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【摘要】 目的研究夾竹桃葉提取液的抑菌作用。方法采用不同提取方法制備夾竹桃葉提取液，用二倍稀釋法確定最低抑菌濃度。結果夾竹桃葉不同提取液對6種供試菌種的生長(cháng)均有不同程度的抑制作用，其中醇提液的抑菌效果好于水提液和醚提液，且以70 %乙醇提取液的抑菌作用效果最佳。結論夾竹桃葉的醇提液具有很好的抑菌效果。
【關(guān)鍵詞】 夾竹桃； 葉提取物； 抑菌作用
Abstract：ObjectiveTo study the antibacterial activity of leaf crude extracts of Nerium indicum Mill. MethodsThe leaf crude extracts preparation were employed by water extraction, alcohol extraction, petroleum ether extraction, respectively. The minimal inhibitory concentration was determined by the double dilution method. ResultsThe leaf crude extracts had antibacterial activity to six bacteria (Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Sarcina lutea) in some extent. The leaf crude extracts lbtaineel by 70% alcohol had the best antibacterial activity in above extract methods. ConclusionThe leaf crude extracts obtained by alcohol have a good antibacterial activity.
Key words： Nerium indicum Mill.； Leaf crude extracts; Antibacterial activity
夾竹桃Nerium indicum Mill.屬于夾竹桃科，是一種四季常綠直立灌木，葉像竹葉，花似桃花，花色艷麗，開(kāi)花期長(cháng)，是深受人們喜愛(ài)的園林綠化和觀(guān)賞植物。原產(chǎn)于伊朗、印度、尼泊爾等地，現已廣泛種植于世界各地。在我國南方多在路旁、庭院、公園、河堤、湖畔等地栽培。夾竹桃的葉、莖皮和根含有多種強心苷，其中歐夾竹桃苷丙是主要的藥效成分。夾竹桃苷的作用類(lèi)似于地高辛和洋地黃，是一種強心劑，具有強心、利尿、祛痰、定喘、鎮痛、去瘀之功效，主要用于治療心臟病并心力衰竭、哮喘、癲癇等疾��；同時(shí)在體內、體外有抗癌功效，對人體癌細胞有顯著(zhù)殺傷作用［1］。
目前對夾竹桃的藥用研究主要集中在強心、利尿等方面，并已在臨床上用于治療心力衰竭［2］。隨著(zhù)經(jīng)濟發(fā)展和生活水平的提高，人們越來(lái)越重視環(huán)境污染及食品安全問(wèn)題，因而從各種植物中提取活性物質(zhì)來(lái)為人們所利用已受到廣泛關(guān)注。近年來(lái)報道夾竹桃在生物防治方面具有重要作用，不僅能夠有效防治松材線(xiàn)蟲(chóng)［3］、茭白（水稻）二化螟［4］，而且對釘螺也有很好的毒殺效果［5，6］。為了更進(jìn)一步地了解夾竹桃，以便更全面的綜合利用這種植物資源，本文對夾竹桃葉提取物的抑菌作用進(jìn)行了研究，比較了不同溶劑、不同濃度提取所得的提取物的抑菌效果，為開(kāi)發(fā)利用夾竹桃提供科學(xué)依據。
1 材料
1.1 實(shí)驗植株 夾竹桃Nerium indicum Mill.，為懷化學(xué)院校園內栽培植株。
1.2 供試菌種 大腸埃希氏菌(Escherichia coli)、普通變形桿菌(Proteus vulgaris)、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、糞腸球菌（Enterococcus faecalis）、八疊球菌（Sarcina lutea），均由懷化學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗室提供。
1.3 培養基 LB(Luria-Bertani)液體培養基和LB固體培養基。
2 方法
2.1 水提取液的制備 水提液采用煎煮法。取夾竹桃葉，于
2.2 醇提液和醚提液的制備取夾竹桃葉，分別溶于50%，70%，95%的乙醇和石油醚中，浸提2 h后，然后置于超聲波設備中超聲波提取45 min，于4 000 r/min離心10 min，取濾液濃縮至含生藥
2.3 菌液的制備 將所有供試菌活化兩代后，分別接入試管斜面培養基上，各菌株接多支斜面，在
2.4 抑菌實(shí)驗 在無(wú)菌條件下，將滅菌試管分成兩大組，每組42支。42支試管再分成6小組，每組7支。第1支試管中加入1 ml 2倍濃度的LB液體培養基，第2～5支試管中各加入1 ml LB液體培養基，向第1支試管中加入1 ml提取液后按2倍稀釋法，使各管藥液濃度分別為0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031
從以上培養物中分別取0.1 ml涂布于固體LB培養基平板上，于
2.5 最低抑菌濃度(MIC)的測定采用2倍稀釋法，將各提取液稀釋成不同濃度的系列，加入0.1 ml的10-4菌液，同時(shí)設置不加提取液的作為對照，于
3 結果
3.1 夾竹桃葉水提取液的抑菌效果夾竹桃葉水提液在
3.2 夾竹桃葉乙醇提取液的抑菌效果不同濃度的乙醇提取液均有一定的抑菌作用，但不同濃度的乙醇提取液抑菌效果不同，其中70％的乙醇提取液的抑菌效果要優(yōu)于50％乙醇提取液和95％乙醇提取液的抑菌效果。結果見(jiàn)表2～4。表2 夾竹桃葉的50%乙醇提取液對供試菌種的抑制作用表3 夾竹桃葉的70%乙醇提取液對供試菌種的抑制作用 表4 夾竹桃葉的95%乙醇提取液對供試菌種的抑制作用
3.3 夾竹桃葉醚提取液的抑菌效果夾竹桃葉醚提液在濃度為
3.4 最低抑菌濃度（MIC）的測定結果夾竹桃葉的70％乙醇提取液的抑菌作用最強，特別是對八疊球菌和金黃色葡萄球菌，其MIC均為
4 討論
夾竹桃的主要成分是強心苷，被廣泛用于治療心力衰竭［2］，此外，強心苷對各種植食性昆蟲(chóng)具毒殺作用［4］。據報道在孟加拉國，人們把夾竹桃葉作為抗菌消炎藥來(lái)使用［1］。本實(shí)驗的結果表明夾竹桃葉提取物對大腸埃希氏菌、普通變形桿菌、銅綠假單胞菌、糞腸球菌、八疊球菌、金黃色葡萄球菌都有不同程度的抑制作用，其中醇提取液的抑菌效果較好，水提取液較差，醚提取液最差。夾竹桃葉70%乙醇提取液對八疊球菌及金黃色葡萄球菌的抑菌效果最為明顯。通過(guò)本研究表明將夾竹桃葉作為抗菌消炎藥使用具有理論依據，但抑菌的主要活性成分尚需進(jìn)一步研究。
通過(guò)采用超聲波法提取有效成分，與常規方法相比，超聲波提取方法有操作簡(jiǎn)單、提取時(shí)間短、得率高、無(wú)需加熱等優(yōu)點(diǎn)，是提取中草藥化學(xué)成分的一種有效方法。
作者：李?lèi)?ài)民， 劉再明， 李勝華《湖南農業(yè)科學(xué)》
【參考文獻】
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［6］ 王 宏, 溫和秀, 王萬(wàn)賢, 等. 夾竹桃水提物滅螺活性研究［J］.咸寧醫學(xué)院學(xué)報, 2001, 15(2): 80.
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