兩種培養基對嗜血桿菌屬分離鑒定的比較

 嗜血桿菌屬與臨床有關(guān)的種有9個(gè)，而流感嗜血桿菌是一種只侵犯人的兼性厭氧的革蘭陰性桿菌，主要寄生在上呼吸道，與許多感染性疾病有關(guān)。為了選擇檢測效果好、成本低的培養基對嗜血桿菌屬進(jìn)行鑒定與分型，本實(shí)驗利用進(jìn)口原料配制的培養基（H1）和國產(chǎn)原料配制的培養基（H2）對住院病人呼吸道感染者痰液及咽拭子標本200份，其中成人152份、兒科住院患者48份的嗜血桿菌細菌進(jìn)行了分離培養及鑒定并做血清學(xué)分型。

    1  材料與方法

    1.1  培養基  （1）用進(jìn)口原料配制的培養基（H1），Oxid公司的胰蛋白大豆瓊脂作基礎，加入10%無(wú)菌羊血，15μg/NAD及300μg/ml 桿菌肽制成巧克力平板。（2）用國產(chǎn)原料配制的培養基（H2）：浙江天和微生物試劑公司的淋病奈瑟氏菌培養基作基礎，加1%酵母粉，10%無(wú)菌羊血，50mg/L萬(wàn)古霉素制成巧克力平板。（3）血瓊脂平板及普通瓊脂平板：常規法制備。（4）浙江產(chǎn)心腦瓊脂加馬血培養基。

    1.2  方法   （1）分離培養：將痰液或咽拭子劃線(xiàn)接種于H1和H2培養基上，置燭缸中（3%～5%CO2），35℃培養24h，選可疑菌做革蘭染色衛星試驗，糖發(fā)酵試驗。（2）流感嗜血桿菌b型乳膠凝集試驗：用于血清分型，區分b型和非b型菌株。（3）將臨床分離的嗜血桿菌屬細菌接種于浙江產(chǎn)心腦瓊脂加馬血培養基置燭缸35℃、24h培養，與H1和H2培養基進(jìn)行比較。

    2  結果

    2.1  H1和H2培養基的比較  （1）嗜血桿菌屬細菌在兩種培養基上生長(cháng)良好雜菌被抑制，H2對草綠色鏈球菌抑制作用明顯。（2）嗜血桿菌分離情況見(jiàn)表1。經(jīng)χ2檢驗，兩種培養基對嗜血桿菌分離率差異無(wú)顯著(zhù)性(P>0.05)。

    2.2  H1培養基對成人與兒童呼吸道標本中嗜血桿菌屬細菌的分離情況  見(jiàn)表2。成人與兒童嗜血桿菌的細菌分別為13株和17株，分離率分別為8.6%和35.4%，其中流感、副流感、副溶血、嗜沫嗜血桿菌的菌株數（分離率）為兩種培養基對200份臨床樣本。表1  嗜血桿菌分離情況表2  成人與兒童臨床標本嗜血桿菌屬分離情況（略）

    2.3  血清分型  臨床分離到的9株流感嗜血桿菌，b型1株，非b型8株。

    2.4  臨床分離的嗜血桿菌屬細菌在國產(chǎn)心腦瓊脂加馬血培養基上均生長(cháng)。

    3  討論

    (1)雖然H2培養檢測結果好，但需要進(jìn)口，成本高，H2培養基利用國產(chǎn)做基礎，降低了成本。該培養基中的萬(wàn)古霉素有效地抑制雜菌生長(cháng)，增加了培養基的選擇性且具有嗜血桿菌菌落易識別的特點(diǎn)。表1顯示H1和H2兩種培養基對嗜血桿菌的分離率差異無(wú)顯著(zhù)性，H1和H2及國產(chǎn)心腦瓊脂加馬血培養基的分離效果相似。

（2）兒童嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌分離率（35.4%，12.5%）高于成人（8.6%，0.52%），呼吸道標本中副流感嗜血桿菌分離率高于流感嗜血桿菌。

作者：唐麗英

   作者單位： 161005 黑龍江齊齊哈爾，齊齊哈爾市第一機床廠(chǎng)職工醫院

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