甘肅金銀花中綠原酸含量與抑菌作用的實(shí)驗考察

摘要：目的：考察甘肅金銀花的品質(zhì)。方法：采用高效液相色譜法，測定綠原酸含量；以試管稀釋法，考察其體外抑菌作用。結果：通過(guò)實(shí)驗比較，甘肅金銀花與流通的正品金銀花中的綠原酸含量基本一致，其葉中綠原酸的含量也較高；甘肅金銀花有顯著(zhù)的的體外抑菌作用。結論：甘肅金銀花綠原酸含量較高，抑菌作用強，有良好開(kāi)發(fā)前景。

　　關(guān)鍵詞：甘肅金銀花；  綠原酸；  體外抑菌

　　Research on the Content of Chlorogenic Acid and Antimicrobial Effect of Flos Lonicerae harmsis

　　Abstract:Objective:To investigate on the quality of Flos Lonicerae harmsis.Methods:To determine the content of chlorogenic acid by HPLC and observere the antimicrobial effect of Flos Lonicerae harmsis by the method of tube-dilute.Results:The contents of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis and Flos Lonicerae are similar; Flos Lonicerae harmsis has remarkable antimicrobial effect and is stranger than the Flos Lonicerae's.Conclusion:The content of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis is higher and it has remarkable antimicrobial effect.It has a good prospect for making use of  local resources.

　　Key words:Flos Lonicerae harmsis；  Chlorogenic acid；  In-vitro antimicrobial effect

   

　　金銀花原名忍冬，為常用中藥。具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效，主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱等癥。應用歷史悠久。金銀花植物來(lái)源復雜，商品藥材品種多，《中國藥典》2000年版Ⅰ部收載中藥材金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera.japonica Thunb.、紅腺忍冬L.hypoglauca Miq、山銀花L.confusa DC或毛花柱忍冬L. dasystyla Rehd  4種為法定藥用金銀花正品，而實(shí)際使用遠不止于此。甘肅金銀花，又稱(chēng)盤(pán)葉忍冬，為忍冬科植物葉藏花L. harmsii Gracbnl的干燥花蕾，主要分布在甘肅、四川，收載于《甘肅省中藥質(zhì)量標準（試行）》（1991），是甘肅地方習用品，并且為國家考察品種。但有關(guān)甘肅金銀花的研究，近年來(lái)未見(jiàn)相關(guān)報道。本文參考相關(guān)文獻，采用高效液相色譜法測定了綠原酸的含量并結合體外抑菌實(shí)驗，對甘肅金銀花與正品金銀花進(jìn)行了比較考察，以期對甘肅金銀花開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據。

　　1  實(shí)驗儀器和材料

　　1.1  藥材甘肅金銀花，采自甘肅榆中；正品金銀花（為忍冬科植物忍冬 L. japonica Thunb. 的干燥花蕾），安徽亳州，國家抽樣品種，經(jīng)我所中藥室鑒定，均為當年鮮品。

　　1.2  儀器Waers515泵，2478檢測器，7725進(jìn)樣閥，Empower色譜工作站。Hypersile ODS2C18色譜柱（4.6 mm×150 mm），大連依利特公司出品。

　　1.3  菌種大腸桿菌、傷寒桿菌、金黃色葡萄球菌均購自中國藥品生物制品檢定所；乙型鏈球菌由甘肅省人民醫院臨床檢驗中心提供。

　　2  實(shí)驗方法和結果

　　2.1  綠原酸的測定按《中國藥典》金銀花項下方法［1］測定，以外標法計算含量，綠原酸峰理論塔板數不低于6 000。結果見(jiàn)表1。

　　表1  樣品綠原酸含量（略）

　　

　　《中國藥典》以綠原酸的含量作為質(zhì)量評價(jià)指標，結果表明甘肅金銀花與流通的正品金銀花中的綠原酸含量基本一致，且其葉中綠原酸的含量也較高。因此，甘肅金銀花是符合藥用要求的。

2.2  體外抑菌作用

　　2.2.1  藥液的制備取試驗藥材10 g，加水200 ml，文火煎煮2次，30 min/次，過(guò)濾，合并濾液，水浴上濃縮，制成1 g/ml的藥液，流通蒸汽滅菌30 min，備用。

　　2.2.2  菌液的制備取新鮮培養的菌苔一接種環(huán)，接種于營(yíng)養肉湯中（乙鏈培養液中需加入0.5 ml白蛋白），35℃培養18 h后，制成105的菌液，備用。

　　2.2.3  抑菌實(shí)驗按試管倍比稀釋法［2］倍比稀釋成系列濃度，每個(gè)小試管中加入1.0 ml藥液，然后加入菌液0.1 ml(乙鏈培養液中需加入0.1 ml白蛋白)，35℃培養24 h，觀(guān)察記錄。重復實(shí)驗兩次，結果見(jiàn)表2。

　　表2  樣品抑菌實(shí)驗結果（略）

　　結果表明，甘肅金銀花有顯著(zhù)的的體外抑菌作用，對革蘭氏陽(yáng)性菌的作用強于革蘭氏陰性菌，對金黃色葡萄球菌、乙型鏈球菌的最低抑菌濃度為0.062 5 g/ml；對大腸桿菌、傷寒桿菌的最低抑菌濃度分別為0.5 g/ml和0.25 g/ml。且均強于對照藥材。

　　3  討論

　　3.1  金銀花中主要含揮發(fā)油，黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)及有機酸等化學(xué)成分。一般認為，金銀花的抗菌有效成分為綠原酸類(lèi)化合物，綠原酸雖具有廣譜的抗細菌、抗病毒作用，但其并非是金銀花中唯一的抑菌成分，且因綠原酸于體內能被蛋白質(zhì)滅活，其抗菌作用并不甚強［3］。實(shí)驗結果表明，甘肅金銀花和正品金銀花的綠原酸的含量基本一致，而抑菌作用差別明顯。因此，本實(shí)驗從一方面證明了綠原酸并非是金銀花中唯一的抑菌成分，提示其抑菌作用還有其他成分的參與，其抗菌作用的真正情況、有效成分和作用機理還有待進(jìn)一步地深入研究。同時(shí)也說(shuō)明僅以一種成分作為質(zhì)量評價(jià)指標，不能完全衡量金銀花的質(zhì)量。

3.2  《中國藥典》2000年版Ⅰ部收載中藥材金銀花為忍冬科植物忍冬L. japonica Thunb.、紅腺忍冬L. hypoglauca Miq、山銀花 L. confusa DC或毛花柱忍冬 L. dasystyla Rehd  4種為法定藥用金銀花正品，并以綠原酸的含量作為質(zhì)量評價(jià)衡量指標，而盤(pán)葉忍冬為國內可供藥用47種忍冬屬植物之一［3］。本實(shí)驗，甘肅金銀花花蕾和葉片中綠原酸的含量較高，與正品金銀花的含量相當，完全符合藥典對金銀花的要求（《中國藥典》規定綠原酸含量不低于1.5％）， 且抑菌作用明顯強于對照樣品，因此，對甘肅金銀花進(jìn)行全面研究，綜合評價(jià)，對充分利用開(kāi)發(fā)金銀花資源有重要意義。

 

作者：郭朝暉， 周學(xué)清， 蔣生祥  《時(shí)珍國醫國藥》

　　參考文獻：

　�。�1］  國家藥典委員會(huì ).中國藥典，Ⅰ部［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：177177.

　�。�2］  李儀奎.中藥藥理實(shí)驗方法學(xué)［M］.上海:上�？茖W(xué)技術(shù)出版社,1991：286293.

［3］  石  鉞,石任兵,陸蘊如.我國藥用金銀花資源、化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展［J］.中國藥學(xué)雜志,1999,34(11):724727.