菊花的組織培養

由于菊花的病毒病種類(lèi)比較多，而且危害也較為嚴重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的擴張和蔓延，因此莖尖脫毒培養和組培快繁生產(chǎn)母本植株，再生產(chǎn)扦插苗的技術(shù)，對優(yōu)良品種的脫病毒和復壯有著(zhù)重要意義。

 

  一、培養基配方

 

  誘導萌芽培養基：MS+BA0.3毫克/升+NAA0.1毫克/升

 

  增殖培養基：MS+BA0.1毫克/升+NAA0.1毫克/升

 

  生根培養基：1/2MS+NAA0.1毫克/升

 

  二、培養程序

 

  菊花以組培快繁為目標最好選莖尖、莖段、花蕾為外植體培養增殖效果最好。選取用扦插苗培育的無(wú)病蟲(chóng)害、健壯的植株，在其上取材，可保持其優(yōu)良品種特性。在取材前2~3周，將入選株置于溫室內培養，不要對葉面噴水，這樣能夠提高滅菌的成功率。接種前切取帶腋芽的莖段或未開(kāi)的花蕾，這時(shí)花瓣外有一層薄膜包著(zhù)，里面是無(wú)菌的。滅菌處理時(shí)莖尖的嫩葉不要剝得太干凈，以免傷口面暴露太大，使莖尖受到過(guò)大的損害。滅菌莖段除去葉片，只留一小段葉柄。

 

  材料初步切割后，用洗衣粉水漂洗三次，用自來(lái)水沖凈后，將其放入含有三滴吐溫的0.1%升汞溶液中消毒12分鐘，并不時(shí)搖動(dòng)，然后用鑷子將其夾入含三滴吐溫的8%次氯酸鈉溶液中浸泡8分鐘（超凈工作臺上）并不時(shí)搖動(dòng)。于無(wú)菌水中漂洗二次后待用。切割將莖切去1小段，這樣可減少滅菌藥物的毒害。切除莖尖上的幼葉；若是蕾須剝去花被，露出里面半球形的花序軸，再視其大小縱切4~6塊，接種到誘導培養基中。生長(cháng)及分化外植體經(jīng)培養后，一般20～40天莖尖處可分生出新芽，莖斷的葉腋處也會(huì )萌發(fā)出叢生芽，基部生長(cháng)的愈傷組織也會(huì )分化出新芽。而花蕾外植體經(jīng)過(guò)15～20天的培養，會(huì )形成愈傷組織；再經(jīng)過(guò)20～30天的培養，愈傷組織就會(huì )分化出較多的叢生芽。將從以上外植體誘導分化出的叢生芽，分切成數塊放入增殖培養基中繼代培養。

 

  開(kāi)始分化率和分化苗的數量都較小，隨繼代次數增加，分生苗很快就能夠增多起來(lái)。增殖的方式除誘導叢生芽增殖外，還可用莖切段作微型扦插來(lái)繁殖，它的增殖速度也完全能滿(mǎn)足快速繁殖的要求。方法是用各種再生途徑產(chǎn)生的嫩莖為材料，培養其長(cháng)到一定高度時(shí)，把它切成節段，一般是一葉為一段，然后將切斷的基部插入增殖培養基中培養。28天后，腋芽即可長(cháng)成新的小植株，重復上述的方法不斷進(jìn)行繼代培養，從而達到快繁殖目的。生根培養在繼代培養基中培養25～30天進(jìn)行轉瓶時(shí)，將那些生長(cháng)正常，苗高達到2～3厘米的單株嫩莖切下，插到生根培養基中，7天后可形成有突起的淡綠色根原基，經(jīng)過(guò)2周培養后，即可生根。菊花的生根非常容易，在多種生長(cháng)素濃度下，乃至不加任何生長(cháng)素的培養基上，都可以獲得100%的生根效果。

 

  三、質(zhì)量標準及調控技術(shù)

 

  菊花出瓶苗的標準時(shí)葉色濃綠，粗壯，苗高2～3厘米，有根且根系發(fā)達。經(jīng)過(guò)渡培養的下地苗，則要求小苗葉色正常，濃綠，植株矮壯。

 

  菊花在培養瓶中培養的溫度適應范圍較寬，在22℃～28℃都可以。但溫度過(guò)低，會(huì )使苗質(zhì)脆弱，生長(cháng)速度延緩；溫度過(guò)高培養基水分蒸發(fā)較快，致使植株還未分化到所需程度，就開(kāi)始出現干萎。所以溫度最好在24℃～26℃之間。培養室光照每天12小時(shí)，光照在1000～4000勒克斯都可以生長(cháng)，但是光照過(guò)弱會(huì )使幼苗出現徒長(cháng)現象，莖軟葉細弱，低質(zhì)量的組培苗，出瓶后的過(guò)渡成活率也低。因此光照以2500～3000勒克斯為宜。用來(lái)生根的單株嫩莖必須有1～2厘米高，在生根培養基上生長(cháng)15天后，苗高才能達到2～3厘米，有2~3條根長(cháng)達1～2厘米的不定根。最好生根率達100%后，才可出瓶煉苗。如若還有少部分植株未長(cháng)出足夠的根系時(shí)，可將瓶苗在上述環(huán)境培養條件下延緩幾日，待其長(cháng)出根系時(shí)再出瓶。

 

  四、出瓶苗的過(guò)渡管理

 

  菊花的有根苗移栽成活容易，將有根的植株從瓶中用鑷子輕輕夾出，洗凈根部黏附的瓊脂，栽入珍珠巖基質(zhì)中。移栽前期將空氣濕度保持在75%～85%之間，遮光率為40%，環(huán)境溫度控制在20℃～26℃，就可使試管苗在20天左右移栽成活，并長(cháng)出新根新葉。經(jīng)1～2個(gè)月的管理，便可定植于富含腐殖質(zhì)，經(jīng)過(guò)滅菌處理的砂質(zhì)壤土中。菊花喜歡微潮偏干的土壤環(huán)境，在定植時(shí)不必施用基肥，隨著(zhù)小苗對外界環(huán)境的適應，可每隔1～2周追稀液體肥料一次。由于菊花有忌高溫、喜涼爽的習性，菊花試管苗定植后，不可接受過(guò)強的日光照射，應該采用先遮蔭再逐漸增加光照的管理方法。由于菊花的過(guò)渡成活率比較高，所以有時(shí)也可以從瓶?jì)瘸鰜?lái)就直接下地栽培。