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一、糞便直接涂片的優(yōu)缺點(diǎn)：
1、優(yōu)點(diǎn)：①設備簡(jiǎn)單②操作簡(jiǎn)單③時(shí)間短④形象直觀(guān)，直接了解糞便菌群的“像”，熟練者對診斷菌群失調有較高的準確性。
2、缺點(diǎn)：①檢驗者必須有一定的經(jīng)驗，否則易判斷錯誤②主要是定性檢查，確定分度較困難。
二、操作技術(shù)：
1、涂片 將新鮮大便直接涂抹在潔凈的玻片上，糞便不可稀釋以防細菌變形。標本務(wù)求新鮮，涂片厚薄適宜。
2、外觀(guān) 肉眼檢查外觀(guān)顏色、形狀（若含有膜狀物的大便應補做艱難梭菌培養）。
3、鏡檢 染色技術(shù)是診斷準確成功的關(guān)鍵，革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌要對比鮮明。鏡檢時(shí)應將涂片視野全面觀(guān)覽，切不可看幾個(gè)視野就計數或報告。
三、檢查方法：
1、細菌總數：觀(guān)察菌群涂片首先要總覽細菌總數。了解涂片上細菌的數量是增多還是減少，有無(wú)優(yōu)勢菌或真菌。細菌總數過(guò)多的情況較少見(jiàn)或不易引起重視。菌群失調時(shí)細菌總數多在正常、減少或消失。
細菌總數評定標準
每油鏡視野細菌數評價(jià)
＜10顯著(zhù)減少
11—100明顯減少
101—500略微減少
501—5000正常
＞5000增多
2、觀(guān)察革蘭氏陽(yáng)性、陰性桿菌及球菌的比率改變
革蘭氏陽(yáng)性桿菌：革蘭氏陰性桿菌：革蘭氏陽(yáng)性球菌：革蘭氏陰性球菌（包括球菌/桿菌）比率反映了糞便菌群的質(zhì)素，它一般不受糞便稀釋或濃縮的影響，所以較細菌總數有更大的意義，更能反映菌群的本質(zhì)和預后。
選定有代表性視野中的部分區域作細菌分類(lèi)計數，需要數100—200個(gè)細菌以求得比例。不同年齡的人的比例都不一樣，一般桿菌與球菌比例約為75：25。
各年齡組細菌比率平均值的正常參考值（%）
|
年齡 |
革蘭氏陽(yáng)性桿菌 |
革蘭氏陰性桿菌 |
革蘭氏陽(yáng)性球菌 |
革蘭氏陰性球菌 |
|
1d： |
30.7—61.5 |
38.5—6.9 |
0—2.2 |
0—0.01 |
|
2d： |
60.0—71.6 |
34.8—36.9 |
3.0—3.5 |
0—0.01 |
|
3d： |
66.9—82.7 |
16.0—31.4 |
1.3—1.6 |
0—0.05 |
|
4d： |
79.2—86.2 |
12.4—19.2 |
1.4—1.7 |
0—0.1 |
|
5d： |
85.5—87.51 |
1.0—12.8 |
1.4—1.7 |
0.08—0.4 |
|
6d—7d： |
75.4—90.1 |
7.2—20.8 |
1.3—2.9 |
0.1—0.6 |
|
8d—15d： |
72.4—93.3 |
5.3—18.9 |
0.8—1.9 |
0.1—0.8 |
|
1個(gè)月： |
76.1—95.2 |
3.3—21.8 |
0.9—2.6 |
0.2—1.1 |
|
3個(gè)月： |
80.7—95.9 |
3.2—17.0 |
0.9—2.8 |
0.3—1.5 |
|
半年： |
82.1—96.4 |
2.3—15.8 |
0.5—2.6 |
0.2—1.1 |
|
1歲： |
78.4—94.5 |
3.5—16.6 |
1.5—2.6 |
0.3—1.7 |
|
2歲： |
68.3—90.6 |
7.5—26.6 |
1.8—12.2 |
0.2—2.1 |
|
5歲： |
51.7—86.3 |
10.6—37.7 |
2.0—13.2 |
1.1—5.4 |
|
10歲： |
56.7—88.5 |
7.6—30.7 |
2.5—12.2 |
2.0—6.7 |
|
18—25歲： |
54.3—78.3 |
12.2—35.2 |
2.3—10.5 |
2.4—9.0 |
|
26—40歲： |
54.3—78.6 |
12.2—35.2 |
2.2—12.5 |
2.4—9.0 |
|
41—55歲： |
39.4—59.3 |
37.3—49.6 |
2.4—5.9 |
3.4—6.7 |
|
56—65歲： |
35.3—56.8 |
44.3—49.6 |
2.3—5.9 |
3.6—6.7 |
|
66歲： |
34.5—55.2 |
26.1—49.6 |
2.8—10.9 |
3.3—7.4 |
檢查要點(diǎn)與報告要點(diǎn)
為了對菌群失調的診斷有個(gè)基本的了解可將直接糞便涂片觀(guān)察到的細菌分為四類(lèi)：革蘭氏陽(yáng)性桿菌、革蘭氏陰性桿菌、革蘭氏陽(yáng)性球菌、革蘭氏陰性球菌。通過(guò)標本中四類(lèi)細菌的百分比、有無(wú)比例倒置與正常菌群平衡狀態(tài)的正常百分比的比較，來(lái)評定受檢者的菌群狀態(tài)。
一、腸道菌群的種類(lèi)：
正常健康人的糞便，其細菌總數約為1010個(gè)/g左右，分類(lèi)可達幾百種，絕大多數是專(zhuān)性厭氧菌，約占總數的99.9%，占少數的是兼性厭氧菌、專(zhuān)性需氧菌及微需氧菌。常見(jiàn)的有：
⑴、雙歧桿菌屬 革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌。
⑵、優(yōu)桿菌屬（真桿菌屬） 革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌。
⑶、乳桿菌屬 革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌。
⑷、擬桿菌屬（類(lèi)桿菌屬） 革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。
⑸、腸桿菌屬 革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。
⑹、消化鏈球菌屬 革蘭氏陽(yáng)性球菌。
⑺、消化球菌屬 革蘭氏陽(yáng)性球菌。
⑻、腸球菌屬 革蘭氏陽(yáng)性球菌。
⑼、葡萄球菌屬 革蘭氏陽(yáng)性球菌。
⑽、梭桿菌屬 革蘭氏陰性桿菌。
⑾、梭狀芽胞桿菌屬 革蘭氏陽(yáng)性有芽胞的粗大桿菌。
⑿、酵母菌 革蘭氏染色陽(yáng)性，著(zhù)色不均勻。 2 腸道菌群糞便涂片檢查
二、報告方式：
1、文字描述法：
具體描述細菌總數，革蘭氏陽(yáng)性桿菌、革蘭氏陰性桿菌、革蘭氏陽(yáng)性球菌、革蘭氏陰性球菌變化，有無(wú)優(yōu)勢菌，可能的特征性細菌，并考慮該年齡段菌群特點(diǎn)，提出腸道菌群的初步印象診斷。如：
涂片所見(jiàn)：
細菌總數： 明顯減少
革蘭氏陽(yáng)性桿菌： 較正常明顯減少
革蘭氏陰性桿菌： 較正常略減少
革蘭氏陽(yáng)性球菌： 較正常增加
革蘭氏陰性球菌： 未見(jiàn)改變
酵母菌： 較正常略有增加
其它： 可見(jiàn)少量膿細胞
鏡下印象： 呈Ⅱ度菌群失調改變
還可在報告中增加描述，如球菌是鏈球菌，有梭狀芽胞桿菌等等，另正常的或未見(jiàn)到的可以不報告，如革蘭氏陰性球菌、酵母菌等。
Ⅰ、Ⅱ度菌群失調是數量改變，Ⅲ度菌群失調是質(zhì)量的改變。
2、菌群失調分度診斷的標準：
分度ⅠⅡⅢ
臨床表現為潛伏型，臨床癥狀不明顯，是可逆的，即只要去除病因，不經(jīng)治療也能恢復。為局限型，通常是不可逆的，即不經(jīng)治療難以自然恢復。臨床有慢性病的表現。為彌漫型，又稱(chēng)二重感染或菌交替癥。主要表現急性腹瀉，排便次數多，常見(jiàn)性狀多呈粘液性和稀水樣、膿血便。病情重或兇險。
糞便外觀(guān)可以是正常成形軟便，或不成形軟便或稀便。多為程度不等的稀便，也可為粘液便、水樣便、膿血便或柏油樣便。多為程度不等的稀便、也可為粘液便，常呈黃綠色或黑色。
涂片可見(jiàn)細菌總數在正常范圍，正常低值或略有減少；革蘭陽(yáng)性桿菌在正常低值；革蘭陰性桿菌多有增加；革蘭陽(yáng)性球菌在正常高值或增加；類(lèi)酵母樣菌、梭菌常有增加；總之，僅是數量和比例輕度改變。細菌總數明顯減少或無(wú)明顯改變，偶見(jiàn)部分病例細菌顯著(zhù)減少；革蘭陽(yáng)性桿菌明顯減少；革蘭陰性桿菌明顯增多，有時(shí)達90%以上；有的病例革蘭陽(yáng)性球菌增多（常見(jiàn)有葡萄球菌鏈球菌）、桿菌和球菌比例倒置（正常值約為75：25左右）。類(lèi)酵母菌或梭菌呈明顯增多，總之，糞便菌群已有明確改變，Ⅱ度菌群失調應補做糞便細菌分離培養和鑒定。細菌總數呈顯著(zhù)減少，糞便中原來(lái)的菌群大部分成員被抑制，只有一種細菌或真菌占絕對優(yōu)勢，最常見(jiàn)有葡萄球菌、白色念珠菌、致病性大腸桿菌、艱難梭菌、綠膿桿菌（即銅綠假單胞菌）和肺炎克雷伯菌等�？傊�，原菌群中的某一種少數菌成為菌群的絕對優(yōu)勢是Ⅲ度菌群失調癥的主要特點(diǎn)，應同時(shí)做糞便細菌的分離和鑒定。
各度之間并沒(méi)有一個(gè)明顯的，指標性的分界線(xiàn)，要嚴格的區分是有困難的。檢驗者應根據病人年齡、糞便性狀、病情表現、用藥治療等情況，綜合進(jìn)行判斷菌群失調。
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