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【 摘 要】 ：目的：用抗生素微生物檢定法測定藥品含量，檢測效價(jià)結果在合格與不合格邊緣的抗生素藥品 ( 片劑、顆粒劑等) ，用不同廠(chǎng)家的培養基進(jìn)行多次試驗，根據檢測結果進(jìn)行比較，得到比較準確的測定數據。方法：采用抗生素微生物檢定法項下的管碟法進(jìn)行試驗。結果：不同培養基對抗生素藥品效價(jià)的測定有較大影響。結論：對檢測效價(jià)處于合格與不合格邊緣的抗生素藥品，用不同廠(chǎng)家或者不同批號的培養基進(jìn)行再次試驗，可得到更為準確的測定數據。
【 關(guān)鍵詞】 ：抗生素；效價(jià)測定；培養基
【中圖分類(lèi)號】R927.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】1007-8517（2010）02-0068-01
1 標準品 、實(shí)驗用 菌液的制備
標準品：慶大霉素，批號 130326—200314 ，規格638u／m g ，中國藥品生物制品檢定所。
實(shí)驗用菌液的制備：實(shí)驗菌，短小芽孢桿菌 ( Bacillus pumilus，63202號)芽孢懸液。取短小芽孢桿菌 ( 63202 ) 工作用菌種普通瓊脂斜面培養物，加滅菌生理鹽水 3—4毫升將菌苔洗下，制成懸液，用吸管將此懸液接種至盛有培養基I號 ( pH7．8—8．0 )大試管斜面內，在37℃培養7天。 取菌苔涂片，革蘭氏染色鏡檢，應有芽孢85％以上，用滅菌水將芽孢洗下，制成芽孢懸液，合并至滅菌大試管內，在70℃水浴加熱30分鐘，將芽孢懸液移至滅菌離心管內，rmpl500，離心 2 0分鐘。同法離心沉淀，共操作3次。將菌懸液移至滅菌試管內，再置 7 O ℃水浴加熱 3 0分鐘。4—8℃保存，可使用6—1 2個(gè)月。
2 培養基、供試樣品
|
培養基 |
供試樣品 |
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|
名稱(chēng) |
批號 |
生產(chǎn)廠(chǎng)家 |
樣品名稱(chēng) |
規格 |
批號 |
生產(chǎn)廠(chǎng)家 |
|
抗生素檢定培養基1（PH7.8-8.0） |
080414 |
北極三藥科技開(kāi)發(fā)公司 |
硫酸慶大霉素片 |
4萬(wàn)單位/片 |
20080103 |
廣東臺城制藥有限公司 |
|
硫酸慶大霉素片 |
4萬(wàn)單位/片 |
20080601 |
大同云崗制藥有限公司 |
|||
|
抗生素檢定培養基1（PH7.8-8.0） |
070824 |
中國進(jìn)出口商品檢驗技術(shù)研究所 |
硫酸慶大霉素顆粒 |
10mg/袋 |
080302 |
河北華威得菲爾藥業(yè)有限公司 |
|
硫酸慶大霉素顆粒 |
10mg/袋 |
0801001 |
華北制藥集團制劑有限公司 |
|||
3 實(shí)驗結果
|
培養基測定結果樣品名稱(chēng) |
硫酸慶大霉素片（廣東臺城制藥有限公司） |
硫酸慶大霉素片（大同云崗制藥有限公司） |
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|
試品間 |
回歸 |
偏離平行 |
測定效價(jià) |
平均可信限率 |
試品間 |
回歸 |
偏離平行 |
測定效價(jià) |
平均可信限率 |
|
|
北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
108.7% |
5.2% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
98.7% |
3.8% |
|
中國進(jìn)出口商品檢驗技術(shù)研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
102.2% |
5.0% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
91.4% |
4.5% |
|
北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司 |
P<0.01 |
P<0.01 |
p>0.05 |
91.1% |
4.3% |
P<0.01 P>0.05 P>0.05 |
P<0.01 P<0.01 P<0.01 |
P>0.05 P>0.05 P>0.05 |
86.8%85.7%83.0% |
4.2% 5.6% 4.6% |
|
中國進(jìn)出口商品檢驗技術(shù)研究所 |
p>0.05 |
P<0.01 |
p>0.05 |
99.2% |
4.7% |
P>0.05 |
P<0.01 |
P>0.05 |
101.7% |
5.1% |
4 討論
從以上四個(gè)樣品的檢測結果可以看出，使用相同培養基對同一個(gè)樣品進(jìn)行多次測定時(shí)，測得結果之差大約為 1 — 5 ％，而使用不同廠(chǎng)家的培養基，測得結果之差 >5 ％。培 養基的性質(zhì)不同對抑菌圈清晰度及實(shí)驗結果的精確度影響較大。在抗生素微生物檢定法的整個(gè)試驗中，從標準品、供試品的取樣到培養基、緩沖液配制及實(shí)驗菌種的制備各個(gè)環(huán)節均不容忽視。在日常工作中我們常常會(huì )碰到抑菌圈破裂、呈卵圓形、橢圓形甚至無(wú)圈等不正常情況。通過(guò)從多方面分析原因，有時(shí)重新選擇另一個(gè)批號或者廠(chǎng)家的培養基就能得到滿(mǎn)意的實(shí)驗結果。另外，配制培養基及緩沖液的純化水也很重要，因為各地水質(zhì)酸度不一，按照藥典規定配制的培養基及緩沖液的 p H值也不相同，這就需要我們對配制好的培養基及緩沖液的 p H值進(jìn)行校對。在氨基糖苷類(lèi)抗生素的檢測中，培養基及緩沖液的 p H值對抑菌圈的形成影響很大，酸度越高得到的抑菌圈就越小。所以對檢測效價(jià)在合格與不合格邊緣的抗生素藥品，應再換另一個(gè)廠(chǎng)家或批號的培養基進(jìn)行再次試驗，根據兩次結果進(jìn)行 比較 ，從而得到比較準確的測定數據。
參考文獻
[ 1 ]周家藥典委員會(huì )．抗生素微生物檢定法 《 中國藥典》2 0 0 5年版二部
附錄Ⅺ A：79—84
[ 2 ]張治錟．抗生素藥品效價(jià)的微生物檢定一管碟法 《 抗生素藥品檢驗》
1987，12—21，59—65．
[ 3 ]桑國衛，等．抗生素微生物檢定法 《中國藥品檢驗標準操作規范》
2000，376—377．
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