淮北市2006年質(zhì)控菌株檢驗結果分析

【摘要】  目的：加強微生物實(shí)驗室的質(zhì)量控制工作，提高對腸道傳染病疫情檢測水平。方法：用細菌培養法對質(zhì)控菌株進(jìn)行增菌、分純，依據細菌生長(cháng)特性、革蘭染色形態(tài)、生化試驗和血清學(xué)試驗結果綜合判斷。結果：質(zhì)控菌株為傷寒沙門(mén)菌純菌種，質(zhì)控考核成績(jì)優(yōu)秀。結論：質(zhì)控菌株考核既重結果，也重過(guò)程，能及時(shí)發(fā)現平時(shí)工作中存在的問(wèn)題。建議多加強對基層微生物實(shí)驗室的質(zhì)控考核工作，促進(jìn)疾病控制機構衛生檢測水平的不斷提高。

【關(guān)鍵詞】  質(zhì)控；分析；細菌培養

 

　　Analysis of testing quality�瞔ontrolling Strains of huaibei city in 2006

　　Abstract:Objective To improve the quality control work in microorganism laboratories and the level of detecting enteric infectious diseases.Methods Bacterium culture method was applied to enrich and isolate the quality�瞔ontrol strains；comprehensive judgment was made according to the growth character、shape of Cram strain、the results of biochemistry experiments and serologic tests.Results The quality�瞔ontrol strain was proved to be pure agarics of salmonella typhi；the result was excellent.Conclusion The quality�瞔ontrol super�瞯ision work is suggested to be given great emphasis in order to improve the hygienic detection work of the disease control institutions.

　　Key words:Quality�瞔ontrol strains；Analysis；Bacterium culture

　　我中心近幾年均參加安徽省疾病控制系統實(shí)驗室間比對和能力驗證試驗，接受質(zhì)控菌株的分離鑒定工作，不斷提高細菌檢驗水平�，F將2006年11月的微生物實(shí)驗室間比對考核情況及結果報告如下。

　　1  材料與方法

　　1.1  質(zhì)控樣品  安徽省CDC下發(fā)的半固體質(zhì)控菌株1份，既可能是混合菌種，也可能是純菌種。該樣品是腸道致病菌培養物，屬需氧或兼性厭氧菌。

　　1.2  檢測依據  微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗。

　　1.3  材料  本次質(zhì)控所用培養基、試劑購于北京陸橋醫學(xué)生物技術(shù)中心、杭州微生物試劑有限公司。診斷血清：沙門(mén)菌屬診斷血清由成都生物制品研究所生產(chǎn)，有效期內使用。

　　1.4  檢驗步驟

　　1.4.1  增菌  無(wú)菌操作開(kāi)啟半固體菌種管，取半固體培養物置10 ml營(yíng)養肉湯管混合均勻，37 ℃培養18 h。

　　1.4.2  菌種分純及鑒定  取肉湯增菌液各一環(huán)，分別接種分離于SS、麥康凱瓊脂平板、山梨醇麥康凱瓊脂平板、血平板、營(yíng)養瓊脂平板、四號瓊脂平板，37 ℃ 24 h培養，觀(guān)察菌落特征，挑取各種不同可疑菌落接種于三糖鐵上做初步生化反應，同時(shí)取菌苔涂片做革蘭染色鏡檢，取營(yíng)養瓊脂平板上菌落做氧化酶實(shí)驗，綜合分析生長(cháng)特性及生化特點(diǎn)，對疑似菌做血清學(xué)凝集試驗及生化鑒定試驗。

2  檢驗結果

　　肉湯增菌液呈均勻渾濁，分離接種培養后，在SS平板上生長(cháng)出中等大小、光滑濕潤、無(wú)色半透明菌落，在麥康凱平板上生長(cháng)出中等大小、光滑濕潤、無(wú)色半透明菌落，在山梨醇麥康凱瓊脂平板上生長(cháng)出中等大小、粉紅色菌落，在血平板上生長(cháng)出中等大小、灰白色、邊緣整齊、不溶血菌落，在營(yíng)養平板上生長(cháng)出中等大小、圓形、光滑濕潤菌落，在四號瓊脂平板上不生長(cháng)。涂片染色：此菌為革蘭陰性小桿菌。氧化酶實(shí)驗：陰性。三糖鐵結果為：斜面-、底層+、產(chǎn)氣+、硫化氫+。腸桿菌科生化編碼結果，見(jiàn)表1。

　　表1  腸桿菌科生化編碼結果（略）

　　注：鑒定編碼62054；查檢索表得兩種可能結果為：①傷寒沙門(mén)氏菌，概率88.90%；②沙門(mén)氏菌屬某些種，概率9.80%。   

　　沙門(mén)菌血清凝集試驗結果如下：A�睩多價(jià)血清-；vi因子血清++++；Hd因子血清+；生理鹽水對照-。用滅菌生理鹽水將普通瓊脂斜面上菌苔洗下，制成濃厚菌液，加熱100 ℃ 40 min，用處理過(guò)的濃厚菌液與沙門(mén)氏A�睩多價(jià)凝集，結果：A�睩多價(jià)血清++++；生理鹽水對照-；O9因子血清+++。依據細菌在各培養基上生長(cháng)特性、革蘭染色形態(tài)、生化和血清試驗結果，綜合判斷為傷寒沙門(mén)菌(O9Hd)。上報安徽省疾控中心，結果完全正確。

　　3  討論與小結

　　由基本生化特性可知，本菌株為發(fā)酵型糖代謝，有動(dòng)力，氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌，符合腸桿菌科或弧菌科。根據四號瓊脂平板上不生長(cháng)，SS瓊脂平板上生長(cháng)良好，可排除弧菌科，定為腸桿菌科。在做沙門(mén)菌血清凝集時(shí)，最好用兩個(gè)不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的血清或用不同批號的血清進(jìn)行核對，以防錯漏。在做沙門(mén)菌血清凝集時(shí)，應注意挑取瓊脂干燥處培養物與多價(jià)及O因子血清進(jìn)行凝集試驗，其效果較好，而瓊脂濕潤處培養物與O多價(jià)及O因子血清凝集不明顯，原因是瓊脂干燥處培養物O抗原發(fā)育較好［1］。試驗時(shí)應注意：與多價(jià)抗血清不凝集時(shí)，可在玻璃試管內用生理鹽水將細菌制成濃菌液，放入沸水中15 min～30 min，冷卻后再次做凝集試驗。因vi抗原能阻斷O凝集反應，而煮沸處理能破壞菌體表面的vi抗原［2］。 這次的傷寒沙門(mén)菌，我們經(jīng)加熱100 ℃ 40 min破壞Vi抗原才得到A�睩多價(jià)血清明顯凝集。對A�睩多價(jià)血清不凝集的菌株，容易漏檢，經(jīng)過(guò)詳細的生化鑒定及用加熱法破壞Vi抗原，再進(jìn)行血清試驗才可檢出傷寒沙門(mén)菌，所以詳細的生化鑒定是必要的。根據細菌在選擇性平板上的菌落特點(diǎn)與各種菌落生化特性、血清學(xué)試驗結果的一致性，可判斷此質(zhì)控菌株為純菌種�？傊�，平時(shí)做好細菌檢驗室內質(zhì)量控制，對所用培養基、生化試劑、診斷血清等進(jìn)行質(zhì)量驗收，是做好室間質(zhì)控的重要基礎。經(jīng)常參加室間質(zhì)量控制考核，有利于督促和提高檢驗人員的業(yè)務(wù)水平和檢測水平，增加檢驗結果的正確性和可靠性。

 

 作者：趙冬云《實(shí)用醫技雜志》

  �。�1］ 王秀茹.預防醫學(xué)微生物學(xué)及檢驗技術(shù)［M］.北京：人民衛生出版社，2002：315.

［2］ 余樹(shù)榮.微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗［M］.北京：人民衛生出版社，1997：181.