尿路念珠菌感染的菌種構成及其體外對抗真菌藥物耐藥性的變遷分析

【摘要】 尿液標本念珠菌的分離率逐年增高，對抗真菌藥物耐藥率呈升高趨勢。臨床上應重視念珠菌的培養和藥敏試驗，要加強念珠菌耐藥性監測，科學(xué)合理使用抗真菌藥物。 
【關(guān)鍵詞】真菌分布  耐藥變遷 
        近年來(lái)，由于免疫抑制劑和廣譜抗生素的使用，尿路念珠菌感染發(fā)病率逐步升高，作者對2007年至2009年各臨床科室尿路感染病人尿標本的念珠菌進(jìn)行鑒定，并對檢測到的主要念珠菌菌株進(jìn)行藥敏試驗分析，現報告如下： 
        1  資料與方法 
        1.1一般資料  2815份尿標本均為本院臨床科室送檢。培養基：沙氏培養基，血液培養基及中國蘭培養基（培養基干粉由法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)）由我科配制 ，科瑪嘉顯色培養基(由貝瑞特生物技術(shù)有限責任公司提供)。恒溫電熱培養箱（江蘇蘇泰公司生產(chǎn)）。VITEK-32鑒定系統，由法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)。ROSCO紙片擴散法藥敏試驗包含５種抗真菌藥物，即氟康唑（25 ug），氟胞嘧啶（10 ug），兩性霉素Ｂ(10 ug)，制霉菌素（50 ug），伊曲康唑（8 ug），念珠菌藥敏培養基（改良SHADOMY培養基），均由丹麥ROSCO生產(chǎn)。 
        1.2方法  將尿液標本接種沙氏培養基，中國蘭培養基和血液培養基，35℃恒溫培養箱培養24-48小時(shí)，沙氏培養基28℃恒溫培養箱培養24-48小時(shí)，挑取可疑菌落，接種科瑪嘉顯色培養基同時(shí)使用VITEK-32　YBC卡上機鑒定，必要時(shí)補充糖同化和發(fā)酵試驗，用ROSCO紙片擴散法做藥敏試驗：嚴格按ROSCO紙片擴散法操作步驟將稀釋好的菌液涂布在改良的SHADOMY培養基上，無(wú)菌手續貼好藥敏紙片，35-37℃ 孵育18-24小時(shí)后讀取結果。所得結果歸類(lèi)成敏感、中度敏感或耐藥。藥敏結果判斷嚴格按ROSCO提供的紙片擴散法藥敏試驗使用說(shuō)明書(shū)中的折點(diǎn)判斷標準執行。 
        2  結果 
        2.1菌株分離結果  3年間分離真菌277株，2007年至2009年分別為60株、86株、131株，四種分離最多的念珠菌株為熱帶念珠菌99株，白色念珠菌87株，光滑念珠菌51株和克柔念珠菌31株，念珠菌感染菌株分離情況分析如下：2007年以白色念珠菌（33.3%）為主，2008年以白色念珠菌（37.2%）和熱帶念珠菌（36.0%）為主，2009年又增加了克柔念珠菌、近平滑念珠菌。
 2.2真菌菌株對抗真菌藥物的敏感性　277株真菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、制霉菌素、伊曲康唑、氟康唑5種抗真菌藥物的敏感百分率分析如下：5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，其次為伊曲康唑，而氟康唑的耐藥性不容樂(lè )觀(guān)，因而臨床對唑類(lèi)藥物應用較多有關(guān)，但隨著(zhù)臨床上的大量應用，出現了耐氟康唑的白色念珠菌和其他耐氟康唑的念珠菌呈上升趨勢，熱帶念球菌對氟康唑的耐藥性較為嚴重，應引起臨床重視，另外需注意的是處于中介度的菌株占有一定比例，唑類(lèi)藥物存在交叉耐藥現象。氟胞嘧啶更易使念珠菌對其產(chǎn)生耐藥性，而且日趨嚴重。 
        3  討論 
        通過(guò)分析可以看出：白色念珠菌仍是引起臨床感染的主要真菌，但其構成比由2007年的33.3%降至2008年26.7%，而熱帶念珠菌的構成比3年間增加了8.2%，3年來(lái)念珠菌的分離株數大幅增多，念珠菌菌屬也逐年增多。隨著(zhù)檢驗技術(shù)的進(jìn)步和研究的深入，新的條件致病菌還會(huì )不斷地被發(fā)現。非白色念珠菌引起的尿路感染遠較其他部位念珠菌感染中非白念珠菌引起多見(jiàn)，可能與尿液成分和pH值更適合非白念珠菌生長(cháng)有關(guān)，熱帶念珠菌的檢出率逐年增加，上升為第一位，取代了白色念珠菌，另外，菌種分布有多樣化的趨勢，這可能與實(shí)驗條件、操作方法以及抗真菌治療的干預、生態(tài)學(xué)變化和人員流動(dòng)等因素有關(guān)，另外也與我省氣候條件、環(huán)境衛生狀況有一定的關(guān)系。臨床應合理使用抗生素，在治療過(guò)程中密切觀(guān)察念珠菌檢出情況，一旦出現念珠菌感染盡快調整治療方案，避免預防性抗生素的使用。 
        近年來(lái)，醫院內念珠菌感染和發(fā)病率日趨上升，且隨著(zhù)抗真菌藥物的應用，念珠菌耐藥性也明顯增加。隨著(zhù)抗真菌藥物的增多，將不同作用機理的藥物聯(lián)合應用，以期產(chǎn)生協(xié)同作用。 
        近年來(lái)念珠菌感染的發(fā)生率迅速升高，尿路念珠菌感染成為重要的醫院內感染之一。檢驗科需要進(jìn)一步普及和推廣規范的抗念珠菌藥物敏感性試驗法，爭取不同地區之間在操作規范、結果準確等方面確實(shí)具有可比較性。廣大醫務(wù)工作者不但應對念珠菌感染引起高度重視，應建立有效的早期診斷，嚴格控制和合理使用抗生素及抗真菌藥物，以減緩耐藥菌株的上升。 

作者：孔超 董娜 孔令文

參 考 文 獻 
[1]吳彼得.尿路真菌感染.臨床腎臟病雜志，2008，8（6）：251-253. 
[2] Fung JJ. Fungal infection in liver transp lantation［J］.Transpl Infect Dis,2002,(suppl3)：s18-s23.

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