平板菌落計數法
錄入時(shí)間:2010-11-10 10:00:05
來(lái)源：青島海博
菌落形成單位(colony forming unit，cfu)是指在活菌培養計數時(shí)．由單個(gè)菌體或聚集成團的多個(gè)菌體在固體培養基上生長(cháng)繁殖所形成的集落．稱(chēng)為菌落形成單位，以其表達活菌的數量。菌落形成單位的計量方式與一般的計數方式不同，一般直接在顯微鏡下計算細菌數量會(huì )將活與死的細菌全部算入，但是CFU只計算活的細菌。因此，可將菌液倍比稀釋成不同濃度，每種濃度吸1毫升加到融化溫度達50度的15毫升營(yíng)養瓊脂培養中混勻使其凝固，置35度孵育24小時(shí)，取出進(jìn)行菌落計數，每個(gè)平板菌落數X稀釋倍數得到每毫升中細菌數量，取平均值即可得到較準確的CFU/ml，一般對平板進(jìn)行菌落計數，選擇菌落數在30到300個(gè)平板為準。個(gè)單位比“菌落數”更準確反映問(wèn)題的實(shí)質(zhì)。從理論上認識，一個(gè)活細菌可以在條件合適的固體表面上形成一個(gè)菌落，但實(shí)際上遠非如此。例如，在環(huán)境因素作用下，每一個(gè)細菌的生活能力各不相同，會(huì )影響其在該條件下形成菌落的能力；又如，吸附于微小顆粒上的2個(gè)以上菌體或粘連在一起的菌團可能共同形成一個(gè)菌落等等。致使形成的菌落數遠遠低于實(shí)際的活菌數。因此目前可用菌落形成單位代替以往常用的“菌落數”單位。
平板菌落計數法是將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細胞，取一定量的稀釋樣液涂布到平板上，經(jīng)過(guò)培養，由每個(gè)單細胞生長(cháng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落，即一個(gè)單菌落應代表原樣品中的一個(gè)單細胞。統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。但是，由于待測樣品往往不宜完全分散成單個(gè)細胞，所以，長(cháng)成的一個(gè)單菌落也可能來(lái)自樣品中的2～3或更多個(gè)細胞。因此平板菌落計數的結果往往偏低。為了清楚地闡述平板菌落計數的結果，現在已傾向使用菌落形成單位（cfu ：colony-forming units），而不以絕對菌落數來(lái)表示樣品的活菌含量。
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