臨床微生物是一門(mén)實(shí)踐性很強的學(xué)科。隨著(zhù)醫學(xué)事業(yè)的發(fā)展和進(jìn)步,微生物檢驗人員不僅要具備扎實(shí)的醫學(xué)理論知識,同時(shí)也要有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗,結合聯(lián)系臨床,充分利用所學(xué)的微生物學(xué)知識和技術(shù),不斷提高快速、準確的診斷結果。應用簡(jiǎn)便的基本操作,選擇合適的培養方法,結合先進(jìn)、快速的鑒定技術(shù)和藥物敏感試驗方法,盡可能快地提供檢驗結果給臨床,指導臨床醫師及時(shí)合理使用抗生素藥物。
1 重視顯微鏡檢查
對于留取標本進(jìn)行革蘭染色,一方面可以掌握標本質(zhì)量以確定進(jìn)行培養或重新留取標本;另一方面通過(guò)鏡檢對某些細菌可以作出初步分類(lèi)。
對于膿性分泌物或穿刺液進(jìn)行革蘭染色鏡檢亦可作出大致分類(lèi)或初步診斷。對泌尿系男性尿道和女性分泌物涂片革蘭染色鏡檢,查到白細胞內或外有革蘭陰性雙球菌,是診斷淋病的重要依據。腦脊液墨汁染色檢查新型隱球菌,對于臨床診斷隱球菌性腦膜炎有重要價(jià)值。痰、胸水涂片抗酸染色查抗酸桿菌,對于診斷肺結核有重要意義。糞便球桿菌比例檢查,對于腸道菌群失調的診斷有重要幫助。糞便暗視野檢測弧菌的運動(dòng)情況,對于霍亂的診斷有意義。
2 用顯色培養基對微生物快速鑒定
在分離培養基中加入檢測某些細菌特異性酶的底物(由產(chǎn)色基團和微生物代謝物如糖苷類(lèi),氨基酸或肽類(lèi)兩部分組成,通常為無(wú)色),在特異性酶作用下游離出產(chǎn)色基團并產(chǎn)生熒光或顯示一定顏色,用紫外燈觀(guān)察菌落產(chǎn)生的熒光或直接觀(guān)察菌落顏色即可對細菌做出鑒定。
如CHRO真菌培養基:白色念珠菌(綠色),熱帶念珠菌(藍色),克柔念珠菌(粉紅色)。FGM培養基:大腸埃希菌(藍色)。SSMAC培養基:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的菌落為黃色。
3 免疫學(xué)檢查技術(shù)
全自動(dòng)酶免疫熒光法:如VIDAS全自動(dòng)酶免疫熒光系統檢測HAV,HBV,HIV,沙眼衣原體等。
膠體金標記酶免疫法:檢測HAV,HBV,HIV,CMV,弓形蟲(chóng)等。
膠乳凝集法:用于檢測肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌A、B、C組,流感嗜血桿菌,隱球菌等。
明膠顆粒凝集法:用于檢測肺炎支原體。
4 核酸探針
將一段已知順序的單鏈核酸(DNA或RNA)加以標記(α32pdNTP,HdNTP,SdNTP)就成為核酸探針,可用來(lái)探測標本中與它具有互補的核酸堿基順序。
應用PCR技術(shù)檢測:結核分支桿菌,幽門(mén)螺桿菌,軍團菌,支原體,衣原體,HBV,HCV,HIV,CMV等。
5 基因芯片技術(shù)利用
基因芯片技術(shù)檢測標本中病原微生物已獲得較大成功,如檢測HIV基因,結核分支桿菌基因以及其它細菌基因分型,菌種鑒定,細菌耐藥基因的檢測等。
6 全自動(dòng)微生物分析儀和全自動(dòng)血培養儀
全自動(dòng)微生物分析儀解決了微生物鑒定的繁瑣問(wèn)題,縮短了報告發(fā)出時(shí)間,全自動(dòng)血培養儀的應用,為無(wú)菌體液(腦脊液,胸腹水,膽汁,關(guān)節液)的細菌分離提供了捷徑,陽(yáng)性率大大提高。
總之,微生物學(xué)檢驗技術(shù)應密切結合臨床,在平時(shí)工作中不斷學(xué)習、分析和總結,努力提高微生物檢驗的技術(shù)水平,快速準確地為臨床提供病原學(xué)及藥敏結果,指導臨床合理利用抗生素,做好細菌耐藥性監測、追蹤和控制,以及流行病學(xué)特征分析研究工作,更好地為臨床服務(wù)。
作者:李燕英 北京理工大學(xué)醫院檢驗科 中華醫學(xué)實(shí)踐雜志 2005 年 8 月 第 4 卷 第 8 期
上一篇:微生物檢驗常規鑒定技術(shù)
下一篇:微生物檢驗比對考核的檢驗思路探討