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    蘋(píng)果的組織培養



    錄入時(shí)間:2010-11-30 14:16:19 來(lái)源:遼寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院

     

    一、蘋(píng)果的形態(tài)特征和生物學(xué)特性

    (一)形態(tài)特征:蘋(píng)果(Malus pumila)屬落葉喬木,樹(shù)木高大,生長(cháng)勢強,枝條多直立生長(cháng),果實(shí)圓形、長(cháng)圓形,有色,綠色或紅色等。

    (二)生物學(xué)特性:年平均溫度在714℃的地區均可栽培,春季8左右開(kāi)始生長(cháng),平均氣溫1824℃較為適合,夏季溫度大于35,樹(shù)葉和果實(shí)就地出現灼燒,當年降雨量600800mm而且布較均勻時(shí)或大部分在生長(cháng)季中,即可基本滿(mǎn)足蘋(píng)果生長(cháng)的需要。蘋(píng)果是喜光植物,需全日照在22002800 h,才能滿(mǎn)足其對生長(cháng)的需要。蘋(píng)果需要土層深厚透氣性好,保肥力較強,富含有機質(zhì),排水良好的沙壤土和礫質(zhì)壤土。此外蘋(píng)果喜微酸性到中性土壤,pH4.0以下生長(cháng)不良,pH7.8以上則易發(fā)生失綠等缺素癥狀。

    二、蘋(píng)果的花粉培養

    (一)選取小孢子處于單核期的花蕾枝條。小孢子單核期的花芽外部形態(tài)特征是:花芽已充分開(kāi)放,有45片葉完全展開(kāi),中心花蕾吐紅,周?chē)ɡ倜黠@增大,但花序尚未分離。

    (二)把花蕾插入水中,放在13℃的冰箱上預處理。

    (三)摘取花蕾,在70%的酒精浸約半分鐘,再在10%漂白粉上清液中浸1520min,無(wú)菌水沖洗35次。

    (四)胚狀體的誘導。從花蕾中取出花藥,接種到MS04mgL2,4D02 mgL KIN4 mgL IAA38%蔗糖的固體培養基上培養,每瓶3050個(gè)花藥。在2530℃下培養70d后,由變褐的花藥裂口處開(kāi)始產(chǎn)生胚狀體。

    (五)無(wú)根苗的誘導!“旬a(chǎn)生胚狀體的花藥接種到MS05 mgL IBA01 mgL GA31 mgL BA35%蔗糖的固體培養基上培養,在2530℃和光照10h下,約經(jīng)40100d以上,胚狀體可形成次生胚狀體或叢生芽,進(jìn)而發(fā)育成無(wú)根苗。

    (六)根系的誘導。切取無(wú)根苗,轉接到12MS15 mgL IAA152%蔗糖的固體培養基上培養。約經(jīng)1520d,小苗莖基部長(cháng)出根,形成完整植株。也可用50100 mgL IBA溶液浸泡苗梢基部1530 min,再插入無(wú)生長(cháng)素的培養基上,也能較順利地誘導生根。

    (七)花粉植株的移栽。在春、秋季盆栽,保持1520℃和高空氣濕度,一般可使成活率達到40%以上。

    (八)對有些不易生根和提早開(kāi)花的植株,可用嫁接法進(jìn)行繁殖。

    三、莖尖培養

    (一)從健壯母株上,選取帶芽或莖尖的莖段,先用7075%的酒精浸3060s,再用10%的次氯酸鈉溶液浸泡1015 min,或用01%升汞液浸57 min,最后用無(wú)菌水洗35次。

    (二)剝取莖尖材料接種。為了培養無(wú)病毒苗,取的莖尖材料應小,一般為0102㎜。為了加速無(wú)病毒材料的繁殖,或切取較大的莖尖,約0305㎜大小,甚至帶芽的較大莖段,如13㎜。莖尖的大小同培養的難易有關(guān),大的分化率高,分化速度快。所以除了特殊的目的外,寧肯用較大的莖尖。

    (三)把莖尖接種在MSLS2mgLBA300500mgL CHLH3%蔗糖的培養基上,誘導芽的分化。在2530℃和光照下,先培養710d,見(jiàn)莖尖膨大轉綠,再培養在黑暗中,可加快分化和綠化苗的生長(cháng)。一般在暗培養中增殖23代。隨后要轉入光照下,以使苗生長(cháng)健壯。光強以15002000Lx為宜。

    (四)把伸長(cháng)的芽接種到MS051mgL? BA300 mgL CH或改良的MS44umolBA0549umolGA3的培養基上,這時(shí)苗會(huì )長(cháng)大并產(chǎn)生叢生苗。每48周可分別繁殖一次,每個(gè)月約可增殖510倍。

    (五)切取2㎝以上的帶頂芽的苗切段,插入12MS或其它低鹽培養基(如WhiteNitsh)中,附加1mgLIAA、02mgLIBA3mgLGA3,可有效地促進(jìn)生根。

    對生根困難的蘋(píng)果砧木M9的試管苗生根,以先接種在含有2 mgL IBA、162 mgL 根皮酚的LS培養基上,培養47d后,轉入無(wú)激素的LS培養基,生根快而頻率高。

    (六)蘋(píng)果的試管苗也可以不進(jìn)行生根,而直接嫁接到蘋(píng)果矮化砧木上,既可保持樹(shù)體有良好的矮化特性,又可通過(guò)采用無(wú)病毒繁殖材料妥善地解決無(wú)病毒繁殖問(wèn)題。

    。ㄆ撸┥缫瞥鲞M(jìn)行砂培23周,最后在土壤中培養,其成活率可達267569%。

    四、胚培養

    (一)幼胚培養一般在授粉后3050d內取幼果,因這時(shí)種子內的胚已開(kāi)始發(fā)育,較易培養成功。成熟胚培養取自處于成熟期果實(shí)的種子。胚培養的材料只需進(jìn)行表面消毒,一般用70%酒精擦拭即可。

    (二)切開(kāi)果實(shí),取出種子,剝出幼胚或成熟胚,接種在025mgL BA05mgL IAA12MS培養基上,可使胚得到良好發(fā)育。培養條件為2530℃和15002000Lx光照14h。

    (三)胚分化苗的增殖是:把苗切段移植到加有0510mgL BA300mgL CH12MS培養基上,在光下培養,可使綠苗得到增殖和生長(cháng)。

    (四)苗的生根或嫁接和移栽方法,同莖尖培養。

    五、栽培管理

    (一)育苗? 蘋(píng)果育苗主要通過(guò)嫁接,并需進(jìn)行砧木的繁育,接穗的選育等過(guò)程,這里就不再介紹,希讀者翻閱有關(guān)書(shū)藉。

    (二)土壤管理

    蘋(píng)果的土壤管理,首先要深翻改土,創(chuàng )造有利于蘋(píng)果根系生長(cháng)有利因素,然后是經(jīng)常性的蘋(píng)果土壤耕作制度。土壤管理要達到:在生長(cháng)季有適當的水分供應;增加并保持土壤有足夠的有機物質(zhì);適時(shí)供應所需要的營(yíng)養物質(zhì);疏松土壤,通氣透水,增強保肥能力。

    深翻的方法很多,主要的有擴穴(放樹(shù)窩子),全園深翻,隔行或隔株深翻等。深翻的作用在于改良土壤結構和土壤的物理性狀。增加了土壤的孔隙度,提高了土壤的透水性,保肥和保水的能力。因此深翻對蘋(píng)果樹(shù)擴大了根系活動(dòng)的范圍,改善了蘋(píng)果樹(shù)的生產(chǎn)能力。翻時(shí),表土與底土分別放,填土時(shí),表土放在底層,底土放在上層,翻時(shí)最好結合加施有機質(zhì),或混施肥料。翻時(shí),注意不要傷粗根(直徑 1cm以上),還要避免暴露時(shí)間太久,防止日曬或凍傷,填土后注意濕度,土干要灌水,雨季注意排水,以免水泡傷根。

    深翻時(shí)期,根據蘋(píng)果根系生長(cháng)物候期的變化,春季、夏季、秋季都是在蘋(píng)果根系生長(cháng)高峰前進(jìn)行。傷根容易愈合,而且生長(cháng)快,關(guān)鍵在于保持土壤中有適當的濕度。

    (三)施肥時(shí)期和方法

    1.基肥 主要是遲效性肥料,能較長(cháng)期的供應蘋(píng)果吸收。施肥時(shí)期,結果樹(shù)一般是在蘋(píng)果采收后,根系秋、冬季生長(cháng)高峰來(lái)到之時(shí),即8月下旬到9月,最好在秋稍停長(cháng)后即進(jìn)行。

    2.追肥 應根據一年生長(cháng)物候期的需要及時(shí)補給速效性肥料,以調節生長(cháng)與結果的關(guān)系,也為下年打好開(kāi)花、結果的基礎。追肥一般分為以下幾次:開(kāi)花前追肥;花后追肥;秋稍停止生長(cháng)后追肥。

    3.施肥方法 土壤施肥 根系沒(méi)有布滿(mǎn)全園的幼齡果園,施基肥以環(huán)狀施肥法為主,結合放射狀溝施用追肥。

    根外追肥 也叫葉面噴肥,如一株20年生的蘋(píng)果樹(shù),根部施肥用尿素25 kg,根外追肥一般只要100200 g。根外追肥比根部追肥效果快,如用氯化鉀進(jìn)行根外追肥30 S后在葉片內就有鉀的成份存在,一般2h后即可被吸收利用。根外追肥,還可以同防治病蟲(chóng)害噴藥相結合,可以節省勞力,且簡(jiǎn)單易行。

    根外追肥,最好是在較為濕潤和無(wú)風(fēng)的天氣進(jìn)行。干燥多風(fēng)的情況下,水分蒸發(fā)快,濃度容易升高,往往引起藥害。一天之內,以早晨露水未干或傍晚時(shí)進(jìn)行較好。

    4.灌溉和排水

    蘋(píng)果的需水臨界期是在春末夏初新梢迅速生長(cháng)、葉幕大量形成時(shí)。此時(shí)正是我國主要蘋(píng)果產(chǎn)區的干旱季節。所以花前花后結合追肥灌水,是完全必須的。當土壤含水量少于土壤田間最大持水量的6080%時(shí),就需要灌水。為了防止果園的冬旱,在蘋(píng)果落葉土壤封凍時(shí),要灌封凍水,以提高果樹(shù)的抗寒越冬能力。凡自然降水量不能滿(mǎn)足需要的地區,要及時(shí)灌溉。目前蘋(píng)果園灌溉方法,多采用噴灌、滴灌或滲灌。

    5.疏花疏果,調整負載量

    達到結果期的蘋(píng)果樹(shù),以及進(jìn)入盛果期的蘋(píng)果樹(shù),栽培技術(shù)措施的要點(diǎn),首先是促進(jìn)形成花芽。有了花芽,還要千方百計的;ū9,既要開(kāi)花良好,又要座果率高。但隨著(zhù)花量的增多,座果過(guò)多,負擔過(guò)量時(shí),必須進(jìn)行疏花、疏果來(lái)調整負載量。

    疏花疏果的基本理論依據是葉果比;ê凸麑(shí)主要是依靠根的吸收和葉片合成的營(yíng)養物質(zhì)進(jìn)行生長(cháng),其間,有一個(gè)相互依存的供求關(guān)系。國際上公認的蘋(píng)果葉果比約為30401。疏花疏果可采用手工疏花疏果和化學(xué)疏花疏果等方法。

    6.整形技術(shù)

    遼寧省最早總結群眾生產(chǎn)經(jīng)驗。提出“基部三主枝鄰近半圓形”,后來(lái)山東省提出“主干疏層形”,河北省提出“疏散分層形”。此外,有的地區提出“主干疏層延遲開(kāi)心形”等等。這些樹(shù)形,雖然名稱(chēng)不同,但樹(shù)形結構的內容實(shí)質(zhì)是一樣的,現在統稱(chēng)疏散分層形,其主要的結構為:

    1)主干,一般高5070 cm。

    2)全樹(shù)有主枝567個(gè)。第一層3主枝鄰接或鄰近,相距在2040 cm之內,在12年之內選定。主枝的開(kāi)張角在6070度。第二層12個(gè)主枝,第三層2個(gè)主枝(三杈枝落頭)。

    3)層間距,第一層主枝(基部三主枝)距第二層主枝層間距80100120cm。23層的間距可506070 cm。

    4)側枝,基部三主枝各有側枝24個(gè),上層主枝各有側枝13個(gè)。

    5)樹(shù)高,中心干全長(cháng)225m。樹(shù)高在 45 m,冠徑567 m。從1年生苗定植算起,平均每年留成一個(gè)主枝。到落頭完畢,約1315年定形。

    6)修剪技術(shù)

    修剪是調整蘋(píng)果生長(cháng)與結果基本矛盾的一項技術(shù)措施,由于蘋(píng)果生長(cháng)發(fā)育的物候期不同,修剪反應的效果也不一樣,可分為休眠期修剪(冬剪)和生長(cháng)期修剪(夏剪)。蘋(píng)果是每年發(fā)枝一次的樹(shù)種,冬剪作得好,對調整生長(cháng)與結果的關(guān)系,基本上可以解決問(wèn)題。夏剪的作用,主要是彌補冬剪的不足。所以,這里主要介紹前者。

    冬季修剪在調節生長(cháng)與結果矛盾中所要達到的主要作用:一是促使一部分枝條加強生長(cháng),恢復樹(shù)勢,延緩老衰;二是促使一部分枝條能形成花芽,三是有花芽的結果枝促使其結好果,提高質(zhì)量。即在樹(shù)冠中,合理的形成三類(lèi)枝條,即生長(cháng)枝、成花枝、結果枝。也就是為了克服大小年,使樹(shù)冠內形成比例適當的三類(lèi)枝。

    影響枝芽生長(cháng)強度的因子很多,但主要的有三:一是方位,直立的枝向上的芽相對的生長(cháng)較強;二是先端優(yōu)勢;三是芽的異質(zhì)性。充實(shí)飽滿(mǎn)的芽有利于生長(cháng)。影響生成花芽的關(guān)鍵在于新梢能否及時(shí)停止延長(cháng)生長(cháng),有否足夠的營(yíng)養物質(zhì)積累以及內源激素的相互作用。修剪每一個(gè)枝時(shí),要以此為出發(fā)點(diǎn),考慮各枝和枝與枝之間的相互影響。具體剪法和反應的主要趨勢如下:

    ①蘋(píng)果枝梢自然生長(cháng)規律,是一年比一年短。為了加強生長(cháng),對一年生枝在充實(shí)滿(mǎn)芽部位中截,則有利于中截枝所發(fā)新梢的生長(cháng)。

    ②直立封頂枝(大葉芽枝)能冒條旺長(cháng),枝、干所發(fā)生的徒長(cháng)枝,都是自然更新現象,都有利于生長(cháng)。

    ③回縮修剪多年生枝,縮剪到有向上的壯枝、壯芽處,起到更新復壯作用,有利于生長(cháng)。

    ④樹(shù)冠過(guò)于郁閉,適當疏剪外圍枝,有利于通風(fēng)透光,對整體生長(cháng)與成花都有利。

    ⑤長(cháng)放是有利于成花的剪法。新梢任其自然生長(cháng),必然按其本身生長(cháng)發(fā)育規律,一年比一年短,因而停止生長(cháng)早,有利于營(yíng)養物質(zhì)的積累,促進(jìn)花芽分化,形成結果枝。

    ⑥打盲節,在春秋梢交界的癟芽處短截,它的作用同長(cháng)放相似。

    ⑦留橛,剪營(yíng)養枝留短橛。短橛上留下的都是癟芽,發(fā)出的新梢短,停止生長(cháng)早,有利于形成花芽。

    ⑧封頂枝破頂芽(大葉芽破頂)。封頂枝破頂芽使下面一些芽充實(shí)飽滿(mǎn)程度相似,控制單軸延長(cháng)生長(cháng),可以生成幾個(gè)短技,有利于形成花芽。

    ⑨改變直立枝的方位。拿枝,即修剪時(shí)把一年生強旺直立枝,距基部10 cm處彎平。拿彎時(shí),使有清脆折裂聲,輕傷木質(zhì)部,改變方位,有利于營(yíng)養集中于形成花芽。此外,彎、拐、別、壓等也起到同樣作用。

    ⑩有花芽的多年生枝,要適當回縮,保留壯枝壯花芽。大年樹(shù)的一些中長(cháng)果枝,可破頂芽,減少花量,當年再形成花芽。

     

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