培養 ��

植物組織培養是無(wú)菌地培養植物的技術(shù), 因此, 離體進(jìn)行葡萄試管繁殖, 脫除病毒,胚胎花藥和子房培養, 細胞和原生質(zhì)培養, 離體保存等, 都必須使用無(wú)菌材料。葡萄組織初代 培養, 其繁殖材料多取自大田, 常帶有大量細菌和霉菌,必須進(jìn)行消毒方可獲得無(wú)菌材料 。材料采集在組培前3d的晴天上午, 取帶腋芽的葡萄半木質(zhì)嫩莖, 剪取后立即拿入室內 , 先用自來(lái)水反復沖洗, 除去病蟲(chóng)枝、傷殘枝, 減除大葉片, 裝入廣口瓶進(jìn)行消毒。用無(wú)菌 操作技術(shù), 倒入無(wú)菌水浸泡和沖洗; 倒去無(wú)菌水, 加入0.1%升汞(內加2%的95%酒精)浸泡材 料, 并劇烈搖動(dòng)6～9min, 剪去受傷端面, 剪成單芽莖段, 接入培養基中。每瓶一段, 正插入內。標號后放到培養室培養, 一周后檢查, 如未污染, 基本上不會(huì )再污染。通過(guò)對美人指、早紅提等品種的生產(chǎn), 取得了90%以上無(wú)污染成苗率。

　　2 試管苗的繼代繁殖 ��

對初代培養合格或引進(jìn)的試管苗, 一般采用MS、B5、GS等培養基, 具體做法如下: ��

　　(1)穿好工作服, 戴上工作帽, 用潔凈的水洗手, 再用75%的酒精棉球擦手消毒。

�� (2)取無(wú)菌原種苗瓶放于超凈臺, 用75%酒精棉球仔細擦試包頭紙及苗瓶外體,并解開(kāi)包頭紙捆扎線(xiàn)繩。 ��

　　(3)將彎剪刀、槍狀鑷子浸入75%酒精中, 用時(shí)取出在火焰上澆15～30s, 晾涼備用。��

　　(4)將無(wú)菌原種苗瓶的包頭紙連同棉塞一同拔下, 放在超凈臺一旁, 瓶口在火焰上燒5～10s , 用冷卻的剪刀將瓶?jì)刃∶缂舫蓡窝壳o段, 下端稍長(cháng), 上端較短, 但剪口距芽至少0.5cm 以上。母株基部要留一個(gè)芽, 使其再發(fā)。剪下的單芽莖段,用無(wú)菌鑷子逐個(gè)夾出, 放入新的 培養基瓶?jì)? 并使葉子和芽露出培養基。150ml三角瓶插5個(gè)左右莖段, 插完后將瓶口在火 焰上轉動(dòng)燒一圈, 旋好棉塞和包上包頭紙, 用繩扎好, 注明品種名稱(chēng)和時(shí)間等。如此反復的 接好所有苗子,并放到培養室。一般每月轉接增殖3次。��

　　3 試管苗的培養 ��

將接種后的培養苗瓶, 放在培養室的架上, 培養室晝夜溫度保持在22～28℃, 新轉接的 苗瓶應放在培養架上層, 上層溫度略高易于生根。濕度以70%為宜,光照2000～3000lx的日光燈。��

　　4 移栽 ��

移栽多在冬季或春季進(jìn)行。��

　　(1) 光培煉苗。培養室培養的試管苗生長(cháng)達瓶口, 有3～4枚正常葉片時(shí), 根系生長(cháng)良 好, 連 同培養瓶轉入溫室或大棚內, 逐步去掉瓶塞, 放在干凈的溫室中, 2～4萬(wàn)lx的自然光下 煉 苗5～7 d, 當瓶口長(cháng)出油亮的葉片, 幼莖變淡紅色時(shí)即可出瓶。 ��

　　(2)沙培煉苗。最好備有下鋪電熱線(xiàn)并能調節溫度的沙床, 使床溫維持在25℃左右。以0.6 c m間距布置電熱線(xiàn), 其上鋪墊2 cm的土, 壓平, 再鋪8～10 cm的干凈細河沙, 濕度在12%左 右 , 即手捏成團落地能散。 ��

　　清晨或傍晚, 將培養瓶?jì)鹊挠酌巛p輕倒出, 洗掉根上附著(zhù)的培養基, 栽入沙床, 株 距3～4 cm, 行距8～10 cm, 每平方米大約栽400～500株苗。栽入沙床后, 蓋好小拱棚, 最初3 d, 棚 內溫度保持在25℃左右, 最高不超過(guò)30℃, 最低不低于20℃。相對濕度保持在80%～95%; 光 照0.7～1��0萬(wàn)lx。6～7 d, 拆除臨時(shí)小拱棚。 ��

　　(3)溫室營(yíng)養袋煉苗。經(jīng)沙培后的合格苗, 小心挖出, 在空氣濕度不低于70%, 溫度20～25℃ , 無(wú)直射光下, 栽入肥土: 沙: 腐熟有機肥為1∶1∶0.2的營(yíng)養缽中。最初幾天對溫、光、濕的管理與沙培苗相同。��

　　(4)大田苗圃移栽。選疏松肥沃排灌水方便、距溫室較近且日照良好的地塊作苗 圃, 將營(yíng)養 袋苗移栽苗圃即可。小苗有3個(gè)月的生長(cháng)期, 并及時(shí)打掉副梢, 促進(jìn)枝芽老化成熟, 達到合格優(yōu)質(zhì)苗。