卵黃高鹽培養基的改進(jìn)
余彥玲 (湖北省藥品檢驗所. 湖北 武漢 430064 )
在長(cháng)期實(shí)踐中,我們發(fā)現在金黃色葡萄球菌懸液計數時(shí),卵黃高鹽平板中的金黃色葡萄球菌數較普通瓊脂平板明顯減少,且生長(cháng)慢,需24 h以上才能看見(jiàn)很少的菌落,有時(shí)甚至不生長(cháng)?紤]到氯化鈉濃度對金黃色葡萄球菌的影響,我們對該培養基的氯化鈉濃度進(jìn)行了比較測試,以期尋求金黃色葡萄球菌生長(cháng)的最適氯化鈉濃度。
1 材料 與方法
1.1菌種 金黃色葡萄球菌:CMCC(B) 26003,ATCC6358: 大腸桿菌CMCC(B) 44102;枯草芽胞桿菌CMCC (B) 63501。
1.2 培養基 卵黃高鹽培養基:按中國藥典( 2000年版)配方,僅改變其中氯化鈉用量: A0.5%; B 1.5 %; C 3.0%;D 5.3%。普通瓊脂培養基:按中國藥典( 2000版) 配方。
1.3 方法
2 結果
普通瓊脂平板上的金黃色葡萄球菌菌落數為123個(gè), 卵黃高鹽平板的菌落數為54個(gè):不同濃度氯化鈉對雜菌的抑制作用及對金黃色葡萄球菌的影響, 見(jiàn)表1,表2 :
表1 卵黃高鹽平板雜菌計數比較
菌種 |
不同濃度氯化鈉的菌落數(個(gè)) | |||
|
A |
B |
C |
D |
63501 |
30 |
31 |
32 |
30 |
44102 |
79 |
89 |
87 |
88 |
表2 不同濃度氯化鈉對金黃色葡萄球菌的影響
菌種 |
不同濃度氯化鈉的菌落數(個(gè)) | |||
|
A |
B |
C |
D |
26603 |
167 |
180 |
139 |
125 |
6358 |
90 |
114 |
91 |
87 |
3 討論
金黃色葡萄球菌能耐高鹽.而其他菌無(wú)此特性.借此以高鹽培養基來(lái)分離金黃色葡萄球菌是許多分離培養基設計依據。卵黃高鹽中的氯化鈉是選擇性抑菌劑,以0.5%,1.5%,3.1 %,5.3%各濃度測試,加入大腸桿菌與枯草芽胞桿菌作菌數比較,結果平板上生長(cháng)的菌數未見(jiàn)明顯差異,均不能有效地抑制兩種菌的生長(cháng)。實(shí)驗結果表明, 含鹽為0.5%,l.5%,3.0 %的培養基優(yōu)于5.3%( 中國藥典配方) 。含氯化鈉1.5%的培養基從金黃色葡萄球菌的色素, 大小乳濁來(lái)觀(guān)察優(yōu)于其他3種氯化鈉濃度的培養基;含氯化鈉3%的次之;含氯化鈉0.5%的培養基,生長(cháng)的金黃色葡萄球菌色素淺,乳濁周不明顯;5.3%的氯化鈉培養基明顯地對金黃色葡萄球菌呈現抑制作用,菌落小,生長(cháng)慢,24h后才能觀(guān)察結果(其他菌均在16h左右可觀(guān)察結果)乳濁圏不明顯.不易計數:提示金黃色葡萄球菌分離培養基需含一定濃度氯化鈉,不宜過(guò)低,也不宜過(guò)高,以1.5%左右為好。