糞鏈球菌的檢驗

樣品制備 取25g或25mL樣品，放入225mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，制成1：10樣品稀釋液。根據樣品的污染程度，制成適當的10倍遞增稀釋液。

　　a.多管法：

　　用適當的稀釋液接種一套疊氮化鈉葡萄糖肉湯管。接種量為1mL或以下的，使用10mL單料管；接種量為10mL，使用10mL雙料管。35℃培養24-48h，并檢查記錄各管的混濁情況。用接種環(huán)將渾濁管中的培養物劃線(xiàn)于PSE平板上，倒置平板于36℃培養24h。平板上出現的帶棕色環(huán)的黑色菌落，確證為糞鏈球菌。根據接種的樣品量和確證為是糞鏈球菌的管數，查MPN表，報告每克樣品中的糞鏈球菌MPN值。

　　b.濾膜法：

　　傾注融化的4-5mL的KF瓊脂于平板上，若平板表面有氣泡，可用火焰灼除。根據樣品的污染程度，使用樣液的量為100，10，1.0，0.1或0.01mL。使用滅菌濾膜過(guò)濾樣液，以能在濾膜上生長(cháng)出20-100個(gè)菌落為宜。將濾過(guò)樣液的濾膜緊貼在KF瓊脂培養基表面上，避免出現氣泡。倒置平板于36℃培養48h。糞鏈球菌在KF平板濾膜上形成暗紅色至粉紅色菌落。將典型菌落接種于腦心浸液斜面上，36℃培養48h。用其培養物做過(guò)氧化氫試驗，過(guò)氧化氫濃度為3%，陽(yáng)性反應者為非糞鏈球菌群細菌。將陰性反應者接種于腦心浸液肉湯，置45.5℃培養48h；同樣方式接種一管膽鹽肉湯，置36℃培養3天。在上述兩種情況下生長(cháng)者為糞鏈球菌。選擇生長(cháng)20-100個(gè)菌落的濾膜，根據所使用的樣品量，計算出樣品每克（毫升）中的糞鏈球菌數。

　　c.平板計數法：

　　 取1mL適當稀釋液加入培養皿內，傾入12-15mL的KF或PSE培養基，轉動(dòng)平板充分混合。凝固后置36℃培養，KF平板培養48h，PSE平板培養24h。糞鏈球菌在KF平板上形成暗紅色至粉紅色菌落，邊緣整齊，瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀；在PSE平板上形成帶棕色環(huán)的棕黑色菌落。選擇有30-300個(gè)菌落的平板進(jìn)行記數。按糞鏈球菌數/g(mL)報告結果。

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