不動(dòng)桿菌屬的耐藥性分析

【摘要】  目的 研究許昌地區不動(dòng)桿菌屬的產(chǎn)酶情況及其耐藥性。方法 收集2009年1～9月臨床分離的74株不動(dòng)桿菌屬細菌，雙紙片協(xié)同實(shí)驗法檢測其超廣譜β�矁弱０访傅漠a(chǎn)生情況，改良的Hodge試驗法檢測其碳青霉烯酶的產(chǎn)生情況，并對這些細菌的耐藥情況進(jìn)行分析。結果 74株不動(dòng)桿菌屬細菌中，11株產(chǎn)生超廣譜β�矁弱０访�，2株產(chǎn)生碳氫酶烯酶，其余62株非產(chǎn)酶菌對各種抗生素的耐藥率也較高。結論不動(dòng)桿菌屬細菌由于產(chǎn)酶及自身的耐藥特性，對抗生素的耐藥性較強，要重視該屬細菌抗生素的應用。

 

【關(guān)鍵詞】  不動(dòng)桿菌屬;超廣譜β�矁弱０访�;耐藥性

 

　　Abstract:Objective To study the acinetobacter bacteria generation circumstances in Xuchang Area and their antibiotics resistance. Methods To collect 74 strain Acinetobacter bacteria from January 2009 to September 2009, two�瞤aper�瞔ooperate�瞭est determined which one generated broad spectrum β�瞝actamase, Improved Hodge�瞭est determined which one generated KPC, in addition, analyze the bacterial antibiotics resistance of those did not generate enzyme. Results In those 74 strain Acinetobacter bacteria,there were 11 strains that generated ESBLs,2 strains generated KPC, Though the rest 62 strains didn’t generate enzymes, their antibiotics resistance was wide. Conclusion The antibiotics resistance of Acinetobacter bacteria is very strong because of generation of enzyme and their own character. we must attach importance to the bacteria so as to prevent their antibiotics resistance.

 

　　Key words:Acinetobacter bacteria;extended spectrum β�瞝actamase;antibiotics resistance

 

　　不動(dòng)桿菌屬細菌廣泛分布于自然界，是醫院常見(jiàn)的條件致病菌之一。近些年來(lái)隨著(zhù)醫療技術(shù)的不斷進(jìn)步，大量激素和高效廣譜抗菌藥物在臨床的廣泛使用，導致不動(dòng)桿菌的分離率越來(lái)越高，特別是鮑曼不動(dòng)桿菌，不但耐藥性強，且出現了一些菌株的廣泛耐藥，給臨床治療帶來(lái)了很大困難。為了更好的了解不動(dòng)桿菌屬的院內感染情況，作者針對我院2009年1～9月臨床分離的不動(dòng)桿菌屬細菌進(jìn)行了全面分析，為臨床提供科學(xué)可靠的數據資料，更好地指導臨床用藥。

 

　　1 材料和方法

 

　　1.1 菌株來(lái)源 ①臨床菌株各病區送檢的各種標本，包括呼吸道標本64例(86.5%)，分泌物標本6例(8.1%)，胸水1例(1.35%)，膿液標本1例(1.35%)，腹腔引流物1例(1.35%)，口腔刮取物1例(1.35%)。②質(zhì)控菌株包括大腸埃希菌ATCC25922、ATCC25923，肺炎克雷伯菌ATCC700603(購自衛生部臨床檢驗中心);鮑曼不動(dòng)桿菌ATCC19606(購自中國科學(xué)院微生物所)。

 

　　1.2 試劑和儀器 血平板購自鄭州蘭森生物技術(shù)有限公司，中國蘭瓊脂和MH瓊脂購自杭州天和微生物試劑有限公司，藥敏紙片包括頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸、美羅培南均購自杭州天和微生物試劑有限公司，菌株鑒定和MIC藥敏測試采用珠海迪爾生物工程有限公司的相應測試板。

 

　　1.3 菌種鑒定 所有菌株按常規方法分離，經(jīng)革蘭氏染色、氧化酶反應、觸酶試驗，將菌株做成0.5麥氏單位懸液，加入各對應測試板的小孔中，經(jīng)35℃孵育24 h，在其對應軟件上判讀結果。

 

　　1.4 碳青霉烯酶檢測方法(改良Hodge法) 在MH平板上均勻涂布ATCC25923的大腸埃希菌標準株，在平板中央放置一個(gè)10 μg的美羅培南紙片，用接種環(huán)將待測菌株自紙片方向向外劃線(xiàn)，在其相對的一邊接種陰性對照菌，35℃孵育18～24 h，如果大腸埃希菌向著(zhù)美羅培南紙片方向生長(cháng)，則碳青霉烯酶陽(yáng)性。

 

　　1.5 超廣譜β�矁弱０访笝z測方法 將待測菌液稀釋成0.5麥氏單位，將菌液均勻涂布在MH平板上，將頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸4個(gè)紙片貼在平板上，35℃孵育18～24 h，若出現頭孢他啶/棒酸比頭孢他啶和或頭孢噻肟/棒酸比頭孢噻肟的抑菌圈直徑大5 mm，則該菌產(chǎn)超廣譜β�矁弱０访戈�(yáng)性，即ESBLs陽(yáng)性。以大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603為標準質(zhì)控菌株。

 

　　2 結果

 

　　74株不動(dòng)桿菌屬細菌中，鮑曼不動(dòng)桿菌53株，醋酸鈣不動(dòng)桿菌6株，洛非不動(dòng)桿菌11株，溶血不動(dòng)桿菌4株，這些不同種的細菌的耐藥性差異較大，其中，耐藥性最為廣泛的是鮑曼不動(dòng)桿菌，它除對黏菌素、碳氫酶烯類(lèi)、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和美滿(mǎn)霉素5類(lèi)藥物耐藥率較低外，對其他抗生素的耐藥性均超過(guò)50%，有8種藥物的耐藥率超過(guò)90%，對復方新諾明的耐藥率達到100%。另外，溶血不動(dòng)桿菌雖然分離率較低，但它的耐藥性?xún)H次于鮑曼不動(dòng)桿菌，對多數抗生素的耐藥率較高。與之相比，醋酸鈣不動(dòng)桿菌的耐藥率最低，其次是洛菲不動(dòng)桿菌(見(jiàn)表1)。表1 不動(dòng)桿菌屬不同菌種的耐藥率比較(%)

 

　　74株不動(dòng)桿菌屬細菌中，有11株產(chǎn)生超廣譜β�矁弱０访�，2株產(chǎn)生碳青霉烯酶，13株產(chǎn)酶菌中，11株超廣譜β�矁弱０访溉�部來(lái)自鮑曼不動(dòng)桿菌，1株碳青霉烯酶來(lái)自鮑曼不動(dòng)桿菌，另1株碳青霉烯酶來(lái)自溶血不動(dòng)桿菌，產(chǎn)酶后細菌的耐藥性在原有基礎上又進(jìn)一步加強，甚至有3株細菌出現了除黏菌素敏感外的廣泛耐藥。

 

　　3 討論

 

　　不動(dòng)桿菌是一類(lèi)無(wú)動(dòng)力、專(zhuān)性需氧、非發(fā)酵、氧化酶陰性、硝酸鹽還原試驗陰性、革蘭氏染色陰性的球桿菌，臨床標本中分離到的不動(dòng)桿菌絕大多數是鮑曼不動(dòng)桿菌，其他菌株引起的感染比較少見(jiàn)。據熊勁芝等報道[1]，不動(dòng)桿菌屬細菌在臨床分離出的非發(fā)酵菌中居第2位，僅次于銅綠假單胞菌。我院不動(dòng)桿菌屬的分離率在2009年1～9月為1.56%，在總的細菌分離率中排第4位，主要分布于呼吸道和各種分泌物標本中，不動(dòng)桿菌屬的分離率低于熊勁芝等報道的2.59%水平[1]，也低于張靜萍等報道的4.44%的水平[2]。分離的這些不動(dòng)桿菌屬細菌有57株分離自ICU、CCU、EICU等重癥監護病區，占77%，說(shuō)明在這些醫院感染的高�？剖乙�加強院內感染的控制，尤其加強對機械通氣管道的消毒處理，加強對介入性導管的留置時(shí)間的控制，盡最大能力改善病房空氣質(zhì)量。

 

　　不動(dòng)桿菌屬細菌的耐藥性較強，對氨芐青霉素，一代、二代頭孢菌素，氯霉素和一代喹諾酮類(lèi)抗菌藥物大多耐藥，一般情況下，對復方新諾明、哌拉西林/他唑巴坦、氟喹諾酮類(lèi)敏感性較好，對碳青霉烯類(lèi)敏感性也較好。但是近年來(lái)，不動(dòng)桿菌對這些敏感性較好的藥物的耐藥性有上升趨勢，就本文而言，鮑曼不動(dòng)桿菌不但沒(méi)有對復方新諾明表現出較好的敏感性，反而對它的耐藥率高達100%，屬內總耐藥率也高達89.9%。另外，鮑曼不動(dòng)桿菌對氟喹諾酮類(lèi)的左氧氟沙星的耐藥率高達83.0%。對氨基糖甙類(lèi)的慶大霉素和阿米卡星耐藥率分別是93.9%和63.4%，這與鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶的氨基糖苷修飾酶的基因表達有關(guān)，該類(lèi)基因常與含多種耐藥基因的基因盒插入到整合子上一起傳播。國外曾有文獻報道[3]，氨芐西林/舒巴坦治療鮑曼不動(dòng)桿菌療效與亞胺培南相似。我院情況卻非常不同，鮑曼不動(dòng)桿菌對氨芐西林/舒巴坦的耐藥率高達62.3%，而對亞胺培南和美羅培南保持了較低的4.1%和3.8%的耐藥率，這明顯低于彭敬紅等報道的13.5%[4]的水平。同時(shí)，在我院對不動(dòng)桿菌屬的治療中，黏菌素一直保持了較好的療效，其耐藥率為0，遠低于陸春雨等的報道[5]，這在很大程度上緩解了臨床的治療難度。

 

近年來(lái)的研究資料顯示，不動(dòng)桿菌屬的耐藥機制包括染色體基因突變、外膜孔蛋白改變、藥物主動(dòng)外排系統和產(chǎn)生滅活酶等。Chau等報道的adeB基因表達增強可使鮑曼不動(dòng)桿菌產(chǎn)生多藥耐藥[5]，adeB基因是Magnet等首次在鮑曼不動(dòng)桿菌中檢測到的細菌主動(dòng)外排泵基因[6]，近年來(lái)已成為國內外學(xué)者研究的熱點(diǎn)，我們有望通過(guò)越來(lái)越多的對細菌的研究，逐漸改善細菌的耐藥性，為臨床治療難治性感染找到出路。

作者：任麗娟　    作者單位：許昌市中心醫院檢驗科，河南許昌 461000

 

【參考文獻】

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　　[2] 張靜萍，朱婉，禇云卓，等.2001～2006年鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性變遷分析[J].中華醫院感染學(xué)雜志，2009，19(2)：217-219.

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　　[4] 彭敬紅，黃漢菊，婁國平，等.鮑曼不動(dòng)桿菌感染病區分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學(xué)雜志，2009，19(2)：220-221.

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