竹醋液在體外有較顯著(zhù)的抗真菌和殺菌作用

竹醋液對引起灰指甲、腳氣的真菌的抑菌和殺菌作用均明顯高于氟康唑與酮康唑，而竹醋液是天然活性藥物，毒副作用遠小于氟康唑與酮康唑，作為內服抗真菌藥物．可以增大用藥劑量．因此，竹醋液作為一種天然抗真菌藥物，具有很大的發(fā)展前景．

基于沙保羅氏培養基，采用試管法和打孔法測定了竹醋液對 6 種致病真菌的最低抑菌濃度、最低殺菌濃度和抑菌圈直徑．以常用市售抗真菌藥作為對照，證實(shí)了竹醋液在體外有較顯著(zhù)的抗真菌和殺菌作用．

致病真菌一般分為淺部真菌和深部真菌．淺部真菌多侵犯皮膚、毛發(fā)、指 ( 趾 ) 甲等部位，其發(fā)病率高，污染性強 ．深部真菌或體內感染真菌病則是由于抗癌藥物、放射療法引起的免疫低下，以及抗生素的濫用造成的深部真菌感染，例如肺感染、肝感染等等．目前，常用治療真菌的藥物多為化學(xué)藥物，雖然都有肯定的療效，但內用毒性很大．隨著(zhù)真菌病成為繼癌癥、心血管病之后的人類(lèi)第三大疾從天然產(chǎn)物中篩選抗真菌藥物越來(lái)越受到國內外學(xué)者的重視．竹醋液是竹類(lèi)熱處理過(guò)程中回收的青黃色或黃棕色液體，一種含多種組分的具有獨特煙熏香氣的天然混合物．已經(jīng)發(fā)現，竹醋液具有很強的抑菌作用和特異的消毒功能，外用對小兒濕癥、過(guò)敏性皮炎、腳氣有很好的療效醫藥、衛生、制藥等領(lǐng)域有著(zhù)非常廣泛的用途 ．為此，作者研究了天然竹醋液對致病性皮膚癬菌 ( 紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌、須癬毛癬菌 ) 以及深部真菌 ( 紅色念珠菌、新生隱球菌、煙曲霉菌 ) 抑制效果，并與常用市售抗真菌藥 ( 氟康唑、復方酮康唑軟膏 ) 作了比較．

1 灰指甲的治療方法資料與方法

1 ． 1 藥物

竹醋液 ( 有效抗菌成分 86 ． 08 ％ ) n 取自中國竹鄉福建省建陽(yáng)，土窯燒制，陳放 6 個(gè)月；氟康唑（ 3 ％ ) 廣東太陽(yáng)神集團荔城制藥廠(chǎng)生產(chǎn)；復方酮康唑軟膏 ( 1 ％ ) 上海寶龍藥業(yè)有限公司生產(chǎn)．

1 ． 2 試驗真菌

紅色念珠菌、新生隱球菌、煙曲霉菌、紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌、須癬毛癬菌 6 種規范菌株均購自中科院南京皮膚病研究所．

1 ． 3 培養基

沙氏培養基：蛋白胨 10 g 葡萄糖 40 g 瓊脂 20 g 蒸餾水 1 000 mL 自然 pH 沙氏液體培養基 ( SDB 蛋白胨 10 g 葡萄糖 40 g 蒸餾水 1 000mL 自然 pH ．以上培養基均經(jīng)高壓、 121 ℃ 15 min 滅菌，然后每毫升培養基加入 100,ug 氯霉素，以防細菌污染．

1 ． 4 最低抑菌液度 MIC 測定

藥液培養基的制備．取 11 支無(wú)菌試管，除第一管加入 1 mL 竹醋原液外，其余各管分別加入 1 mL 沙氏液體培養基．在第二至第九管逐管進(jìn)行倍比稀釋使沙氏液體培養基與總體積比分別為： 1 2 1 4 l 8 1 16 1 32 1 64 1 128 1 256 另 2 管不含藥物培養基，第十管為生長(cháng)對照管，第十一管為空白對照管．將 FCZ 粉及 KCZ 軟膏分別以滅菌蒸餾水及 50 ％ 乙醇配成 400 g mL 及 200 g mL 倍比稀釋至 3 ． 125 ~g mL 再與培養基混合制成含系列藥濃度的培養基．另取 2 管不含藥物培養基，一管為生長(cháng)對照管，一管為空白對照管．菌液的制備及接種．紅色念珠菌和新生隱球菌菌液的制備：挑取 1 菌環(huán)新培養真菌菌落混懸于 2mL 生理鹽水中振蕩，使之充分混勻，將其濁度調至 1 X 10 5 X 10 CFU mL ．煙曲霉菌、紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌、須癬毛癬菌 4 種菌液的制備：將受試真菌種于沙氏瓊脂斜面培養基 ( SDA 上培養 10 d ．然后用含 0 ． 1 ％吐溫 80 無(wú)菌生理鹽水 2 mL 注入到 SDA 斜面上，適度振蕩，并用無(wú)菌玻棒輕輕磨擦菌落表面，使大部分分生孢子從菌絲上脫落下來(lái)，再用 4 8 層無(wú)菌紗布靜置過(guò)濾搜集分生孢子，用血球細胞計數板記數，將其濃度調至 1 X 10 510 CFU mL?' ．用微量加樣器從第十管至第一管順序每管加 50 菌液，第十一管不加，混勻，放入溫箱培養 5 d 紅色念珠菌 2 d 新生隱球菌 3 d 觀(guān)察并記錄抑茵結果．

結果判定．美國國家臨床試驗規范化委員會(huì ) (  建議將完全不生長(cháng)的前一管判定為終點(diǎn)．生長(cháng)對照管只加培養基和菌液，不加藥，只有當生長(cháng)

對照管生長(cháng)良好，其它試管隨藥物濃度梯度升高，則菌生長(cháng)梯度受抑時(shí)才證明試驗勝利．結果判斷以茵不生長(cháng)的含藥管的藥物濃度為最低抑菌濃度

1 ． 5 最低殺菌濃度 ( minim fungicid concentr MFC 測定先測出 MIC 后，依次從有抑菌作用的管中取 0 ． 05 mL 轉入新的沙氏瓊脂培養基 ( SDA 再培養 10 d 觀(guān)察殺菌結果．以無(wú)菌落生長(cháng)的最低藥物劑量為最小殺菌濃度．

1 ． 6 抑茵圈的測定

將沙氏瓊脂培養基 ( SDA 加熱熔化，傾注無(wú)菌平皿中，每皿 25 mL 放置凝固后，往每個(gè)平皿中加入 0.6 mL 待試菌懸液，用無(wú)菌涂布棒將菌懸液均勻涂布在平皿中的固體培養基外表．待菌液干后，用打孑 L 器在固體瓊脂培養基表面等距離打 3 個(gè)孔，孔徑約 7Hn ．然后，分別于每孔中加入相同量的藥物液體，每個(gè)劑量組 3 個(gè)平皿，放入溫箱培養 5 d 紅色念珠菌 2 d 新生隱球菌 3 d 測每孑 L 周?chē)�抑菌圈直徑大�。?SPAN lang=EN-US>

2 結果與分析

表 1 給出了竹醋液、氟康唑、復方酮康唑軟膏對 6 種真菌的 MIC 和 MFC 測定結果．表 1 數據顯示，竹醋液對表皮癬菌和深部真菌均有明顯的明竹醋液對表皮癬菌的抑制效果要好于深部真菌．對最低殺菌濃度 MFC 除了紅色毛癬菌和石膏樣毛癬菌的 MIC 與 MFC 完全相同外，其余菌株的 MFC 均比． MIC 高 I 倍．氟康唑片是新型三唑類(lèi)抗真菌藥物，酮康唑屬毗咯類(lèi)抗真菌藥，主要作用機制是通過(guò) P 一 450 依賴(lài)性的 14 a 固醇去甲基酶抑制細胞色素，從而抑制功能性真菌膜的形成以及維持真菌生長(cháng)的甾醇生物合成來(lái)發(fā)揮作用．以上結果標明，竹醋液對表皮癬菌的抑菌和殺菌作用均明顯高于氟康唑與酮康唑；對深部真菌，雖然竹醋液的抑菌和殺菌效果低于氟唑與酮康唑，但竹醋液是天然活性藥物，毒副作用遠小于氟康唑與酮康唑 13i 因此作為內服抗真菌藥物，可以增大用藥劑量．而氟康唑的成人口服劑量只有 50 mg ．從表 2 中亦可得相近的結果．

3 結語(yǔ)

分別測定了竹醋液對 3 種表皮真菌和 3 種深部真菌的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度．真菌培養采用沙保弱氏培養基，最低抑菌濃度和最低殺菌濃度采用試管法測定，并與常用市售抗真菌藥 ( 氟康唑、酮康唑 ) 對照，實(shí)驗標明，竹醋液具有顯著(zhù)的抗表皮真菌作用，這與竹醋液中所含有的有機防腐物質(zhì)如醋酸、丙酸、苯酚和 5 一甲基一 2 一呋喃～甲醛等對真菌具有殺滅抑制作用有關(guān)．竹醋液對深部真菌的抑制果與氟康唑和酮康唑相當．氟康唑的成人口服劑量只有 50 mg 并且經(jīng)長(cháng)期服用后，會(huì )產(chǎn)生一定的耐藥性及其它毒副作用 ．而竹醋液是天然活性藥物，毒副作用遠小于氟康唑與酮康唑，作為內服抗真菌藥物．可以增大用藥劑量．因此，竹醋液作為一種天然抗真菌藥物，具有很大的發(fā)展前景．

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