用玻璃紙瓊脂平板透析培養法觀(guān)察放線(xiàn)菌形態(tài)

（一）實(shí)驗目的：用放線(xiàn)菌的玻璃紙培養物觀(guān)察放線(xiàn)菌的個(gè)體形態(tài)

（二）實(shí)驗原理：

放線(xiàn)菌自然生長(cháng)的個(gè)體形態(tài)的觀(guān)察現多用玻璃紙瓊脂透析培養法。

玻璃紙具有半透膜特性，其透光性與載玻片基本相同，采用玻璃紙瓊脂平板透析培養，能使放線(xiàn)菌生長(cháng)在玻璃紙上，然后將長(cháng)菌的玻璃紙剪取小片，貼放在載玻片上，用顯微鏡鏡檢可見(jiàn)到放線(xiàn)菌自然生長(cháng)的個(gè)體形態(tài)。

采用插片培養法也能觀(guān)察放線(xiàn)菌的個(gè)體形態(tài)。

（三）實(shí)驗器材：

1、活材料：培養5-7天的紫色直絲鏈霉菌（Streptomyces violaceorectus）的斜面菌種、吸水鏈霉菌5102（Streptomyces hygroscopicus var.Yingchengensis（5102））斜面菌種。

2、培養基：高氏一號瓊脂培養基

器材：無(wú)菌平皿、玻璃紙、 9ml無(wú)菌水若干支、酒精燈、火柴、接種環(huán)、鑷子、玻璃刮鏟、1ml無(wú)菌吸管、剪刀、載玻片、顯微鏡。

（四）實(shí)驗方法：

（1）將玻璃紙剪成培養皿大小，用舊報紙隔層疊好后滅菌。

（2）將放線(xiàn)菌斜面菌種制成10-3的孢子懸液。

（3）將高氏一號瓊脂培養基熔化后在火焰旁倒入無(wú)菌培養皿內，每皿倒15ml左右，待培養基凝固后，在無(wú)菌操作下用鑷子將無(wú)菌玻璃紙履蓋在瓊脂平板上即制成玻璃紙瓊脂平板培養基。

（4）分別用1ml無(wú)菌吸管取0.2ml吸水鏈霉菌（5102）孢子懸液，紫色直絲鏈霉菌孢子懸液分別滴加在兩個(gè)玻璃紙瓊脂平板培養基上，并用無(wú)菌玻璃刮鏟涂抹均勻。

（5）將接種的玻璃紙瓊脂平板置28-30℃下培養。

（6）在培養至3天，5天，7天時(shí)，從溫室中取出平皿。在無(wú)菌環(huán)境下。打開(kāi)培養皿，用無(wú)菌鑷子將玻璃紙與培養基分離，用無(wú)菌剪刀取小片置于載玻片上用顯微鏡觀(guān)察。

附：插片培養法：

放線(xiàn)菌的插片培養是將放線(xiàn)菌菌種制成孢子懸液后（濃度以10^-2-10^-3為好），取0.2ml放在適合放線(xiàn)菌生長(cháng)的平板培養基上，用玻璃刮鏟涂布均勻，然后將滅過(guò)菌的蓋玻片斜插入固體培養基中，置28-32℃下培養，3-5天后取出蓋玻片放在載玻片上鏡檢，可見(jiàn)放線(xiàn)菌的自然生長(cháng)的個(gè)體形態(tài)。

上一篇：SPA的提取

下一篇：平板菌落計數