大腸埃希菌ESBLs的狀況及藥敏分析

【摘要】  目的：了解大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs的狀況及對常用抗生素的藥敏情況。方法：用紙片法檢測ESBLs。藥敏試驗采用K�睟瓊脂擴散法。結果：從本次試驗中的400株大腸埃希菌中，ESBLs檢出率為61.50%（246/400），其中2005年組ESBLs檢出率為52.94%（90/170），低于2006年組的67.83%（156/230），而在藥敏試驗方面僅2.5%（10/400）對任何抗生素沒(méi)產(chǎn)生耐藥，耐兩種或兩種以上抗生素的占95.00%（380/400）。結論：臨床要有計劃地使用各種抗生素類(lèi)藥物，防止更多的ESBLs陽(yáng)性菌株的形成。

【關(guān)鍵詞】  大腸埃希菌；超廣譜β�矁弱０访�；藥敏分析

   大腸埃希菌是醫院臨床標本中分離的常見(jiàn)細菌［1］，由于現時(shí)各種抗生素的廣泛應用，甚至是濫用，使大腸埃希菌對各種抗生素的敏感率不斷下降，據相關(guān)文獻報道［2］，大腸埃希菌對頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢曲松等應用廣泛的抗生素敏感率分別為86.5%、45.8%、40.3%，并且有逐年下降的趨勢。另?yè)�其他文獻報道［1］，大腸埃希菌對哌拉西林和頭孢哌酮的耐藥率為40.4%和23.0%，而對哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率均為0，顯而這些耐藥的產(chǎn)生，與大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs不無(wú)關(guān)系。為此，我們對本院臨床不同時(shí)間分離到的400株大腸桿菌進(jìn)行ESBLs檢測，并了解該菌對各種抗生素的耐藥性，以及對各種抗生素耐藥性的變遷，以指導臨床對抗感染用藥。

　　1  材料與方法

　　1.1  菌株來(lái)源 

　　試驗菌株分別為2005年1月至2005年12月（下文簡(jiǎn)稱(chēng)為“2005年組”）和2006年1月至2006年12月（下文簡(jiǎn)稱(chēng)為“2006年組”）我院住院及門(mén)診患者非大便標本分離的大腸埃希菌400株。

　　1.2  菌株鑒定 

　　按《全國臨床檢驗操作規程》進(jìn)行，分離培養得到的菌株用美國DADE公司生產(chǎn)的Micro�瞁alkAway-40全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行鑒定。

　　1.3  質(zhì)控菌株 

　　分別以大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603作為ESBLs試驗陰性和陽(yáng)性的菌株。

　　1.4  藥敏試驗 

　　采用K�睟 法,M�睭 瓊脂培養基。藥敏紙片：阿米卡星、氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、氨曲南、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻吩、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢唑啉、環(huán)丙沙星、亞胺培南、哌拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉維酸、復方新諾明，以上藥物均為英國OXOID公司生產(chǎn)，經(jīng)室內質(zhì)控符合要求，并在有效期內使用。所有的判定結果按CLSI／NCCLS(臨床實(shí)驗室標準研究所Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)2005版的規定［3］。

1.5  ESBL檢測方法 

　　藥敏紙片初篩和確證試驗按CLSI／NCCLS推薦進(jìn)行測定，CAZ ≤22 mm ,CTX ≤27 mm ,AZT ≤27 mm ,CFP ≤24 mm ,其中1 種藥敏結果符合此值時(shí),該菌需做確證試驗。含克拉維酸與不含克拉維酸抗生素紙片間抑菌區直徑≥5 mm 可判為ESBLs陽(yáng)性,質(zhì)控菌抑菌區直徑增大≤2 mm。

　　2  結果

    從本次試驗中的400株大腸埃希菌中，ESBLs檢出率為61.50%（246/400），其中2005年組ESBLs檢出率為52.94%（90/170），低于2006年組的67.83%（156/230），而在藥敏試驗方面僅2.5%（10/400）對任何抗生素沒(méi)產(chǎn)生耐藥，而耐兩種或兩種以上抗生素的占95.00%（380/400），具體見(jiàn)表1。表1  400株大腸埃希菌對17種常用的抗生素的耐藥率比較(略)

　　3  討論

    超廣譜β�矁弱０访甘且活�(lèi)能水解青霉素、頭孢菌素類(lèi)及單環(huán)β2內酰胺類(lèi)抗生素、能被β�矁弱０访敢种苿┮种频摩陋矁弱０访�。ESBLs細菌的β�矁弱０访富�因位于質(zhì)粒上,通過(guò)轉化、轉導、轉座、接合轉移和整合方式,將耐藥性在不同細菌中傳播,容易造成耐藥細菌的流行 。ESBLs 主要存在于KPN和ECO 中。ESBLs是一種由質(zhì)粒介導的，能夠令細菌對多種β�矁弱０奉�(lèi)藥物產(chǎn)生耐藥，能被β�矁弱０访敢种苿�（如克拉維酸等）抑制的一種絲氨酸蛋白酶。目前隨著(zhù)β�矁弱０奉�(lèi)抗生素的廣泛應用，對各種細菌均形成一個(gè)高的β�矁弱０奉�(lèi)藥物的抗生素壓力，使大量的耐藥基因定位到質(zhì)粒上，并令耐藥菌株被選擇出來(lái)，使大多數細菌通過(guò)耐藥質(zhì)粒而獲得對β�矁弱０奉�(lèi)藥物耐藥性，對臨床控制感染應用β�矁弱０奉�(lèi)藥物造成一定的威脅。

    本文顯示ESBLs檢出率為61.50%（246/400），ESBLs（+）的大腸埃希菌僅對亞胺培南沒(méi)有產(chǎn)生任何耐藥外，只有阿米卡星、頭孢西丁的耐藥率比較低，分別為1.2%和4.47%，對其他抗生素的抗生素的耐藥率均超過(guò)50%。而ESBLs(-)的大腸埃希菌除對亞胺培南沒(méi)有產(chǎn)生任何耐藥外，頭孢他啶也沒(méi)有產(chǎn)生任何耐藥，此外對氨芐西林/舒巴坦、阿米卡星、氨曲南、頭孢曲松、頭孢噻吩、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢唑啉、頭孢呋肟產(chǎn)生耐藥都均在20%以下。根據CLSI／NCCLS規定,對ESBLs 菌株,應報告對所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南耐藥。

    從本文顯示，本院2005年組ESBLs(+)和2006年組ESBLs(+)及2006年組ESBLs(-)和2006年組ESBLs(-)對比中除氨芐西林/舒巴坦和復方新諾明外，其他各種抗生素的耐藥率不斷程度的上升，其中ESBLs（+）組以慶大霉素耐藥率上升較為明顯，由2005年的12.82%上升到2006年的53.33%，而ESBLs(-)組則以頭孢噻吩耐藥率上升較為明顯，由2005年的6.76%上升到2006年的26.67%。

    本文顯示，本院ESBLs(+)和同期ESBLs(-)對比中，ESBLs(+)對除亞胺培南外的各種抗生素耐藥率均遠遠高于同期的ESBLs(-)的大腸埃希菌。

從本次試驗結果來(lái)看,由于大腸埃希菌ESBLs(+)率不斷升高,故此,對于懷疑為由大腸埃希菌感染造成的危重患者應建議臨床醫生使用含β�矁弱０访敢种苿┑目股�素或使用亞胺培南。另外,由于細菌產(chǎn)生耐藥,與大量在各行業(yè)使用抗生素有密切的關(guān)系,故此,及早了解各患者分離株的藥敏試驗結果,建議臨床有效并合理用藥,這將更有利于臨床對單—患者的感染治療,也將更有利于控制細菌對各種抗生素的耐藥率上升,也對防止細菌產(chǎn)生新的耐藥性有重要意義。

 

作者：陳月燕，席云，曲彩紅，譚泳泉  《實(shí)用醫技雜志》

【參考文獻】

［1］李家泰，李耘，齊慧敏.2002年至2003年中國革蘭陰性細菌耐藥性檢測研究［J］.中華檢驗醫學(xué)雜志，2005，28（1）：19��29.

［2］王輝，陳民鈞，倪語(yǔ)星，等.2003年至2004年中國十家教學(xué)醫院革蘭陰性桿菌的耐藥分析［J］.中華醫學(xué)檢驗雜志，2005，28（12）.　　

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, Fifteenth informational supplement. CLSI/NCCLS document M100�睸15［S］.Clinical and Laboratory Standards Institute Wayne Pennsylvania,2005,25(1):1��167.