銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶檢測及其對20種抗生素的耐藥性分析

【摘要】  目的 了解佛山地區銅綠假單胞菌臨床分離產(chǎn)誘導型β內酰胺酶及其耐藥性。方法 采用美國DADE產(chǎn)Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析儀及其N(xiāo)C21鑒定及藥敏板和符合NCCLS標準的Ver Sion 22分析軟件，對128株銅綠假單胞菌檢測產(chǎn)誘導型β內酰胺酶和對20種抗生素的敏感性。結果 （1）銅綠假單胞菌對頭孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦、環(huán)丙沙星、阿米卡星、頭孢吡肟、亞胺培南的敏感性高達57.0%~80.0%之間。妥布霉素、哌拉西林、慶大霉素次之，而其他頭孢菌素敏感性低下。（2）128株銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶者115株（89.8%），在產(chǎn)誘導型β內酰胺酶菌株中，哌拉西林/三唑巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、安曲南誘導銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶的出現率為53.9%~80.0%。（3）產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株對哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、頭孢吡肟、頭孢他啶、環(huán)丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性顯著(zhù)高于不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株，而氨芐西林/舒巴坦、復方新諾明的敏感性則完全相反（P＜0.05）。結論 佛山地區抗生素誘導銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶率較高，哌拉西林/三唑巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、安曲南是強誘導劑，對于產(chǎn)酶菌株可選擇環(huán)丙沙星、阿米卡星或聯(lián)合使用耐酶的抗生素。

【關(guān)鍵詞】  銅綠假單胞菌；誘導型β內酰胺酶；抗生素；抗藥性

    ［Abstract］  Objective  To investigate the pseudomonas aeruginosa isolated from Qingyuan hospitals which produce inducible β-lactamase and their bacterial resistance.Methods  128 pseudomonas aeurginosa produce inducible β-lactamase and the susceptibility to 20 antibiotics were performed by Micro Scan Auto Scan-4 and plate NC21which was produced in USA,Ver Sion 22 analysis software according to the guidance of NDDLS was used.Results  (1)In the 128 pseudomonas aeurginosa,the sensitive percentages to Ceftazidime,Piperacillin/Tazobactam,Ciprofloxacin,Amikacin,Cefepime,Imipenem carieties from 62.6%to 80.0%,other antibiotics had less susceptibility.(2)115 strains inducible β-lactamase in 128 pseudomonas aeruginosa(89.8%),which induced by Piperacillin/Tazobactam,Ceftazidime,Imipenem rates were from 64.3% to 86.1%.(3)115 strains inducible β-lactamase sensitive percentages to Piperaciuin/Tazobactam,Amikacin,Cefepime,Ceftazidime,Ciprofloxacin and Tobramycin were significantly higher than those non-inducible β-lactamase,but the sensitive percentages to Ampicillin/sulbacatam,were just on the contrary.Conclusion  The rates of antibiotics inducing pseudomonas aeurginosa produce inducible β-lactamase are high in Qingyuan hospitals,Piperacillin/Tazobactam,Ceftazidime,Piperacillin and Aztreonam were strong inducer,Ciprofloxacin,Amikacin or other anti-enzyme antibiotics can be chosed for bacteria which produce enzymes.

    ［Key words］  pseudomonas aeruginosa；inducible β-lactamase；antibiotics;drug resistance

    銅綠假單胞菌是醫院感染的主要致病菌，已居重癥監護病房革蘭陰性桿菌感染首位［1］，與其特殊的耐藥機制有關(guān)。銅綠假單胞菌對多種抗生素耐

    藥，主要與其外膜通透性下降和產(chǎn)生Ⅰ型誘導型頭孢菌素酶（即AmpC酶）對β內酰胺酶類(lèi)抗生素廣泛耐藥，并且不為酶抑制劑克拉維酸所分解，但各地報道的產(chǎn)酶率不盡相同。為了解佛山地區銅綠假單胞菌臨床分離株產(chǎn)誘導型β內酰胺酶的情況及其耐藥性，我們采用美國DADE產(chǎn)Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析儀檢測了128株臨床分離的銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶情況，并對其耐藥性進(jìn)行分析，現報告如下。

    1  材料與方法

    1.1  菌株來(lái)源  2006年4月～2008年6月我院所在地佛山市范圍，門(mén)診和住院患者標本中分離的銅綠假單胞菌128株，其中痰液中87株，尿液中19株，傷口分泌物8株，咽拭子8株，穿刺液5株，血液1株。

    1.2  儀器和試劑  美國DADE產(chǎn)Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析儀及其N(xiāo)C21鑒定板（B1017－135），NC21鑒定板上含有20種抗生素的不同MIC濃度。

    1.3  藥敏試驗  參照Auto Scan-4型微生物分析儀按操作說(shuō)明進(jìn)行，儀器自動(dòng)分析報出20種抗生素MIC濃度，藥敏結果判定符合NCCLS 1999年標準。以敏感（S）、中介（I）、耐藥(R)報告結果。

    1.4  誘導型β內酰胺酶檢測  符合NCCLS標準的Ver Sion 22分析軟件的專(zhuān)家系統對待測菌株自動(dòng)檢測誘導型β內酰胺酶結果［2］。

    2.1  128株銅綠假單胞菌對20種抗生素的藥敏情況  見(jiàn)表1。表1  128株銅綠假單胞菌對20種抗生素的藥敏情況

    2.2  銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶檢出及耐藥情況  128株銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶者115株，占89.9％，不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶者13株，占10.2％；產(chǎn)誘導型β內酰胺酶者有16株來(lái)自重型監護病房（14.3％），不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶者有5株來(lái)自重型監護病房（38.5％），兩者差異顯著(zhù)（χ2=5.13,P<0.05）。銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株對哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、頭孢吡肟、頭孢他啶、環(huán)丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性顯著(zhù)高于不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株（表2）。表2  銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株與不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶的耐藥情況比較注：χ2值和P值是S的比較結果

    2.3  115株產(chǎn)誘導型β內酰胺酶銅綠假單胞菌中抗生素誘導產(chǎn)誘導型β內酰胺酶出現率  見(jiàn)表3。表3  抗生素誘導銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶

    3  討論

    AmpC酶屬于Ⅰ類(lèi)β內酰胺酶，其合成往往與β內酰胺酶類(lèi)抗生素存在有關(guān)，銅綠假單胞菌在正常情況下，只產(chǎn)生少量AmpC酶，而當有誘導作用的β內酰胺酶類(lèi)抗生素存在的條件下，AmpC酶的產(chǎn)量可以明顯增加100～1000倍之間，故又叫做誘導酶。各地報道銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導酶檢測率并不一致，石家莊侯天文等報道為57.5％［3］，上海蔣燕群等報道為92.9％［4］，與本文報道相近。哌拉西林/三唑巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、安曲南是誘導銅綠假單胞菌產(chǎn)酶的強誘導劑，臨床在聯(lián)合用藥時(shí)應避免與上述抗生素聯(lián)合。

    從本組結果來(lái)看銅綠假單胞菌對頭孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦、環(huán)丙沙星、阿米卡星、頭孢吡肟、亞胺培南的敏感性高達57.0％～80.0％之間。妥布霉素、哌拉西林、慶大霉素次之，而其他頭孢菌素敏感性低下。銅綠假單胞菌產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株對哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、頭孢吡肟、頭孢他啶、環(huán)丙沙星、妥布霉素等敏感性顯著(zhù)高于不產(chǎn)誘導型β內酰胺酶株，而氨芐西林/舒巴坦、復方新諾明的敏感性則相反，與有關(guān)報道有所不同［2］，其原因可能是不產(chǎn)酶株多來(lái)自重癥監護病房，與抗生素的過(guò)度使用有關(guān)。頭孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦敏感性高，同時(shí)又是強誘導劑。產(chǎn)誘導型β內酰胺酶的耐藥特點(diǎn)是對酶抑制劑不敏感，對β內酰胺酶類(lèi)抗生素耐藥或潛在性耐藥，頭孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦誘導產(chǎn)誘導型β內酰胺酶時(shí)，即使藥敏處于敏感時(shí)使用也要慎重。環(huán)丙沙星、阿米卡星可作為治療由銅綠假單胞菌引起感染的選擇性藥物，以氨基糖苷類(lèi)抗生素為主以提高對細菌外膜的通透性，聯(lián)合使用耐酶的抗生素，達到有效控制感染的目的。

無(wú)論是否產(chǎn)誘導型β內酰胺酶，銅綠假單胞菌對亞胺培南的敏感性都較以往報道偏低［1，3，4］，近年來(lái)銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率有增加趨勢，1994年為6％，1996、1999年都均為20％［5］，過(guò)度應用亞胺培南藥物抗感染是醫院患者銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥的主要誘因，產(chǎn)生金屬β內酰胺酶是銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥的主要機制之一，金屬β內酰胺酶不僅對內酰胺酶抑制劑的敏感性差，而且能夠水解碳青酶烯類(lèi)在內的一大批內酰胺酶類(lèi)抗生素。銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥問(wèn)題值得引起重視。

 

作者：張耀輝《中華現代中醫學(xué)雜志》

  1 Dai LR,Xiang YH,Liu Y,et al.Resistance surveillance of gram-negative bacilli in intensive care units using etest.Chin J Med Lab Sci，1999，22（2）：77-79.

2 藍海麗，孫伯良.全自動(dòng)微生物鑒定分析儀檢測誘導型β內酰胺酶的臨床應用.中華醫院感染雜志，2002，12（2）：155-156.

3 侯天文，尹曉琳，許素菊，等.銅綠假單胞菌產(chǎn)生β內酰胺酶表型檢測及其藥敏分析.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2002，22（4）：426.

4 Jiang YQ,Wang JQ,Chen SH,et al.Detection of inducible β-lactamase of gram-negative bacteria by double disks test.Shanghai J of Med Lab Sci,1999,14(3):142-144.

5 Wang F,Zhu DM,Hu FP,et al.Surveillance of bacterial resistance in Shanghai .Natl Med J China,2001,81(1):17-19.