厭氧菌需在無(wú)氧環(huán)境中才能生長(cháng),故在常規的檢測中不易檢出。而厭氧菌中的破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌又具有很強的致病性。因此,提高膿汁中厭氧菌的檢出率在臨床上非常重要。筆者在多年的醫學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗教學(xué)中對厭氧菌的檢測體會(huì )如下。
1 取材正確
對疑似厭氧感染的化膿性炎癥,取材時(shí)在膿腫部位要做消毒處理,然后用無(wú)菌注射器抽取膿汁,由于厭氧菌在空氣中存活時(shí)間短,所以必須在床邊接種,因此,在采樣前要準備好厭氧培養基、厭氧缸、厭氧袋、酒精燈、接種環(huán)等接種器材,取出膿汁后立即接種,這樣才能提高檢出率。
2 選用適宜的厭氧培養基
對創(chuàng )傷引起的厭氧感染形成的膿汁大多由帶芽胞的梭菌如破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌等厭氧菌引起,選用的培養基應為皰肉培養基、血瓊脂平板等,而對于引起口腔、腸道、胸腔等部位的厭氧菌感染多由無(wú)芽胞類(lèi)桿菌引起應選用GAM血瓊脂(加5%脫纖維血,1μg/ml氯化血紅素)和牛心腦浸液血瓊脂平板,這樣有利于細菌生長(cháng)。
3 根據生長(cháng)特點(diǎn)作初步鑒定
取出37℃培養7天的皰肉培養基,觀(guān)察肉渣的變化,破傷風(fēng)梭菌在皰肉培養基中生長(cháng)良好,肉渣不被消化,輕微變黑;產(chǎn)氣莢膜梭菌在皰肉中經(jīng)數小時(shí)培養后可明顯生長(cháng),產(chǎn)生大量氣體,肉渣變?yōu)榉奂t色,但不被消化;肉毒梭菌在皰肉中生長(cháng)良好,而表面形成奶油性浮渣,肉渣被消化。
4 菌體鑒定
厭氧菌的鑒定主要依賴(lài)于形態(tài)特征和生化反應,形態(tài)特征一般是做革蘭染色,觀(guān)察革蘭陽(yáng)性、陰性和有無(wú)芽胞,帶芽飽的厭氧菌大多為革蘭陽(yáng)性桿菌,而無(wú)芽胞的厭氧菌多為革蘭陰性桿菌,由此作初步分類(lèi)。生化反應是在初步鑒定的基礎上作進(jìn)一步鑒定,有意義的生化試驗有明膠水解、牛乳消化和糖類(lèi)分解,如產(chǎn)氣莢膜梭菌分解乳糖產(chǎn)酸、在牛乳培養基中產(chǎn)生“洶涌發(fā)酵”現象、液化明膠等,而破傷風(fēng)梭菌無(wú)液化明膠和發(fā)酵牛乳現象。
5 敏感藥物
帶芽胞的梭桿菌和不帶芽胞的類(lèi)桿菌對藥物敏感性不同,梭桿菌對萬(wàn)古霉素選擇敏耐藥,而對卡那霉素敏感,類(lèi)桿菌對萬(wàn)古霉和卡那霉素都耐藥,所以應選用敏感藥物。由于厭氧菌感染常伴需氧菌混合感染,臨床上常聯(lián)合用藥,才能有效控制感染。
綜上所述,要提高膿汁中厭氧菌的檢出率,要在多個(gè)環(huán)節上加以重視,嚴格按照操作規程,才能提高檢出率,將厭氧培養作為膿汁分泌物的常規培養,有效地治療厭氧菌引起的化膿性炎癥,使患者早日康復。
作者;李慧霞 中華醫學(xué)實(shí)踐雜志 2005 年 2 月 第 4 卷 第 2 期 作者單位:118002遼東學(xué)院醫學(xué)院實(shí)驗中心
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