奈替米星的體內抗生素后效應

　　抗生素后效應(PAE)是指抗菌藥物引起細菌的非致死性損傷或藥物與 細菌靶位持續結合 ，當藥物消失后細菌仍受到藥物持續抑制的現象。但因體內影響因素很多，PAE不是一個(gè)恒 量，正確估算人體內PAE有利于臨床優(yōu)化給藥方案。奈替米星屬氨基糖苷類(lèi)抗生素,對金黃色 葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌等存在明顯的體外PAE，其腎耳毒性明顯低于其它氨基糖 苷類(lèi)抗生素。為進(jìn)一步探討人體奈替米星的合理用藥方案，本實(shí)驗測定了6例下呼吸道感染 患者靜滴奈替米星后的血藥濃度并估算了其對痰中分離細菌的體內PAE。

1　材料和方法                                  

1.1　臨床資料　全部為下呼吸道感染患者，胸片均有實(shí)性浸潤陰影，其中男5例，女1例；年齡25～78歲。治療前病人無(wú)腎、耳病史，聽(tīng)力良好，無(wú)眩暈癥狀；并收 集痰標本進(jìn)行細菌鑒定。
1.2　給藥方案　奈替米星(netilmycin, NTL,由Schering-Plough公司提供)按6 m g^．kg^-1溶于5％葡萄糖注射液100 ml中，30 min滴完。在第一天用藥畢即刻，0.5 ，1，2，4，6，12，24 h，分別從對側肘靜脈取血2 ml，離心收集血清-70℃冷凍待測。實(shí)驗 后繼續治療,全療程用7～14 d，平均10 d。TDX熒光偏振免疫分析儀(美國雅培公司)檢測血 中奈替米星濃度并計算不同時(shí)間段的AUC。
1.3　PAE的測定
1.3.1　受試菌　標準質(zhì)控菌:金黃色葡萄球菌(ATCC2 5923)，大腸埃希氏菌(ATCC 25922)，綠膿假單胞菌(ATCC 27853)。臨床分離菌:綠膿假單胞菌2株，表皮葡萄球菌、肺炎克雷白氏菌、糞腸球菌和大腸埃希氏菌各1株。將受試菌過(guò)夜培養，以M-H肉湯稀釋成2×10 ⁶cfu.ml^-1菌懸液。
1.3.2　實(shí)驗器材和培養基　AVANTAGE微生物分析儀(美國ABBOT公司)；96孔微量平板；Mueller-Hinton(M-H)肉湯。
1.4　實(shí)驗方法
1.4.1　測定MIC　采用標準微量平板法^［1］。
1.4.2　測定體內PAE　采用光密度法測定。將各患者給藥后即刻,0.5,6,1 2 h血清分別與菌懸液混合1 h，以M-H肉湯進(jìn)行1∶400稀釋?zhuān)��?SPAN lang=EN-US>AVANTAGE分析儀描記細菌恢復生長(cháng)的時(shí)間-光密度曲線(xiàn)。以實(shí)驗組與對照組細菌恢復對數生長(cháng)期透光度值下降5%所需時(shí)間差定為PAE，用公式PAE=T-C計算，式中T、C分別為實(shí)驗組和對照組透光 度下降5%所需時(shí)間。
1.4.3　計算AUC與PAE回歸方程和相關(guān)系數　各時(shí)間段的AUC按梯形面積法 計算 即:以各取血點(diǎn)的血藥濃度與反應時(shí)間段(h)的乘積,將與AUC(X)對相應PAE(Y) 回歸得回歸方程和相關(guān)系數(見(jiàn)表1)。

表 1　靜滴奈替米星后AUC與標準質(zhì)控菌和
臨床分離菌PAE相關(guān)性及12 h累加PAE的估算

1.4.4　體內累加PAE的估算　將各時(shí)間段AUC值代入回歸方程求得PAE ^{［2 ］}，將各時(shí)間段的PAE之和作為體內累加PAE的結果。

2　結果

2.1　奈替米星血藥濃度測定　見(jiàn)表2。

表 2　6例患者滴注奈替米星(6 mg^．kg^-1)后的血藥濃度(μg^．m l^-1,x±s) 

2.2　奈替米星各時(shí)間段的AUC和平均AUC(μg^．h^．ml^-1) 　見(jiàn)表3。

表 3　6例患者靜滴奈替米星后各時(shí)間段AUC(μg^．h^．ml^-1) 

2.3　靜滴奈替米星對各受試菌的MIC和各時(shí)段的PAE(h)　見(jiàn)表4。

表 4　靜滴奈替米星對各受試菌各時(shí)段PAE(h) 

2.4　靜滴奈替米星后AUC與標準質(zhì)檢菌和臨床分離菌PAE相關(guān)性及1 2 h累加PAE的估算　見(jiàn)表4。

3　討論

　　氨基糖苷類(lèi)抗生素每日1次給藥已逐步取代了傳統的每日多次給藥方案，其主要理論依 據為抗生素后效應(PAE)。隨著(zhù)人們對PAE的認識，改變了傳統抗生素應用的概念。通常認為 對于不具有明顯PAE的藥物，最適給藥間隔為血藥濃度超過(guò)MIC的時(shí)間，而具有明顯PAE的藥 物，最適給藥間隔為血藥濃度超過(guò)MIC的時(shí)間加上PAE的時(shí)間^［3］。由于人體復雜的 病理生理 狀態(tài)、免疫功能狀態(tài)和藥物動(dòng)力學(xué)的因素，體外所測的PAE尚不能精確反映人體內PAE，為此 ，我們進(jìn)一步探討奈替米星藥動(dòng)學(xué)參數與PAE的關(guān)系，為臨床合理用藥提供了一種新的依據 。
　　本結果表明，奈替米星在0～12 h內對絕大多數標準質(zhì)控菌和臨床分離菌產(chǎn)生不同程度的 PAE，對標準質(zhì)控菌的PAE普遍長(cháng)于臨床分離菌，這與受試菌對抗菌藥物的敏感程度有關(guān)。通常耐藥菌的PAE值明顯低于敏感菌株^［4］，本文中分離的糞腸球菌MIC＞64 μg^．ml -1，為高度耐藥菌，所測各時(shí)段PAE值僅0.4～1.7 h，明顯低于標準質(zhì)控菌和其他臨床 分離菌；臨床分離菌大腸桿菌PAE值很小，甚至幾乎沒(méi)有，也與該菌株為中度耐藥有關(guān)。除2 株耐藥菌之外，對敏感菌體內12 h累加PAE最大值達36.86 h。體內PAE長(cháng)于體外PAE的原因是 由于機體免疫系統與抗生素對細菌共同作用以及藥物在體內長(cháng)時(shí)間持續作用的結果^{［5 ］}。
　　氨基糖苷類(lèi)抗生素PAE呈濃度依賴(lài)性^［6］，該類(lèi)藥在峰值濃度或藥-時(shí)曲線(xiàn)下面積( AUC)最大時(shí)，抗菌活性最強，PAE值最長(cháng)^［7］。本實(shí)驗表明，AUC與PAE相關(guān)性 很好， 根據實(shí)測各時(shí)段的AUC值來(lái)估算體內動(dòng)態(tài)PAE及計算體內累加PAE方法可行，用AUC估算體 內PA E是以藥動(dòng)學(xué)對細菌的敏感程度為基礎， 不恒定的藥物濃度是影響PAE的重要因素，同時(shí)還 應注意血漿蛋白結合率、分布容積、pH和氧分壓的影響^［8］。
　　由于體內PAE的影響因素較多，如何結合藥動(dòng)學(xué)參數、機體病理生理狀態(tài)、免疫功能情況等 研究抗生素體內PAE及設計更為合理的給藥模式尚需進(jìn)一步探討。

參考文獻：
［1］　Sahm DF,WashingtonⅡ JA.An tibacerial susceptibility test:Dilutron methods［J］.Manual of clinical Microbio logy.5th ed,1991,1105
［2］　張銘窮，郭文勇，黃純.初探抗菌藥物后效應的估算方法［J］.國外醫藥抗生素分 冊，1998，19(3)：228
［3］　Zhanel GG,Craig WA.Postantibiotic Effects［J］.Clin Pharm,1994,27(5):38 0
［4］　劉皈陽(yáng),王睿.氨基糖甙類(lèi)藥物的抗生素后效應［J］.中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)雜志，1996，1(2)：152
［5］　McDonald PJ,Weherall BL,Pruul h.Postantibiotic leucocyte enhancement: i ncreased susceptibility of bacteria pretereated with antibiotics to activity of leukocytes［J］.Rev Infect Dis,1981,3:38
［6］　王岳松，王睿，劉皈陽(yáng)等.氨基糖甙類(lèi)抗生素的體外抗生素后效應研究［J］.中 國臨床藥理學(xué)治療學(xué)雜志，1996，1(2)：85
［7］　Preston SL,Briceland LL.Single daily dosing of aminoglycosides［J］.pha rmacotherapy,1995,15(3):297
［8］　Craig WA,Ebert JG.Killing and regrowth of bacteria in vitro:a Review［J ］.Scand J Infect Dis Suppl,1990,74:63

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