中藥提取組合物(膠囊)對念珠菌及曲霉的體外抗菌實(shí)驗

【摘要】  目的探討中藥提取組合物(桂皮油、藿香油)膠囊對致病性念珠菌、曲霉的體外抗菌活性。方法應用試管藥基法，測定中藥提取組合物膠囊對念珠菌(白念、熱帶、克柔氏)曲霉(煙曲、黃曲)的最小抑菌濃度(MIC)。結果中藥提取組合物MIC范圍為白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、熱帶念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、煙曲霉(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黃曲霉(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml)。結論中藥提取組合物膠囊對致病性念珠菌(白念、熱帶、克柔氏)曲霉(煙曲、黃曲)體外均有很強的抗菌活性，為開(kāi)發(fā)中藥治療侵襲性真菌病提供理論依據。

【關(guān)鍵詞】  桂皮油; 藿香油; 念珠菌; 曲霉; 體外抗菌實(shí)驗

近年來(lái)，原發(fā)性或繼發(fā)性深部真菌感染發(fā)病率迅速上升，尤其是一些嚴重性消耗性疾病如惡性腫瘤、血液病、肺部感染、實(shí)體器官移植等是其死亡的主要因素之一。由于現今臨床使用的藥物多系化學(xué)合成如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬凈、兩性霉素等，雖然治療深部真菌感染發(fā)揮著(zhù)重要的作用，但長(cháng)期使用這類(lèi)藥物，副作用較大，價(jià)格昂貴，因此，尋找和開(kāi)發(fā)抗致病性深部真菌的中藥制劑，是祖國醫藥研究的方向。為此，對中藥提取組合物膠囊進(jìn)行體外抗真菌活性實(shí)驗，為治療深部真菌感染提供理論基礎。

　　1 材料

　　1.1 藥物來(lái)源香桂膠囊由河北醫科大學(xué)制藥廠(chǎng)研制，批號0801-03，其內含物由中藥提取物(桂皮油、藿香油)組成。氟康唑膠囊由德國輝瑞制藥有限公司提供，批號7073402。

　　1.2 菌種臨床分離株來(lái)自河北醫科大學(xué)第二醫院皮膚科真菌室，均為致病性深部真菌(痰標本直接鏡檢可見(jiàn)大量菌絲及芽生孢子，培養有念珠菌生長(cháng)，經(jīng)鑒定為白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌。菌絲呈45℃角分枝狀，培養鑒定為煙曲霉、黃曲霉)。標準菌株從中國醫學(xué)科學(xué)院微生物所購買(mǎi)。臨床株白念珠菌(30株)、熱帶念珠菌(20株)、克柔氏念珠菌(10株)。標準株白念珠菌(2株)、熱帶念珠菌(2株)、克柔氏念珠菌(2株)、煙曲霉(2株)、黃曲霉(2株)。

　　2 方法

　　2.1 藥基配制采用試管內藥基法，先將中藥組合物膠囊內含物用5倍生理鹽水在研缽內研20 min，再與高壓滅菌后的葡萄糖蛋白胨瓊脂基趁熱(液態(tài))充分混合，倍比稀釋成A(桂皮油2.06 mg/ml、藿香油1.03 mg/ml)、B(桂皮油1.03 mg/ml、藿香油0.55 mg/ml)、C(桂皮油0.515 mg/ml、藿香油0.257 mg/ml)、D(桂皮油0.257 mg/ml、藿香油0.129 mg/ml)、E(桂皮油0.129 mg/ml、藿香油0.064 mg/ml)、F(桂皮油0.064 mg/ml、藿香油0.032 mg/ml)、G(桂皮油0.032 mg/ml、藿香油0.016 mg/ml)。氟康唑同上配制成A(2.06 mg/ml)、B(1.03 mg/ml)、C(0.515 mg/ml)、D(0.257 mg/ml)、E(0.129 mg/ml)、F(0.064 mg/ml)、G(0.032 mg/ml)的濃度，分裝試管，置斜面。

　　2.2 菌種接種挑取適量菌株與生理鹽水混合，絲狀真菌置于研磨器中與生理鹽水混合研磨，使每毫升菌懸液含1×105-6菌細胞，每個(gè)試管內接種50 μl菌懸液，每個(gè)濃度接種2管，同時(shí)用葡萄糖蛋白胨瓊脂基作對照。置36℃恒溫箱內，每日觀(guān)察生長(cháng)情況，分別于1，2，3周做記錄，3周后最大稀釋度無(wú)菌落生長(cháng)為最小抑菌濃度(MIC)。結果見(jiàn)表1�！”�1 中藥提取物膠囊-氟康唑對念珠菌、曲霉MIC

　3 結果

　　中藥組合物體外抗真菌活性實(shí)驗結果：對致病性白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌、煙曲霉、黃曲霉均有較強的抗菌作用，對白念珠菌抗菌作用最強。對氟康唑耐藥菌株克柔氏念珠菌、煙曲霉、黃曲霉也有很好的抗菌作用。

　　4 討論

　　中藥組合物(膠囊)由桂皮油和藿香油組成，桂皮油是肉桂的揮發(fā)油，其化學(xué)成分為肉桂醛(cinnamalbehyde)，藿香油主要成分是藿香醇。文獻報道[1～4]，兩種揮發(fā)油對多種真菌有抗菌作用。本實(shí)驗將桂皮油和藿香油組合在一起，桂皮油對念珠菌(白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌)，MIC90 0.06～0.13 mg/ml，藿香油為0.03～0.06 mg/ml，均有很強的抗菌活性，對克柔氏念珠菌的抗菌活性?xún)?yōu)于氟康唑，對煙曲菌和黃曲菌桂皮油MIC90為0.26 mg/ml，藿香油為0.06～0.13 mg/ml，均顯示較強的抗菌活性，而氟康唑對煙曲菌、黃曲菌、克柔氏念珠菌均耐藥。

由于近年來(lái)侵襲性真菌感染(IFI)的發(fā)病率逐漸增多，特別是血液系統惡性疾病和和器官移植患者的發(fā)病和死亡病例均有明顯增加，這嚴重危害人類(lèi)的健康。中藥組合物研制成膠囊制劑，進(jìn)行體外抗真菌活性實(shí)驗，對常見(jiàn)致病性白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔氏念珠菌和煙曲菌、黃曲菌有顯著(zhù)的抗菌活性，為中藥口服制劑，治療深部真菌感染提供了理論依據。鑒于中藥組合物(膠囊)抗真菌活性較強，毒性低、藥源充足、價(jià)格低廉，作者認為，該藥有很好的應用前景，應進(jìn)一步研究、開(kāi)發(fā)和推廣。

作者：王剛生， 鄧潔華  《時(shí)珍國醫國藥》

【參考文獻】
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