半固體制劑微生物限度檢查法的體會(huì )

按上海市衛生局規定，醫院自制制劑均應進(jìn)行微生物限度檢查。我們對本院的自制制劑逐一 進(jìn)行檢查，在實(shí)驗中，溶液劑較易進(jìn)行，而半固體制劑，特別是油包水型基質(zhì)的乳膏及軟膏 ，操作比較繁瑣，結果不易判斷。經(jīng)過(guò)反復多次實(shí)驗，積累了一些簡(jiǎn)便易行的方法�，F介紹 如下，供同行們參考。 
1　取樣
　　按中國藥典規定，抽樣量為檢驗量的3倍，因自制制劑周轉快，若不及時(shí)留樣，檢品就有 可能漏檢。檢驗量為兩個(gè)最小包裝。而有時(shí)，一個(gè)制劑有兩個(gè)包裝規格，取樣時(shí)兩個(gè)包裝規 格都應各取兩個(gè)檢品，以避免容器的污染造成檢品不合格。
2　培養基及其制備方法
　　采用的培養基，均為干燥粉末型。臨用時(shí)按標簽配制即得。其中，營(yíng)養瓊脂培養基作為檢 查細菌總數用。培養基為本白色，而半固體制劑的供試品不易分散均勻，在注入平皿培養后 ，易產(chǎn)生白色顆粒霧狀物，無(wú)法與菌落區別，因此我們采用0.001% TTC(2，3，5氯化三苯四氮唑)肉湯瓊脂培養基，使菌落著(zhù)色，便于識別計數。配制方法參照《藥品衛生檢驗方 法》。
3　供試液的制備
3.1　水包油型乳膏劑　采用常規法分散。配制樣品稀釋液50ml(含1%聚 山梨酯80的生理鹽水)在試管中，115°C 30min滅菌。當檢驗時(shí)，在無(wú)菌條件下直接將5g樣 品稱(chēng)入試管中，充分攪拌或振搖，制成1∶10的供試液。
3.2　軟膏及油包水型乳膏劑　采用均質(zhì)器分散。均質(zhì)器為SJ-Ⅱ型食品均質(zhì)器，由主機、均質(zhì)瓶、均質(zhì)瓶蓋、不銹鋼刀軸 等組成。配制樣品稀釋液150ml(90ml生理鹽水∶45ml聚山梨酯80∶15ml液體石蠟)。一起置 均質(zhì)瓶中，115°C 30min滅菌。操作時(shí)，在無(wú)菌條件下將樣品15g稱(chēng)入均質(zhì)瓶中，裝上已滅 菌的不銹鋼刀軸，旋緊瓶蓋，置均質(zhì)器上，轉速3000r.min-1，旋轉1min，分散乳化 完全，即得1∶10的供試品。
4　檢查
4.1　細菌、霉菌與酵母菌　計數方法采用平皿菌落法。一般新制劑采用連續三級10倍稀釋法，稀釋成1∶10，1∶100，1∶1000的供試品。而在檢查原料、生產(chǎn)條件都相對固定的自制制劑時(shí)，我們通常 只稀釋1～2個(gè)1 0倍稀釋度，使平均菌落數在30～300個(gè)之間。有時(shí)1∶10的稀釋度菌落數就低于30個(gè)，若再稀 釋供試品就沒(méi)有意義了。
4.2　控制菌檢查　按照中國藥典1995年版操作，一般進(jìn)行增菌培養和分離培養。若未見(jiàn)可疑菌落，即可判斷 結果，否則將繼續進(jìn)行檢查。
5　小結
5.1　半固體制劑供試液的配制，中國藥典采用油相和水相分別滅菌， 檢查時(shí)再合并使用。我們在實(shí)驗中，將水包油型乳膏劑的稀釋液配在試管中，一是體積小， 便于在手提式高壓鍋中滅菌；二是因為水包油型制劑，與水親和力大，可以不用均質(zhì)器就較易分散均勻，取樣方便。
5.2　將油包水型乳膏劑和軟膏的稀釋液(生理鹽水∶聚山梨酯80∶液體石蠟)一起配制在均質(zhì)瓶中 滅菌。滅菌后趁熱充分振搖，使兩相混合均勻。使用前，保溫在45°C左右。經(jīng)多次實(shí)驗證 明，這樣處理的稀釋液完全可以達到無(wú)菌的效果，且操作方便，步驟簡(jiǎn)單，減少了污染機會(huì ) 。
5.3　在半固體制劑微生物限度檢查中，我們對含有抗生素或抑菌成分的樣品，目前還無(wú)較好的方 法。中國藥典采用稀釋法、離心沉淀集菌法、薄膜過(guò)濾法等，對溶液劑制劑較易進(jìn)行，而軟 膏粘性太大，操作費時(shí)費力，極易污染檢品。今后應尋找更實(shí)用可行的檢驗方法。

 

上一篇：免疫血清對旋毛蟲(chóng)感染性幼蟲(chóng)侵入腸上皮細胞及其發(fā)育的影響

下一篇：瘤胃內分解纖維素細菌的分離與鑒定