我們利用念珠菌顯色培養基,可以選擇性分離念珠菌,并同時(shí)對白色念珠菌、熱帶念珠菌和克柔念珠菌做出鑒定。其結果快速、準確、方法簡(jiǎn)便易行,現介紹如下。
一、材料和方法
1.菌株來(lái)源:1997年11月~1999年1月,我們從住院患者痰液標本分離出59株,陰道分泌物45株,咽拭子13株,大便標本9株,共計126株念珠菌。
2.念珠菌培養基:由河南鄭州博賽科技有限責任公司提供。
3.沙保瓊脂培養基:由浙江省軍區衛生防疫站生產(chǎn)提供。
4.試驗方法:(1)將
二、結果
1.用念珠菌顯色培養基和沙保培養基,對3種念珠菌同時(shí)平行接種進(jìn)行生長(cháng)試驗比較。結果經(jīng)χ2檢驗,沙保培養基對白色念珠菌和熱帶念珠菌差異有顯著(zhù)意義P<0.01和P<0.05,而克柔念珠菌對這兩種培養基差異無(wú)顯著(zhù)意義P>0.5,結果見(jiàn)表1。
表1 兩種培養基對126株念珠菌在48h生長(cháng)情況(株)比較
沙保培養基 |
顯色培養基 | |||||
白色念珠菌 |
熱帶念珠菌 |
克柔念珠菌 | ||||
+ |
- |
+ |
- |
+ |
- | |
+ |
48 |
6 |
37 |
5 |
23 |
7 |
- |
36 |
18 |
23 |
19 |
20 |
10 |
χ2值 |
6.48 |
9.85 |
0.33 | |||
P值 |
<0.01 |
<0.01 |
<0.5 |
注:+表示生長(cháng);-表示不生長(cháng) 2.從念珠菌顯色培養基上,對臨床標本中直接分離鑒定出來(lái)的126株念珠菌進(jìn)行了評估。在培養48~72小時(shí)有54株白色念珠菌落出現特有的綠色,而其他念珠菌均不顯綠色。42株熱帶念珠菌在瓊脂平板周?chē)仙钭氐壬臅炤喖吧钏{灰色菌落。28株克柔念珠菌呈現出粗糙、邊緣為白色,中心呈淡粉紅色之菌落。并經(jīng)生化試驗確認,其符合率為90%~100%。同時(shí)還有1份標本呈現3種菌落顏色,另外3份標本出現2種念珠菌菌落顏色。
三、討論
念珠菌是臨床標本中最常見(jiàn)的酵母樣真菌,引起的感染逐年增多[1]。因而對念珠菌做出快速鑒定十分重要。國際上對臨床菌種鑒定技術(shù)趨向于簡(jiǎn)化程序和用最少的方法鑒定可能多的菌種,達到快速準確的目的[2]。采用念珠菌顯色培養基,其最大的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便快速,可直接從臨床標本中分離和鑒定出白色念珠菌、熱帶念珠菌和克柔念珠菌。即可在48小時(shí)作出正確判斷,經(jīng)生化試驗確認,其符合率為90%~100%。但對念珠菌屬其他種類(lèi)的念珠菌菌落顏色顯色不一,穩定性不好,難以作出直接判定是哪些種類(lèi)念珠菌,還需要按常規方法進(jìn)一步確認。
念珠菌顯色培養基能縮短對白色念珠菌和熱帶念珠菌培養時(shí)間,同時(shí)對標本中雜菌抑制作用上明顯優(yōu)于沙保瓊脂培養基[3]。念珠菌顯色培養基還特別適合臨床大便和陰道分泌物雜菌較多標本檢測[4],尤其是在檢測混合念珠菌感染中,能彌補傳統培養基的不足。并能克服缺乏經(jīng)驗的實(shí)驗室工作人員對標本接種劃線(xiàn)分離不好,加之培養時(shí)間長(cháng)菌落融合在一起難以判別混合菌感染的缺點(diǎn)。如研究中有1份標本檢測出3種念珠菌,另外3份標本均檢測出2種念珠菌,證實(shí)念珠菌顯色培養基易于識別混合感染,并能快速、簡(jiǎn)便準確地分離鑒定臨床常見(jiàn)念珠菌。
參考文獻
[1] 周貴民,謝靈.國內酵母菌感染和實(shí)驗室診斷的現狀及建議.中華醫學(xué)檢驗雜志,1996,19:301-303.
[2] 李安生,呂桂霞,郭寧如,等.常見(jiàn)病原念珠菌鑒定的數碼分類(lèi)方法.中華皮膚科雜志,1994,27:339-341.
[3] Odds FC. Bernaerts R CHRuadar Candida, a New differential isolation wedinm for presumptive identification of chinicauy important candida species. J Clin Uicrob Aug, 1994,1923-1929.
[4] Houang ETS,