菌體抗原“缺失”的宋內氏志賀菌研究

【摘要】  　　目的：研究O抗原“缺失”的宋內氏志賀菌其它生物學(xué)性狀的變化情況。方法：檢測試驗菌株的生化特性和對抗生素的敏感性，以及用多種批號的診斷血清進(jìn)行凝集試驗。結果：具有典型的宋內氏志賀菌的生化特性；與對照菌相比，有較高抗生素耐藥性，對復方新諾明等多種抗生素耐藥。與效期內的多批宋內氏志賀菌診斷血清不能產(chǎn)生凝集反應，而對照菌凝集良好。結論：該株宋內氏志賀菌的O抗原表達減弱，同時(shí)藥敏譜也產(chǎn)生明顯的改變。

【關(guān)鍵詞】  宋內氏志賀菌 O抗原 變異

　　[Abstract]   Objective： To study the other properties of Shigella sonnei  with “no” O antigen. Methods: The biochemistry properties and the sensitivity to antibiotics of studied bacillus were tested, and the O antigen of studied bacillus was tested with slider agglutination test. Results： The strain of studied Shigella sonnei had the representative biochemical properties of Shigella sonnei. Contrasting with the control strain of Shigella sonnei, the test strain could be higher antibiotics rate, and it could not be agglutinated by several anti-sera to Shigella sonnei, which were in the period of validity, but the control strain could be well agglutinated. Conclusion： The O antigen of the strain of the studied Shigella sonnei was distinctly reduced, and the effectual spectrum of antibiotics had been changed simultaneously.

　　[Keywords]   Shigella sonnei； O Antigen； Variation

　　變異是細菌生長(cháng)繁殖過(guò)程中一個(gè)普遍現象，宋內氏志賀菌只有一個(gè)血清型，抗原組成單一，但無(wú)論在自然狀況還是在實(shí)驗條件下，均可自發(fā)地發(fā)生相的變異[1]，但是尚沒(méi)有發(fā)現菌體抗原“缺失”的變異現象。2007年3月，我們在鹽城市鹽都區一名典型菌痢患者的糞便中檢出1株宋內氏志賀菌，由于菌體抗原“缺失”,給菌型的鑒定造成了很大困難�，F將有關(guān)情況報告如下。

　　1 　　材料與方法

　　腸道致病分離培養基：SS瓊脂、Mac瓊脂、半固體培養基、克氏雙糖鐵與三糖鐵瓊脂斜面培養基；志賀菌屬診斷血清：蘭州生物制品研究所和成都生物制品研究所生產(chǎn)的多批號診斷；API細菌生化鑒定系統；對照菌株：采用分離自我市當地的流行菌株的代表菌：宋內氏志賀菌（Ⅰ相）；試驗菌株及其分離培養方法：分離自一名臨床癥狀典型菌痢患者的糞便中�；颊呒S便直接接種SS 瓊脂或Mac瓊脂，37 ℃培養24小時(shí)的菌落。挑取這種可疑的單個(gè)菌落接種克氏三糖鐵瓊脂斜面培養基。37 ℃培養24小時(shí)，成典型的志賀菌屬樣生化反應。然后將純培養物接種API20E細菌生化試驗條，進(jìn)行生化特征鑒定；玻片凝集試驗：根據生化試驗結果，用志賀菌屬宋內氏菌診斷血清進(jìn)行玻片凝集試驗；傳代試驗：將試驗菌株用克氏雙糖鐵瓊脂斜面連續傳代，每傳一代后都用志賀菌診斷血清進(jìn)行凝集試驗。原始菌種用半固體瓊脂培養基保存，同時(shí)觀(guān)察其動(dòng)力；藥敏試驗：法國生物梅里埃Vitek32細菌鑒定與藥敏系統。

　2　  結      果

　　本次研究的菌株，經(jīng)鑒定為Ⅱ相宋內氏志賀菌，氧化酶陰性，硝酸鹽還原陽(yáng)性，無(wú)動(dòng)力，發(fā)酵葡萄糖不產(chǎn)氣，具有典型的宋內氏志賀菌的生化反應性（表1略），但與效期內的各批號宋內氏志賀菌診斷血清（包括四種多價(jià)血清）都不能凝集，而對照菌株與這些診斷血清能夠很好地凝集。用已經(jīng)超過(guò)效期、保存良好的多批次宋內氏志賀菌診斷血清（包括4種多價(jià)血清）進(jìn)行凝集試驗，大多數都能產(chǎn)生很好的凝集現象（表2略）。進(jìn)一步研究發(fā)現，與對照菌株相比較，試驗菌株有較高抗生素耐藥性，對復方新諾明等多種抗生素耐藥（表3略）。

　　3　  討      論

　　本文分離鑒定出的宋內氏志賀菌，其生化特征典型、菌體抗原表達減少的變異菌，由于菌體抗原量少，而在效期內的診斷血清，其效價(jià)較高，兩者的比例不適當，容易出現前滯現象[2]，因而，在玻片凝集試驗時(shí)不能出現肉眼可觀(guān)察的凝集現象。而過(guò)了有效期較長(cháng)時(shí)間的診斷血清，由于其抗體效價(jià)下降很多，與細菌表達的菌體抗原比例相配，因而，試驗時(shí)就可出現肉眼可觀(guān)察的凝集現象。宋內氏志賀菌的這種變異現象是很少見(jiàn)的，在有關(guān)文獻上尚無(wú)記錄。

　　在日常工作中，一般用效期內診斷血清進(jìn)行凝集試驗，不會(huì )用過(guò)期很久的血清來(lái)試驗。如果樣本不是來(lái)自一個(gè)癥狀典型的患者，而又沒(méi)有條件進(jìn)行API試驗等時(shí)，像這樣的菌株往往就漏診，給病原菌的分離鑒定帶來(lái)了很大困難。同時(shí)，又由于變異后伴隨對抗生素敏感譜的改變，給臨床治療帶來(lái)麻煩。通過(guò)這個(gè)菌株的分離鑒定，進(jìn)一步揭示了細菌系統生化試驗的重要性，也就是說(shuō)，在雙/三糖鐵瓊脂斜面上呈典型反應，且菌苔也非常典型時(shí)，一定要進(jìn)一步做系統生化試驗，防止漏診。

【參考文獻】
  [1] 葉應嫵主編. 全國臨床檢驗操作規程[M]. 第3版. 北京：中華人民共和國衛生部醫政司，2006：813-814.

[2] 陳慰峰主編. 醫學(xué)免疫學(xué)[M].第4版.北京：人民衛生出版社，2004：242.

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