腦膜炎奈瑟氏菌的生物危害評估報告

一、細菌的傳播與致病

 

腦膜炎奈瑟氏菌(N. meningitidis)又名腦膜炎雙球菌,是致流行性腦膜脊髓炎的病原菌。人類(lèi)是腦膜炎奈瑟氏菌的唯一宿主。.腦膜炎奈瑟氏菌作為條件致病菌,常存在于患者或帶菌者的鼻咽腔黏膜中,主要通過(guò)飛沫直接從空氣中傳播,無(wú)論是在發(fā)展中國家或是發(fā)達國家均可以引起較高的流腦發(fā)病率和死亡率。但對腦膜炎奈瑟氏菌的致病機制目前尚未完全清楚。

 

流行性腦脊髓膜炎是由腦膜炎奈瑟菌引起的急性化膿性腦膜炎，為急性呼吸道傳染病。主要臨床表現為發(fā)熱、頭痛、嘔吐、皮膚粘膜瘀點(diǎn)、瘀斑及腦膜刺激征。重者可有敗血癥性休克和腦膜腦炎。腦脊液可呈化膿性改變。

 

二、細菌的生物學(xué)特性

 

腦膜炎奈瑟菌屬奈瑟氏菌屬，革蘭染色陰性，呈腎形雙球菌，又稱(chēng)“腦膜炎雙球菌”。存在于人體中性粒細胞內、外，可從帶菌者、病人的鼻咽部和病人的血液、腦脊液、皮膚瘀點(diǎn)、瘀斑中發(fā)現。培養的營(yíng)養要求較高,普通培養基上不生長(cháng),在含有血清,血液等培養基上才能生長(cháng).專(zhuān)性需氧,大氣中含有5-10% CO2時(shí)生長(cháng)更好,最適pH 7.4~7.6,最適溫度37℃,低于30℃不能生長(cháng)。

 

腦膜炎奈瑟菌按表面特異性多糖抗原之不同分為A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、H、I、K、L13個(gè)亞群（90%以上為A、B、C3個(gè)亞群）。我國流行菌群以A群為主，但近年屢有B、C、W135等亞群局部流行或暴發(fā)。

 

腦膜炎奈瑟菌在體外生活力、抵抗力極弱，對干燥、寒冷、日光極為敏感。溫度低于30℃或高于50℃皆易死亡，故細菌學(xué)檢測應注意采集標本后及時(shí)送檢。對常用消毒劑亦極為敏感。

 

三、細菌的實(shí)驗室檢查及其它檢查

 

1、血常規：白細胞總數明顯增加，一般在（10－20）×109/L，中性粒細胞升高在80％－90%以上。

 

2、腦脊液檢查：病初或休克型病人，腦脊液外觀(guān)多為澄清，細胞數、蛋白和糖量尚無(wú)改變，可表現為壓力增高。典型的流腦腦膜炎期，壓力常增高至200毫米水柱以上，外觀(guān)呈渾濁米湯樣甚或膿樣；白細胞數明顯增高至1000×106/L以上，并以多核細胞增高為主；糖及氯化物明顯減少，蛋白含量升高。 對臨床有明顯顱壓增高表現者，宜在應用甘露醇脫水降低顱壓后再行腰穿；腰穿時(shí)應使腦脊液緩慢流出，必要時(shí)腰穿針芯不要全部拔出，以免因腦脊液流出過(guò)快、過(guò)多而發(fā)生腦疝。

 

3、細菌學(xué)檢查：

 

（1）涂片：取皮膚瘀點(diǎn)處的組織液或離心沉淀后的腦脊液做涂片染色�？稍谥行粤＜毎麅�、外，有革蘭陰性腎形雙球菌，陽(yáng)性率約60％－80%。

 

（2）培養：取瘀斑組織液、血或腦脊液，進(jìn)行培養。應在使用抗菌藥物前培養。

 

4、血清免疫學(xué)檢查：常用對流免疫電泳法、乳膠凝集試驗、反向間接血試驗、ELISA法等進(jìn)行抗原檢測，主要用于早期診斷，陽(yáng)性率均在90%以上。       　　

 

四、細菌的防治

 

流腦，尤其是暴發(fā)型流腦病情進(jìn)展迅速，主要死因為敗血癥導致的休克、DIC和腦水腫腦疝。因此，及早的診斷、嚴密的病情觀(guān)察是本病治療的基礎。對疑似病例要按呼吸道傳染病隔離。

 

1、普通型的治療

 

（1）病原治療：盡早應用敏感并能透過(guò)血腦屏障的抗菌藥物。

 

①青霉素G：尚未發(fā)現明顯耐藥。為治療流腦首選抗菌藥物，宜大劑量使用，以使腦脊液含量達到有效濃度。成年人：20萬(wàn)IU/kg/d（可用320萬(wàn)IU－400萬(wàn)IU/次，靜脈滴注，q8h）；療程5－7天。兒童：20萬(wàn)IU－40萬(wàn)IU/kg/d，分3－4次靜脈滴注；療程同成人。

 

②氯霉素：成年人：2－3g/d，兒童40－50mg/kg/d分次靜脈滴注；療程5－7天。重病人可聯(lián)合應用青、氯霉素。在應用過(guò)程中應注意其對骨髓造血功能的抑制作用。

 

③頭孢菌素：首選頭孢曲松鈉�？咕�活性強，療效類(lèi)似于青霉素，但價(jià)格較高，宜用于不能應用青霉素的重癥病人。成年人和12歲以上兒童：2－4g/d，分1－2次靜脈滴注。兒童：75－100mg/kg/d。療程均為3-5天。應用過(guò)程中，應注意二重感染的發(fā)生。也可選用頭孢呋腭，劑量3－9g/d，兒童200mg/kg，可分4次靜脈滴注，療程3－5天。

 

（2）對癥治療：應保證熱量及水電解質(zhì)平衡。高熱時(shí)可用物理降溫和藥物降溫；顱內高壓時(shí)予20%甘露醇1－2g/kg，快速靜脈滴注，根據病情4－6小時(shí)一次，可重復使用，應用過(guò)程中應注意對腎臟的損害。

 

2、暴發(fā)型流腦的治療

 

（1）休克型治療

 

①盡早應用抗菌藥物：可聯(lián)合應用青、氯霉素，或頭孢曲松鈉，頭孢呋腭用法同前，但首劑應加倍。

 

②迅速糾正休克：

 

a.擴充血容量及糾正酸中毒治療：最初1小時(shí)內成年人1000ml，兒童10－20ml/kg，快速靜脈滴注。輸注液體為5%碳酸氫鈉液5ml/kg和低分子右旋糖酐液。此后酌情使用晶體液和膠體液，24小時(shí)輸入液量2000－3000ml之間，兒童為50－80ml/kg，其中含鈉液體應占1/2左右，補液量應視具體情況。原則為“先鹽后糖、先快后慢”。根據監測血pH值或CO2結合力，用5％碳酸氫鈉液糾正酸中毒。

 

b.血管活性藥物應用：在擴充血容量和糾正酸中毒基礎上，正確使用血管活性藥物以糾正異常的血液動(dòng)力學(xué)改變和改善微循環(huán)，常用的藥物為山莨菪堿、多巴胺、間羥胺等。

 

③DIC的治療：如皮膚瘀點(diǎn)瘀斑迅速增多及擴大融合成大片瘀斑，且血小板急劇減少，凝血酶原時(shí)間延長(cháng)，纖維蛋白原減少時(shí)應高度懷疑有DIC，宜盡早應用肝素，劑量為0.5－1.0mg/kg，加入10%葡萄糖液100ml靜脈滴注，以后可4－6小時(shí)重復一次。應用肝素時(shí)，用凝血時(shí)間監測，調整劑量。要求凝血時(shí)間維持在正常值的2.5－3倍為宜，如在2倍以下，可縮短間隔時(shí)間，增加劑量，如超過(guò)3倍，可延長(cháng)間隔時(shí)間或減少劑量。如有明顯出血，可輸入有肝素抗凝的新鮮血。肝素治療持續到病情好轉為止。

 

④腎上腺皮質(zhì)激素的使用：適應癥為毒血癥癥狀明顯的病人。有利于糾正感染中毒性休克。氫化考的松200－500mg/日，兒童劑量為8－10mg/kg/d。靜脈注射，一般不超過(guò)3天。

 

（2）腦膜腦炎型的治療

 

①抗菌素的應用：同上。

 

②及時(shí)發(fā)現和防治腦水腫、腦疝：治療關(guān)鍵是及早發(fā)現腦水腫，積極脫水治療，預防發(fā)生腦疝�？捎酶事洞贾委�，用法同前，此外還可使用白蛋白、速尿、激素等藥物治療。

 

（3）防治呼吸衰竭：在積極治療腦水腫的同時(shí)，保持呼吸道通暢，必要時(shí)氣管插管，使用呼吸機治療。

 

3、混合型的治療 此型病人病情復雜嚴重，治療中應積極治療休克，又要顧及腦水腫的治療。因此應在積極抗感染治療的同時(shí)，針對具體病情，有所側重，二者兼顧。

 

五、細菌的生物安全防護

 

根據《病原微生物生物實(shí)驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)規定，人間傳播的微生物名錄（待頒布）腦膜炎奈瑟氏菌屬于二類(lèi)，BSL-2。相關(guān)的防護事宜包括：

 

（1）操作要求

 

1、實(shí)驗時(shí)，未經(jīng)實(shí)驗室主任同意，限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗室。

2、不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。

3、所有的操作過(guò)程應盡量細心，避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。

4、對于污染的銳器，必須時(shí)刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等。

5、注射和吸取感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì )被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。

6、打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照相關(guān)的規定進(jìn)行消毒。

7、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內，密封運出實(shí)驗室。離開(kāi)該系統進(jìn)行消毒的物料，在轉移前應包裝，其包裝應符合有關(guān)的法規。

8、濺出或偶然事件中，明顯暴露于傳染源時(shí)，要立即向實(shí)驗室主任報告。進(jìn)行適當的醫學(xué)評估、觀(guān)察、治療，保留書(shū)面記錄。

9、按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后，實(shí)驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。污染的設備在送去修理、維護前，要按照相關(guān)的規定消毒；在離開(kāi)設施轉移前，要按照相關(guān)的規定打包運輸。

（2）安全設備

 

1、正確使用和保養生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。

2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實(shí)驗過(guò)程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。

3、涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí)，若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放實(shí)驗室內離心。

4、當必須在生物安全柜外處理標本時(shí)，需采取面部保護措施（跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。

5、在實(shí)驗室內，必須使用專(zhuān)用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實(shí)驗室區域時(shí)，防護服必須留在實(shí)驗室內。防護服可以在實(shí)驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

6、可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設備時(shí)，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重復使用，不能用于接觸“潔凈”的表面（鍵盤(pán)、電話(huà)等），也不應當戴著(zhù)到實(shí)驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。