一種新型腸桿菌科試驗卡的實(shí)驗室應用評價(jià)

　Laboratory evaluation of test cards for detection of bacteria.

　　HAN Xiao-sheng，ZHANG Shu-fang，WU Duo-rong，et al.

　�。╨aboratory Department of Haikou Municipal People's Hospital，Haikou570208，Hainan，P.R.China）     

　　    

　　摘要:目的 了解天地人微生物腸桿菌科試驗卡的性能質(zhì)量。方法 分別運用天地人微生物腸桿菌科試驗卡與VITEK32儀和K-B法對臨床分離出的206株腸桿菌科細菌的鑒定和藥敏進(jìn)行平行比較。 結果 VITEK32儀鑒定符合率在99%以上，天地人鑒定符合有198株，符合率96.1%，兩種方法鑒定率差異無(wú)顯著(zhù)性（χ 2 =0.44，P>0.05）;對藥敏用天地人試驗卡與K-B法對13種抗生素敏感度進(jìn)行逐一比較，其中敏感度存在58次差異，差異性為2.17%，經(jīng)統計學(xué)處理差異無(wú)顯著(zhù)性（χ 2 =4.82，P>0.05）。 結論 天地人試驗卡具有很好的準確性、可靠性，適合實(shí)驗室的常規檢驗。

   

　　關(guān)鍵詞:試驗卡;腸桿菌科;評價(jià)

   

　　腸桿菌科細菌臨床感染日益嚴重，已逐漸成為醫院感染的重要病原菌，占臨床感染病原菌的70%以上 ［1］ 。所以，臨床實(shí)驗室準確、快速地鑒定這類(lèi)細菌，對臨床診斷和治療有重要意義。近年來(lái)，各種微生物自動(dòng)（半自動(dòng)）鑒定系統不斷出現，在目前眾多的腸桿菌科鑒定系統中，VITEK全自動(dòng)儀鑒定準確、快速、性能好，公認為目前鑒定的金標準。天地人分析系統是湖南天地人生物科技有限公司產(chǎn)品，所有試驗卡同時(shí)包括生化和藥敏實(shí)驗。為了了解天地人系統性能，本文使用天地人微生物腸桿菌科試驗卡與VITEK32系統和K-B法對臨床分離的206株腸桿菌科細菌進(jìn)行鑒定和藥敏比較，取得滿(mǎn)意的結果，現報告如下。

 

　　1 材料與方法

   

　　1.1 菌株來(lái)源 收集�？谑腥嗣襻t院自2004年2月～2005年2月一年中住院和門(mén)診病人送檢標本分離出的206株腸桿菌科細菌;另外標準菌株2株:大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCCl0031（實(shí)驗室保存）。

   

　　1.2 試劑和儀器來(lái)源 天地人微生物腸桿菌科試驗卡，為湖南天地人生物科技有限公司產(chǎn)品;VITEK32鑒定儀GNI卡（法國梅早埃公司產(chǎn)品）;M—H培養基，購買(mǎi)M—H干粉瓊脂按照說(shuō)明配制（英國Oxoid公司產(chǎn)品）;13種藥敏紙片均購于英國OXoid公司，并在有效期內使用。

   

　　1.3 實(shí)驗方法 嚴格按照梅里埃VITEK32和天地人試驗卡操作說(shuō)明進(jìn)行，對206株腸桿菌科細菌進(jìn)行同步鑒定，K—B法實(shí)驗按照《全國臨床檢驗操作規程》 操作，結果判斷解釋嚴格按照2003NCCLS標準進(jìn)行。

 

　　2 結果

   

　　2.1 鑒定結果 結果顯示，VITEK32對206株腸桿菌科細菌和2株標準菌株鑒定吻合率皆都在99%以上。天地人系統鑒定符合有198株，符合率96.1%，不符合有8株，不符合率占3.9%，經(jīng)卡方檢驗顯示兩者差異無(wú)顯著(zhù)性（χ 2 =0.44，P>0.05），見(jiàn)表1。其他8株不符合中，其中2株陰溝腸桿菌鑒定為產(chǎn)氣腸桿菌;1株肺炎克雷伯菌鑒定為土生克雷伯菌，還有3株鑒定為鼻臭克雷伯菌;1株奇異變形菌鑒定為普通變形桿菌;1株普通變形菌鑒定為奇異變形菌。

    

　　表1 兩種方法對206株腸桿菌科細菌的鑒定差異（略）

   

　　2.2 藥敏結果 本文使用天地人試驗卡與K—B法兩種方法的每一菌株每種藥物的敏感度進(jìn)行逐一比較，共進(jìn)行206×13=2678次敏感度比較，其中有58次敏感度存在差異（都是K-B法“敏感”，天地人“中介”），占2.17%，經(jīng)統計學(xué)處理顯示兩者差異無(wú)顯著(zhù)性（χ 2 =4.82，P>0.05）。

   

　　3 討論

   

　　天地人微生物分析系統是目前國內生產(chǎn)的第一套較完整的微生物分析專(zhuān)利產(chǎn)品 ［2］ ，包括微球菌科、鏈球菌科、腸桿菌科等多個(gè)菌科的試驗卡，本文就腸桿菌科試驗卡與梅里埃VITEK32和K—B法分別進(jìn)行鑒定和藥敏比較。天地人試驗卡對206株腸桿菌鑒定符合有198株，符合率96.1%，經(jīng)卡方檢驗顯示兩種方法鑒定率無(wú)顯著(zhù)性差異;藥敏實(shí)驗存在58次敏感度差異，占2.17%，經(jīng)統計學(xué)檢驗顯示亦無(wú)顯著(zhù)性差異。并且經(jīng)實(shí)驗室保存2株標準菌株不同時(shí)間段（每1個(gè)月）進(jìn)行重復監測，其鑒定和藥敏結果都在允許范圍并重復性好。顯示出該卡很好的準確性和可靠性，表明該卡能很好地滿(mǎn)足臨床微生物室工作需要。

   

　　該試驗卡鑒定范圍覆蓋腸桿菌科24個(gè)菌屬，本實(shí)驗包含8個(gè)菌屬，其中鑒定大腸埃希菌有很高準確率，對克雷伯菌屬、腸桿菌屬和變形菌屬鑒定稍微有差異，主要由于發(fā)酵試驗的MEL（密二糖）、SOR（山梨醇）、SUC（蔗糖）試驗和靛基質(zhì)試驗結果不易判讀，導致鑒定錯誤，歐陽(yáng)育琪等［2］ 對發(fā)酵試驗問(wèn)題提議對所有發(fā)酵試驗滴加無(wú)菌礦物油，經(jīng)筆者多次重復試驗確證效果良好，值得推廣采用。另偶有產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題如有些試驗孔壁、口都沾有未反應試劑，個(gè)別試驗孔還有無(wú)試劑現象，這也會(huì )對鑒定結果造成影響，從而造成以上鑒定差異。藥敏卡測定包括19種抗塵素，本文只對其中13種抗生素進(jìn)行評比，結果與K—B法無(wú)明顯差異，說(shuō)明藥敏試驗結果準確可靠，對臨床醫師指導用藥起著(zhù)重要作用。除了系統問(wèn)題之外，人為因素也會(huì )直接影響結果準確性。如延長(cháng)培養時(shí)間會(huì )使各生化試驗顏色改變，導致鑒定錯誤;菌懸液濃度配制過(guò)高會(huì )使藥敏產(chǎn)生假耐藥，過(guò)低則產(chǎn)生假敏感;試驗卡從冰箱取出立即做實(shí)驗，也會(huì )影響結果。其它因素如細菌純化和老化程度、檢驗者操作水平、培養溫度都會(huì )影響其結果準確性。只要嚴格按照試驗要求操作并注意一些影響因素，該試驗卡就能表現出它的良好性能。通過(guò)對比，顯示該卡操作簡(jiǎn)便，成本低廉，鑒定符合率高，藥敏結果準確可靠，它既能滿(mǎn)足臨床需要，又可減少成本費用，不失為一種好的方法，尤其可在基層醫院推廣使用。

作者：韓小勝，張淑芳，吳多榮，張冬霞，馮瑞瓊

　　參考文獻:

    

　�。�1］陳學(xué)民，馬筱玲.腸桿菌科細菌編碼技術(shù)的研究和臨床應用［J］.安徽醫科大學(xué)學(xué)報，1999，3，34（1）:71～72.   

　�。�2］歐陽(yáng)育琪，蔣晶星，陳亞光.“天地人”微生物分析系統的使用效果評價(jià)［J］.衡陽(yáng)醫學(xué)院學(xué)報，1999，10，27（4）:414～416.