產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌臨床分布及耐藥性分析

【摘要】  目的 了解汨羅市人民醫院分離的大腸埃希菌臨床分布和耐藥特點(diǎn)，為臨床合理用藥和控制大腸埃希菌感染提供依據。方法采用K-B 紙片法和VITEK22系統對分離的216株大腸埃希菌進(jìn)行ESBLs檢測和藥敏分析。結果 216株大腸埃希菌標本來(lái)源，痰分離出80株（37.04 %），其次為尿液53株（24.54 %）、膽汁36 株（16.67 %）等；產(chǎn)ESBLs 大腸埃希菌陽(yáng)性檢出率為30.56%（66株）；產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌，對青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、氨曲南耐藥率較高，對頭孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦耐藥率較低，對亞胺培南和美洛培南耐藥率為零。結論 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌具有多重耐藥性，要重視產(chǎn)ESBLs菌株的檢測，治療其所致感染時(shí)，需根據藥敏結果合理選用有效抗菌藥物。

【關(guān)鍵詞】  大腸埃希菌 分布 耐藥性 產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶

    ［Abstract］  Objective  To get the message of the distribution and antibiotic resistance of Escherichia coli in our hospital，and provide reliable evidence for doctor to use antibiotic reasonably and control the infection of Escherihia coli.Methods  A total of 216 strains of E.coli were detected with ESBLs and analysis of antimicrobial sus ceptibility by Kirby-Bauer disk and VITEK22 system.Results  Among 216 strains of E.coli，80 strains were isolated from sputum，accounted for 37.04%；53 from urine，accounted for 24.54%；36 from bile，accounted for 16.67 %.ESBLs production rate of E.coli were 30.56%.The resistance of E.coli with ESBLs to most antibiotics was much higher than those without ESBLs.And E.coli demonstrated much higher resistant rate to penicillins，cephalosporins，quinolones，aztreonam and much lower to cefoperazone/sulbactam and piperacillin-tazobactam.No strains were found to be resistant to imipenem and meropenem.Conclusion  ESBLs-producing E.coli is multi-drug resistant to antibiotic，we must pay attention to ESBLs detection，reasonable choice of antibiotic should be in term of result of antibiotic resistant test to cure the E.coli infection.

    ［Key words］  Escherichia coli；distribution；antibiotic resistance；ESBLs

    近年來(lái)，隨著(zhù)廣譜抗生素長(cháng)期廣泛的使用和大量介入性診療技術(shù)的發(fā)展，醫院感染越來(lái)越嚴重。大腸埃希菌是醫院感染重要致病菌，可以導致多部位感染，甚至敗血癥。產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的腸桿菌科細菌的耐藥問(wèn)題已成為當前全球最重要的細菌耐藥問(wèn)題之一。大腸埃希菌是腸桿菌科產(chǎn)ESBLs的代表性細菌，其產(chǎn)ESBLs菌株日益增多。為探討大腸埃希菌的臨床分布及耐藥趨勢，對汨羅市人民醫院2005年1月～2007年12月住院患者感染標本分離出的216株大腸埃希菌進(jìn)行分析，現將結果報告如下。

    1.1  菌株來(lái)源  （1）實(shí)驗菌株:收集我院住院患者送檢的痰液、尿液、血液、腹腔積液、膽汁、傷口分泌物等標本，經(jīng)分離鑒定的大腸埃希菌216株。（2）質(zhì)控菌株:大腸埃希菌ATCC25922購自中國藥品生物制品檢定所，按照美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì )（NCCLS）2004年版標準執行。

    1.2  菌株分離鑒定  各類(lèi)標本分別接種血平板、麥康凱平板，經(jīng)35 ℃培養18～24 h分純。鑒定采用法國生物梅里埃公司的VITEK22系統，藥敏采用K-B紙片法，抗生素藥敏紙片阿米卡星（AMK）、氨芐西林（AMP）、氨曲南（ATM）、頭孢他啶（CAZ）、環(huán)丙沙星（CIP）、頭孢曲松（CRO）、頭孢哌酮/舒巴坦（CFS）、頭孢噻肟（CTX）、左氧氟沙星（LVX）、慶大霉素（GEN）、亞胺培南（IMP）、美羅培南（MER）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、復方新諾明（SXT）、妥布霉素（TOB）、呋喃妥因（F）購自中國藥品生物制品檢定所。實(shí)驗方法與判定標準按美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì )（NCCLS）2004年版的規定。

    1.3  ESBLs確證試驗  采用NCCLS 1999年推薦的ESBLs表型確認試驗進(jìn)行:頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸和頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸，任一組抑菌環(huán)直徑相差≥5 mm者確認為產(chǎn)ESBLs菌株。

    1.4  統計學(xué)分析  采用WHONET 5.3 軟件進(jìn)行統計。

    2.1  大腸埃希菌的分布  汨羅市人民醫院2005年1月～2007年12月，在各類(lèi)送檢標本中共分離出大腸埃希菌216株，其標本來(lái)源見(jiàn)表1。（1）標本分布:痰80株（37.04 %），尿液53株（24.54 %），膽汁36 株（16.67 %），陰道分泌物15株（6.94%），血液9 株（4.17%），前列腺液8株（3.70 %），腹腔積液8株（3.70 %），其他（支氣管分泌物、創(chuàng )面分泌物等）7株（3.24%）。（2）科室分布:內科病房分離112株（51.85 %），其中呼吸內科65株（30.09%），腎內科35株（16.20%）；外科病房分離68株（31.48 %），其中泌尿外科35株（16.20%），神經(jīng)外科20株（9.26%）；ICU 分離22株（10.19 %）；其他科室14 株（6.48 %）。表1  大腸埃希菌標本來(lái)源及產(chǎn)ESBLs菌陽(yáng)性率

    2.2  產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌陽(yáng)性率  216株大腸埃希菌共檢測出產(chǎn)ESBLs菌株66株，占33.56%。產(chǎn)ESBLs菌株在痰液中的檢出率為45.00%；血液中為44.44%；尿液中為24.53%；膽汁中為22.22%；陰道分泌物中為13.33%；前列腺液、腹腔積液和其他標本中均為12.50%。產(chǎn)ESBLs菌株在住院患者標本中的檢出陽(yáng)性率見(jiàn)表1。

    2.3  耐藥率  產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥性分析，見(jiàn)表2。表2  150株產(chǎn)ESBLs與66株非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌

    20世紀80年代由于大量三代頭孢抗菌藥物應用于臨床，導致了產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的出現。ESBLs屬于Bush分組的2be類(lèi)，Ambler分子分類(lèi)的A類(lèi)，此類(lèi)酶由TEM-1、TEM-2及SHV-1發(fā)生單點(diǎn)或多點(diǎn)突變而來(lái)，對抗生素作用的特點(diǎn)是能水解所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)及單環(huán)β-內酰胺類(lèi)等藥物，但對頭霉素及碳青霉烯類(lèi)敏感，能被β-內酰胺酶抑制劑所抑制［1，2］。

    本結果顯示，我院分離的216株大腸埃希菌主要來(lái)源于痰標本，占所有標本的37.04 %，其次為尿液和膽汁。其中產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌66株，陽(yáng)性率達30.56%，低于余奇松等［3］報道的ESBLs陽(yáng)性率49.03%，高于陳茶［4］報道的27.16%。臨床送檢標本分離的菌株中ESBLs的檢出率依次為痰、血液、尿液。大腸埃希菌科室分布在內科主要為呼吸內科和腎內科，與吳敏等［5］報道的相符，外科主要為泌尿外科和神經(jīng)外科，ICU所占比率為10.19%高于神經(jīng)外科。本實(shí)驗中采用頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸和頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸同時(shí)檢測ESBLs，可減少產(chǎn)ESBLs菌株的漏檢率［6］。

    產(chǎn)ESBLs細菌在攜帶有ESBLs 的質(zhì)粒同時(shí)可攜帶有對氨基糖苷類(lèi)、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)等抗菌藥物的耐藥基因，對喹諾酮類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)和磺胺類(lèi)等臨床常見(jiàn)抗菌藥物表現出多重耐藥性。從表2藥敏結果顯示，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對三代頭孢及慶大霉素、氨曲南、氨芐西林的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌，因此臨床上應盡量避免使用此類(lèi)抗菌藥物。盡管產(chǎn)ESBLs菌株體外藥敏試驗并非對所有的頭孢菌素類(lèi)抗生素耐藥，但NCCLS規定不論體外藥敏試驗是否耐藥，產(chǎn)ESBLs菌株均應視為對所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南耐藥［7］。本調查中產(chǎn)ESBLs 菌株對亞胺培南和美洛培南的敏感率為100%，證實(shí)碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物對產(chǎn)ESBLs菌的高度活性；頭孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦也顯示出了較低的耐藥性分別為4.55%和16.67%，可能與其含有β-內酰胺酶抑制劑有關(guān)。但也有報道［7］隨著(zhù)頭孢哌酮/舒巴坦在臨床上的廣泛應用，對其耐藥的產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌逐年增多，耐藥率逐年增加。在今后的抗感染選藥時(shí)，針對ESBLs的特點(diǎn)，臨床治療應首選碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物，其次可選用頭孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦等β-內酰胺酶抑制劑復合物抗菌藥物，阿米卡星也表現出較低的耐藥性，但由于不良反應較大限制了其在臨床廣泛應用的可能。

    產(chǎn)ESBLs菌的多重耐藥性、耐藥機制的復雜性、治療的困難性，給臨床抗菌藥物的選擇造成很大壓力，因此要積極采取應對措施:臨床醫師要規范合理使用抗菌藥物；廣泛開(kāi)展ESBLs感染的前瞻性監測，及時(shí)準確地檢測產(chǎn)ESBLs菌；提高醫務(wù)人員對醫院感染的認識，切斷傳播途徑，防止交叉感染；及時(shí)了解細菌的耐藥性變遷，指導臨床醫師用藥。

 作者：何瀚

  1 Bush K，Jacoby GA，Medeiros AA.A functional classification scheme for β-lactamases and its correlation with molecular structure.Antimicrob Agents Chemother，1995，39:1211-1233.

2 Sturenburg E，Mack D.Extended-spectrum beta-lactamases:implications for the clinical microbiology laboratory，therapy，and infection control.J Infect，2003，47:273-295.

3 余奇松，郭世輝，黃小紅，等.產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐藥性分析.中華醫院感染學(xué)雜志，2007，17（7）：878-880.

4 陳茶.大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌超廣譜β-內酰胺酶的檢測及耐藥特性.中華醫院感染學(xué)雜志，2002，12（1）:73-74.

5 吳敏，鄧建平，姚春紅，等.大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶菌株的分布及耐藥性分析.中華醫院感染學(xué)雜志，2007，17（4）：455-456.

6 NCCLS.National Committee for Clinical Laboratory Standards for antimicrobial susceptibility testing.Ninth informational supplement.M100-S9NCCLS，1999，19（1）：14-17.

7 年華，褚云卓，王倩.醫院感染大腸埃希菌耐藥性變化分析.中華醫院感染學(xué)雜志，2007，17（4）：452-454.