血液培養病原菌的分布及耐藥性

【摘要】 目的: 調查血液培養中病原菌的菌群分布及耐藥趨勢. 方法: 1995/2004血液培養標本用熒光全自動(dòng)血液培養儀（Bactec9120）進(jìn)行培養，陽(yáng)性標本用全自動(dòng)微生物鑒定儀（Vitek32）進(jìn)行鑒定，藥敏采用KB法. 結果: 在6207份血液培養標本中分離出病原菌662株，陽(yáng)性檢出率為10.7%. 病原菌以革蘭陽(yáng)性（G+）需氧球菌居首位（50.3%），革蘭陰性（G-）需氧桿菌次之（44.7%），真菌3.0%，厭氧菌1.1%. 血液培養中的G+球菌對萬(wàn)古霉素和亞胺培南較為敏感，G-桿菌對亞胺培南、舒普深、丁胺卡那較為敏感. 結論: 血液培養病原菌以G+球菌為主，G-桿菌次之；兒童血液培養病原菌以葡萄球菌屬為主；亞胺培南對G+球菌和G-桿菌均具有較高的敏感率.

　　【關(guān)鍵詞】 血液培養；病原菌；抗藥性，多藥；分離鑒定

　　0引言

　　血液培養陽(yáng)性是確診敗血癥的重要依據. 大部分患者血液中的細菌數量很低，特別是在感染早期或抗生素治療后，通常小于1×103 cfu/L，所以提高血液培養陽(yáng)性率，快速、準確地作出病原學(xué)診斷，一直是臨床微生物實(shí)驗室的重要課題. 為此我們回顧性分析了我院10年間血液培養結果,并對病原菌分布特點(diǎn)及藥物敏感進(jìn)行分析.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　1995/2004住院疑似敗血癥靜脈血6207份(13~15 mL),分別注入需氧和厭氧培養瓶中；兒童取靜脈血1~3 mL注入小兒培養瓶?jì)�，骨髓取適量注入小兒培養瓶?jì)? 輕搖振蕩混勻，立即轉送入熒光全自動(dòng)血液培養儀（Bacte 9120）內進(jìn)行培養. Bacte 9120由美國B(niǎo)D公司出品，并采用該公司配套熒光血液培養瓶，分厭氧、需氧、小兒培養瓶3種. 全自動(dòng)微生物分析系統(Vitek32)系美國生物梅里埃Vitek公司生產(chǎn)，鑒定卡亦由該公司提供.

　　1.2方法

　　將送檢的血液培養瓶立即放入Bactec9120內培養，待其報警時(shí)取出轉種血平板、麥康凱平板、沙保弱平板. 如果厭氧培養瓶報警則取出轉種厭氧培養基，置厭氧環(huán)境培養，置35℃溫箱18~24 h后，觀(guān)察生長(cháng)情況. 根據菌落形態(tài)，革蘭染色結果，然后上全自動(dòng)微生物分析系統(Vitek32)進(jìn)行鑒定. 所用血液培養瓶及鑒定試卡均采取ATCC標準菌株，并進(jìn)行質(zhì)量控制. 藥物敏感性試驗采用ＫＢ紙片擴散法,藥敏紙片為北京天壇中國生物制品藥品檢定所和英國Oxoid公司的產(chǎn)品. 結果判定按1997年美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì )(ＮＣＣＬＳ)推薦的標準進(jìn)行. 用標準菌株金黃色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923,大腸埃希菌ＡＴＣＣ25922,銅綠假單胞菌ＡＴＣＣ27853定期做藥敏檢測,以確保藥敏結果的可靠性.

　　從6207份血液培養中分離出病原菌622株,陽(yáng)性檢出率為10.7%,其中革蘭陽(yáng)性菌（G+） 55.3%,革蘭陰性菌（G-） 44.7%,其中G+需氧球菌50.3%, G-需氧桿菌44.1%,真菌3.0%,厭氧菌1.1%(Tab 1). 主要病原菌的耐藥率見(jiàn)Tab 2.表1662株病原菌的分布（略）表2血液培養分離出的主要病原菌的耐藥率（略）

　　3討論

　　我們研究表明，前10位菌屬分別是葡萄球菌屬、埃希菌屬、鏈球菌屬、沙門(mén)菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬、不動(dòng)桿菌屬、假單胞菌屬、假絲酵母菌，它們占分離病原菌總數的88.7%. 前10位菌是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、傷寒沙門(mén)菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、陰溝腸桿菌、中間型葡萄球菌、糞腸球菌、醋酸鈣不動(dòng)桿菌，占分離病原菌總數的66.9%. 表明腸桿菌科細菌和葡萄球菌屬是引起敗血癥發(fā)生的主要病原菌，與國內外資料的報道相似［1］. 根據10 a間病原菌的分布，在疑為敗血癥無(wú)條件做血液培養時(shí)，首先考慮選用針對這10個(gè)菌屬或10種細菌的抗生素的應用以減少盲目性.

　　我們對6種主要的病原菌藥敏進(jìn)行統計分析，金黃色葡萄球菌β內酰酶(+)為85.7%，MRSA為52.1%，提示金黃色葡萄球菌耐藥性已相當嚴重. 對甲氧西林耐藥（MRS）的葡萄球菌耐藥嚴重，是由于細菌中產(chǎn)生的一種青霉素結合蛋白（PBP）發(fā)生突變，產(chǎn)生新的靶位蛋白（PBP2a），導致β內酰酶類(lèi)抗生素的親和力極度低下而產(chǎn)生耐藥性［2］. 大腸埃希菌耐藥性也相當嚴重. 總之，隨著(zhù)醫療技術(shù)的不斷進(jìn)步，各種診療手段不斷增加，這有利敗血癥的發(fā)生，在這種情況下，對于患有嚴重基礎疾病、長(cháng)期大量應用免疫抑制劑、免疫功能低下或不全、以及營(yíng)養不良的患者很容易交叉感染引起敗血癥，快速檢出病原菌，根據抗生素的敏感性，指導臨床合理使用抗生素，對于減輕患者的痛苦及經(jīng)濟負擔都具有重要的意義［3-5］.

 

　　 作者：魏軍，賈偉，周?chē)^燕 《第四軍醫大學(xué)學(xué)報》

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