呼吸科病房腸桿菌科細菌耐藥性分析及產(chǎn)ESBLs菌株的檢出

【摘要】  目的 檢測呼吸科病房腸桿菌科細菌的耐藥性和產(chǎn)ESBLs的情況。方法 收集85株臨床分離菌株采用MIC檢測耐藥性，采用篩選試驗和確證試驗檢測ESBLs。結果 亞胺培南的敏感性最高，三代頭孢的耐藥性最高，ESBLs檢出率為41.2%。結論 呼吸科病房腸桿菌科細菌產(chǎn)ESBLs比率較高，對三代頭孢耐藥率高，建議使用亞胺培南和酶抑制劑類(lèi)抗生素。

【關(guān)鍵詞】  腸桿菌科 耐藥性 ESBLs

 

    隨著(zhù)現代醫學(xué)的迅速發(fā)展和抗生素的廣泛應用，細菌的耐藥性問(wèn)題日趨嚴重，呼吸科病房作為醫院的主要科室病房，病原菌耐藥現象尤為突出。其中，超廣譜β-內酰胺酶（extended spectrum β-lactamases,ESBLs）因其底物范圍廣，傳播速度快，引起了廣泛關(guān)注。腸桿菌科細菌是主要的產(chǎn)ESBLs菌，易引起醫院感染的爆發(fā)流行。為了解呼吸科病房腸桿菌科細菌的耐藥性及產(chǎn)ESBLs的情況，筆者收集了我院呼吸科病房2006年1月～2007年6月檢出的腸桿菌科細菌85株，進(jìn)行分析總結。

    1.1  菌株來(lái)源  從我院2006年1月～2007年6月呼吸科病房送檢的痰液、尿液、血液、胸腹水和分泌物等感染性標本中，分離到腸桿菌科細菌85株，其中肺炎克雷伯菌30株，大腸埃希菌22株，銅綠假單胞菌20株，不動(dòng)桿菌屬6株，奇異變形桿菌2株，沙雷氏菌3株，嗜麥芽窄食單胞菌2株。

    1.2  質(zhì)控菌株  由衛生部臨床檢驗中心提供，包括大腸埃希菌（ATCC25922）和肺炎克雷伯菌（ATCC700603）。

    1.3  培養和鑒定及藥敏試驗方法  細菌培養按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版進(jìn)行，采用英國SENSITITRE熒光快速微生物鑒定/藥敏分析系統鑒定細菌和抗生素敏感試驗，按照美國臨床實(shí)驗室標準委員會(huì )（NCCLS）2004版藥敏指南為結果判斷標準。

    1.4  初篩試驗  按NCCLS初篩標準，在紙片法藥敏試驗中，只要符合下列任何指標:頭孢他啶≤22mm，頭孢曲松≤25mm，頭孢噻肟≤27mm，氨曲南≤27mm，即為產(chǎn)ESBLs可疑菌株。

    1.5  紙片確證試驗  用頭孢他啶（CAZ,30μg/片）和頭孢他啶加克拉維酸（CAZ/CLV,30μg/10μg）；頭孢噻肟（FTX, 30μg/片）和頭孢噻肟加克拉維酸(FTX/CLV,30μg/10μg),分別測量?jì)煞N紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑，加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑相比≥5mm可確診為ESBLs菌株。

    1.6  統計學(xué)處理  對產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs菌株進(jìn)行χ2檢驗。

    2.1  產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性率  腸桿菌科細菌85株共檢出產(chǎn)ESBLs菌35株，產(chǎn)酶率41.2%。其中，肺炎克雷伯菌產(chǎn)酶株14株（產(chǎn)酶率46.7%），大腸埃希菌產(chǎn)酶株9株（產(chǎn)酶率40.9%），銅綠假單胞菌產(chǎn)酶株8株（產(chǎn)酶率40%），不動(dòng)桿菌產(chǎn)酶株2株（產(chǎn)酶率33.3%），其余產(chǎn)酶株為變形桿菌1株，沙雷氏菌1株。

2.2  產(chǎn)ESBLs菌與非產(chǎn)ESBLs菌藥敏結果比較  采用微量稀釋法檢測臨床常用18種抗生素的最低抑菌濃度（MIC），結果表明產(chǎn)ESBLs菌的MIC均高于非產(chǎn)ESBLs菌，對β-內酰胺類(lèi)抗生素有較高的耐藥率，產(chǎn)酶菌對18種抗生素的耐藥率均明顯高于非產(chǎn)酶菌。見(jiàn)表1。表1  產(chǎn)ESBLs菌（n=35）和非產(chǎn)ESBLs菌 (n=50) 耐藥率比較

超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)又稱(chēng)氧亞氨β-內酰胺酶,是以能滅活窄譜和廣譜頭孢菌素、單環(huán)類(lèi)抗生素及抗G-桿菌青霉素等抗生素為特征的β-酰胺酶，屬于A(yíng)mbler分類(lèi)的A類(lèi)，按Bush分類(lèi)屬2be群［1］，大多數是TEM-1、TEM-2、SHV-1酶的突變體。自1983年在歐洲首次發(fā)現，世界各地均有產(chǎn)ESBLs菌流行的報道。研究表明ESBLs多由質(zhì)粒介導，能通過(guò)接合、轉導和轉化等方式使耐藥基因在菌屬間廣泛傳播，有較廣的水解底物譜。ESBLs主要由腸桿菌產(chǎn)生，以肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為代表，本次調查ESBLs陽(yáng)性率為41.2%，與一些地區報道的結果略有差異［2］。產(chǎn)ESBLs菌株往往有多重耐藥現象，ESBLs的耐藥基因編碼經(jīng)常與其他的耐藥基因聯(lián)合而使耐藥性更加復雜。例如，與氨基糖苷類(lèi)及磺胺類(lèi)藥物的耐藥基因聯(lián)合，而同時(shí)出現對氨基糖苷類(lèi)及磺胺類(lèi)藥物耐藥［3］。本次研究結果表明產(chǎn)ESBLs菌株除對亞胺培南和阿米卡星的耐藥率相對較低外，對三代頭孢菌素類(lèi)、單酰胺類(lèi)（氨曲南）及廣譜青霉素類(lèi)（哌拉西林）均呈高度耐藥。林尤仕等推薦使用碳青酶烯類(lèi)（如亞胺培南）、β-內酰胺酶類(lèi)抗生素加酶抑制劑、頭孢類(lèi)抗生素（如頭孢西�。�、其他類(lèi)型的抗生素（阿米卡星）等治療產(chǎn)ESBLs菌引起的感染［4］。產(chǎn)ESBLs菌株體外藥敏試驗顯示并非對所有青霉素類(lèi)及頭孢類(lèi)抗生素耐藥，但NCCLS規定上述抗生素及單環(huán)β-內酰胺類(lèi)抗生素均應報告耐藥。調查中發(fā)現，同一菌株常會(huì )出現一定時(shí)期的爆發(fā)流行，應引起重視�？啥ㄆ谶M(jìn)行病房空氣消毒和院內環(huán)境消毒，強化護理清潔工作，減少致病菌傳播。已感染患者應及時(shí)進(jìn)行細菌鑒定和藥敏試驗，合理使用抗生素，并對ESBLs進(jìn)行動(dòng)態(tài)監測，對臨床抗感染治療具有重要意義。

作者：杜海燕《中華醫學(xué)實(shí)踐雜志》

  1 朱衛民，錢(qián)元恕.β-內酰胺酶動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展及臨床意義.國外醫藥·抗生素分冊，1998，19(6)：445.

2 馬越，李景云，張新妹.2002年臨床常見(jiàn)細菌耐藥性監測.中華檢驗醫學(xué)雜志，2004，27：38-45.

3 王力紅，石海鷗，張京利.重癥監護病房醫院感染前瞻性研究.中華醫院感染學(xué)雜志，2002，12（4）：268-270.

4 林尤仕，陳海.臨床分離細菌耐藥性監測及治療對策.中國熱帶醫學(xué)，2003，3（2）：208-209.