馬齒莧提取液體外抑菌作用的實(shí)驗研究

【摘要】  目的觀(guān)察馬齒莧提取液體外抗菌實(shí)驗效果。方法用臨床分離的志賀菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、腸球菌為受試菌。采用幾何級稀釋法測定馬齒莧提取液的體外最低抑菌濃度（MIC）。結果馬齒莧對志賀菌、大腸埃希菌抑菌效果較強，MIC范圍分別為7.81～0.97 g·L-1和31.25～1.95 g·L-1，MIC50和MIC90分別為3.90，7.81 g·L-1和7.81,31.25 g·L-1；對金黃色葡萄球菌和腸球菌抑菌效果較弱，MIC范圍均在125.00～3.90 g·L-1之間，MIC50和MIC90均為31.25和62.50 g·L-1。結論 馬齒莧對志賀菌和大腸埃希菌具有較強的抑菌效果。

【關(guān)鍵詞】  馬齒莧黃酮類(lèi)物質(zhì) 抑菌作用 病原菌

　　馬齒莧Portulace oleracea L.是馬齒莧科植物，別名：瓜子菜、長(cháng)命菜、爬地莧、馬齒菜等，是全年生草本植物，我國大部分地區有分布，都是可食用的野菜�！侗静菥V目》中早就有這方面的記載，李時(shí)珍曰：“馬齒莧處處有之，田野有生……人多采苗煮曬為蔬”。馬齒莧可治療泄瀉等病證。本實(shí)驗研究馬齒莧提取液的抗菌作用，旨在為臨床應用提供理論依據。

　　1  材料與方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  供試菌種與培養基實(shí)驗選用G+菌：金黃色葡萄球菌和腸球菌，G-菌：志賀菌和大腸埃希菌，各20株。菌株均來(lái)源于臨床病人體內分離所獲得。培養基均采用普通營(yíng)養瓊脂。普通營(yíng)養瓊脂培養基、營(yíng)養肉湯均購自杭州微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

　　1.1.2  馬齒莧提取液的制備馬齒莧購于臨海市醫藥公司。準確稱(chēng)取烘干馬齒莧100 g，粉碎后用沸水、70%乙醇和60%丙酮提取，反復多次進(jìn)行直至浸出液顏色變淡為止。接著(zhù)將浸出液除去乙醇和丙酮并濃縮至80 ml，用NaOH調節pH至7.0～7.2，使沉淀物完全溶解，離心（4 000 r/min）15～20 min，取上清液，并定容至100 ml，即每毫升提取液為1 g馬齒莧粉末的提取液。

　　1.2  方法

　　1.2.1  菌液制備將冰箱保存的供試菌種接種于營(yíng)養肉湯培養基中，經(jīng)37℃培養18～24 h，然后用預溫無(wú)菌的營(yíng)養肉湯培養基制成濃度為109/ml。

　　1.2.2  馬齒莧的最低抑菌濃度（MIC）測定參照周氏［1］法，采用幾何級稀釋法。操作在凈化工作臺內進(jìn)行。先取加塞無(wú)菌小試管12支，在第2、3管分別加入備用馬齒莧提取液0.5 ml；在第3～11管分別加入營(yíng)養肉湯0.5 ml；用微量加樣器從第3管開(kāi)始倍比稀釋備用馬齒莧提取液至第11管；第1管加營(yíng)養肉湯1.5 ml，第2～11管各加1.0 ml，第12管加2.0 ml；第1～11管各加相應待測菌液0.5 ml；第1管為陽(yáng)性對照管，第12管為陰性對照管。藥液濃度從第2管開(kāi)始依次為250.0，125.00，62.50，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.97，0.48 g/L，共10個(gè)稀釋度，充分混勻，放置37℃培養18～24 h。由于中藥液本身的渾濁，細菌生長(cháng)后使得肉眼無(wú)法觀(guān)察結果，分別從每一管中取兩接種環(huán)接種在營(yíng)養瓊脂平板上，37℃培養18～24 h，觀(guān)察細菌生長(cháng)情況，記錄馬齒莧對細菌的MIC，并計算MIC50及MIC90的藥物濃度［2］。

　　1.2.3  結果判斷目前國內外尚無(wú)統一中草藥對細菌的MIC標準，筆者參照同類(lèi)實(shí)驗［3］的標準作為判斷標準，即MIC＜7.81 g/L生藥濃度時(shí)為較高敏感，當MIC在7.81～250.00 g/L時(shí)為中度敏感，當MIC＞250.00 g/L生藥濃度時(shí)為不敏感。

2  結果

　　2.1  抑菌活性馬齒莧對供試菌體外作用有一定的差異。其對志賀菌、大腸埃希菌的抑菌效果較強，對金黃色葡萄球菌、腸球菌的抑菌效果較弱。結果見(jiàn)表1。

　　表1  馬齒莧對4種病原菌的抑菌效果（略）

　　2.2  最低抑菌濃度（MIC）的測定根據抑菌活性實(shí)驗結果，4種病原菌對馬齒莧的MIC結果見(jiàn)表2。

　　表2  4種病原菌對馬齒莧的MIC值（略）

3  討論

   

　　馬齒莧資源豐富，是藥用食用俱佳的野生植物。它既含有多種營(yíng)養成分，又含有較高的黃酮類(lèi)化合物［4］。黃酮類(lèi)化合物是藥用植物的一大類(lèi)有效成分，具有多種生物活性，其主要作用之一是抑菌或殺菌，低濃度時(shí)能抑菌，高濃度時(shí)能殺菌，馬齒莧成分中還含有左旋去甲腎上腺素，多巴明及少量多巴，以及維生素A樣物質(zhì)、維生素B1、維生素B2、PP、維生素C、皂苷、鞣質(zhì)、胡蘿卜素、樹(shù)脂、脂肪、氨基酸、多種有機物，全草并顯生物堿、香豆精、蒽醌類(lèi)化合物［5］，這些生物活性成分對提高人體免疫力，防治心臟病、高血壓病、糖尿病、癌癥等疾病具有特殊醫療保健作用。本實(shí)驗結果表明：馬齒莧對選用的G�簿�（志賀菌、大腸埃希菌）具有較強的抑菌作用，而對G+菌（金黃色葡萄球菌、腸球菌）作用效果明顯減弱，其機制有待進(jìn)一步深入研究。

 

作者：陳萬(wàn)平《時(shí)珍國醫國藥》

【參考文獻】

  　�。�1］ 周邦清.常用中藥的抗菌作用及其測定方法［M］.重慶：科技文獻出版社重慶分社，1987：46.

　�。�2］ 徐叔云，卞如濂，陳修，等.藥理學(xué)實(shí)驗方法學(xué)［M］.北京：人民衛生出版社，2003：1665.

　�。�3］ 劉忠儀，張國威，何云志.解脲支原體中藥藥敏試驗［J］.中華皮膚科雜志，1996，29（5）：349.

　�。�4］ 朱 丹，牛廣財，孫希云，等.馬齒莧黃酮類(lèi)物質(zhì)抑菌作用的研究［J］.安徽農業(yè)科學(xué)，2006，34（1）：7.

［5］ 福建省中醫研究所.福建藥物志，第1冊［M］.福州：福建科技出版社，1982：474.