培養基及無(wú)菌水的制備

錄入時(shí)間:2010-10-29 11:01:04 來(lái)源：生命經(jīng)緯知識庫

一、基本原理

培養基的種類(lèi)很多，不同微生物所需要的培養基不同。培養基制成后的物理狀態(tài)可分為液體、固體、半固體三種類(lèi)型。目前所用培養基均為已配制好的生物試劑和紙片。

二、器材

三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、硅膠塞、電爐

三、培養基的種類(lèi)

營(yíng)養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發(fā)酵培養基、乳糖發(fā)酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基（附加抗菌素）、平板計數瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等

四、方法步驟

1、培養基的制備：

（1）稱(chēng)量：根據培養基的配方，稱(chēng)取適量藥品于搪瓷杯中；

（2）溶解：用量筒量取所需水量，置電爐上加熱，一邊攪拌，至完全溶解，加熱至沸騰，拔掉電源，待冷卻；

（3）分裝：根據不同需要，立即趁熱分裝入三角瓶或試管中，分裝三角瓶以不超過(guò)三角瓶一半為宜，分裝試管一般為管長(cháng)的1/5（需根據試管的大小而定）。液體培養基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養基約分裝10毫升左右。

（4）塞硅膠塞：裝好培養基的試管應塞上硅膠塞，松緊合適，緊貼管壁，不留縫隙，約1/2塞入內，這樣即可過(guò)濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養基水分的蒸發(fā)。

（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎，試管集中于試管簍。

2、無(wú)菌水的制備：

（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中。

（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中�？芍蒙僭S玻璃珠于三角瓶?jì)�，防止暴沸�?/SPAN>

（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）于250ml的三角瓶中，塞上瓶塞用牛皮紙包扎好，高壓滅菌備用。