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    臨床標本中粘質(zhì)沙雷氏菌的鑒定及藥敏分析



    錄入時(shí)間:2010-12-10 9:17:54 來(lái)源:《實(shí)用醫技雜志》

    [摘要] 粘質(zhì)沙雷氏菌廣泛分布于自然界,近年來(lái)漸成為臨床上常見(jiàn)的條件致病菌。本文報道了46株從臨床標本中分離得到的粘質(zhì)沙雷氏菌的生化特性。本菌屬于腸桿菌科,IMViC試驗42株為--++模式(91.3%),4株為-+++模式(8.7%)。主要生化試驗氧化酶陰性,葡萄糖發(fā)酵,硝酸鹽還原陽(yáng)性,葡萄酸鹽陽(yáng)性,苯丙氨酸陰性,動(dòng)力陽(yáng)性,山梨醇陽(yáng)性,DNA酶陽(yáng)性。與同屬中其他種的主要區別是阿拉伯糖、棉子糖、木糖均為陰性。對46株粘質(zhì)沙雷氏菌進(jìn)行14種抗生素的藥物敏感試驗,結果表明粘質(zhì)沙雷氏菌對多種抗生素均表現出較高的耐藥率。
     。坳P(guān)鍵詞] 粘質(zhì)沙雷氏菌;藥物敏感;生化實(shí)驗
      粘質(zhì)沙雷氏菌廣泛分布于自然界,是水和土壤中的常居菌群,亦是臨床上常見(jiàn)的條件致病菌,在機體免疫功能降低時(shí)可引起肺部和尿道感染以及敗血癥。我們對從臨床標本中分離出的46株粘質(zhì)沙雷氏菌進(jìn)行了鑒定和藥物敏感試驗,結果報告如下。
      1 材料和方法
      1.1 材料
      1.1.1 菌株來(lái)源 46株粘質(zhì)沙雷氏菌均分離自本院臨床標本,其中尿液16株,前列腺液7株,胸腹水6株,咽喉分泌物6株,血液4株,傷口分泌物4株,膽汁3株。
      1.1.2 培養基用法 國產(chǎn)哥倫比亞瓊脂及馬頭羊血制備。生化鑒定用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的API 20E鑒定條?股丶埰杀本┨靿幬锷锛夹g(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)。微量生化反應管由浙江省軍區防疫檢疫所生產(chǎn)。
      1.2 方法
      1.2.1 細菌分離鑒定 細菌分離培養按常規方法進(jìn)行,標本接種血瓊脂和麥康凱平板,35 ℃培養18 h~24 h,凡氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌,采用API 20E鑒定。用微量生化反應管進(jìn)行補充生化試驗。主要是葡萄酸鹽、苯丙氨酸、動(dòng)力、山梨醇、DNA酶、阿拉伯糖、棉子糖、木糖以及葡萄糖OF試驗。
      1.2.2 藥物敏感試驗 采用KB法,對46株粘質(zhì)沙雷氏菌進(jìn)行14種常用抗生素的敏感性測定,并以大腸埃希菌ATCC 25922進(jìn)行藥物敏感試驗質(zhì)量控制,所有質(zhì)控結果均符合國際臨床實(shí)驗室標準委員會(huì )(NCCLS)藥敏質(zhì)控標準。
      2 結果
      2.1 菌株鑒定 血瓊脂平板上形成大圓形、灰白色、凸起、濕潤、邊緣整齊、不溶血菌落。麥康凱平板上形成無(wú)色半透明菌落。革蘭染色為陰性小桿菌。生化試驗氧化酶陰性,葡萄糖發(fā)酵,硝酸鹽還原陽(yáng)性者初步可推斷為腸桿菌科細菌;葡萄酸鹽陽(yáng)性,苯丙氨酸陰性,動(dòng)力陽(yáng)性,山梨醇陽(yáng)性,DNA酶陽(yáng)性者可推斷為沙雷氏菌屬。進(jìn)一步生化結果如表1者可鑒定為粘質(zhì)沙雷氏菌。IMViC試驗42株為--++模式(91.3%),4株為-+++模式(8.7%)。
    2.2 46株粘質(zhì)沙雷氏菌對14種常用抗生素的耐藥性測定 結果見(jiàn)表2。
      表1 46株粘質(zhì)沙雷氏菌生物學(xué)特性(略)
      表2 46株粘質(zhì)沙雷氏菌對14種常用抗生素的耐藥率(略)
      3 討論
      粘質(zhì)沙雷氏菌長(cháng)期被認為是水和土壤中的常居菌群,對人體無(wú)害,只是近年來(lái)才發(fā)現其可致人體感染,包括泌尿道、呼吸道、腦膜和傷口感染,可引起菌血癥、內毒素休克和心內膜炎。近年來(lái)由粘質(zhì)沙雷氏菌所致的院內感染,尤其是引起傷口感染有上升趨勢,有引起心臟外科、兒科病房爆發(fā)流行的報道。應引起臨床醫務(wù)人員的高度重視。沙雷氏菌屬其他種雖亦偶爾分離,但是否為病原菌尚末確定。沙雷氏菌的一個(gè)特點(diǎn)是產(chǎn)明膠酶、脂酶和DNA酶,其與克雷伯氏菌屬、腸桿菌屬、哈夫尼亞菌屬的主要區別是DNA酶陽(yáng)性。沙雷氏菌屬包括9個(gè)種,臨床上最常見(jiàn),也是生化特征最明顯的是粘質(zhì)沙雷氏菌,粘質(zhì)沙雷氏菌與同屬中其他種的主要區別是阿拉伯糖陰性,棉子糖陰性,木糖陰性。從土壤或水中分離到的粘質(zhì)沙雷氏菌在有氧,特別是在20 ℃培養時(shí)會(huì )產(chǎn)生一種不擴散的紅色色素靈菌紅素,但臨床分離菌株大部分不產(chǎn)色素。粘質(zhì)沙雷氏菌生物型的鑒定:可利用其O和H抗原加以鑒定,但抗血清不易獲得。替代方法包括碳利用試驗和其他表型鑒定方法,此類(lèi)方法已在流行病學(xué)調查中與血清型法聯(lián)合應用。其它產(chǎn)紅色色素的種包括紅色沙雷氏菌和普城沙雷氏菌,但較少從人體分離到。臭味沙雷氏菌可從痰、血和腦脊液標本中分離到,可產(chǎn)生特征性的腐臭馬鈴薯味,有助于鑒別。居泉沙雷氏菌從臨床標本中也可分離出,主要見(jiàn)于傷口滲出液,但居泉沙雷氏菌的生化反應(VP、明膠酶、脂酶、DNA酶陰性)不典型,將來(lái)有可能進(jìn)行進(jìn)一步分類(lèi)[1,2]。我們檢測到的46株粘質(zhì)沙雷氏菌對14種常用抗生素的耐藥率均在39.1%以上,其中對紅霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、慶大霉素、哌拉西林、復方新諾明、頭孢噻吩的耐藥率均在50%以上,顯示沙雷氏菌通常對多種抗生素耐藥。粘質(zhì)沙雷氏菌的不產(chǎn)色素生物型常和多種抗藥R質(zhì)粒介導的耐藥因子有關(guān)[3]。
     
    作者:肖剛,洪國強,陳月燕  林美玲
      參考文獻:
     。1] J.Gerald Collee,Andrew G.Fraser,Barrie P.Marmion,et al.Practical Medical Microbiology[J].churchill livingstone,1996:371.
     。2] Farmer J J Ⅲ,Davis B R,HickmanBrenner F W,et al.Biochemical identification of new species and biogroups of Enterbacteriaceae isolated from clinical specimens[J].Journal of Clinical Microbiology,1985,21:4676.
     。3] 葉應嫵,李健齋,王玉琛.臨床實(shí)驗診斷學(xué)(下)[M].人民衛生出版社,1989:20632064.

     

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