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    細菌濃度的簡(jiǎn)單確定法:麥氏比濁法



    錄入時(shí)間:2010-10-28 10:19:44 來(lái)源:生命經(jīng)緯

        麥氏比濁管是McFarland發(fā)明的一種用于微生物比濁的不同濁度的標準濁度管。具體的配制方法是根據硫酸和氯化鋇的比例來(lái)定的,有表可查,這樣不同比例生成的硫酸鋇沉淀的濃度不同,且都有定值。


         
    麥氏比濁管的配比如下:

      (McFarland)

    0.5

    1

    2

    3

    4

    5

    0.25%BaCl2ml

    0.2

    0.4

    0.8

    1.2

    1.6

    2.0

    1%H2SO4(ml)

    9.8

    9.6

    9.2

    8.8

    8.4

    8.0

    細菌的近似濃度(×108/ml)

    1

    3

    6

    9

    12

    15

    操作方法:

    1、輕搖標準試管。

    2、無(wú)菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標準管相同直徑(大。┑臒o(wú)菌試管中。

    3、以無(wú)菌操作向被測定試管加入無(wú)菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。

    使用技巧:

    1、直接用眼睛看(需要經(jīng)驗,誤差較大)。

    2、找張白紙,打上平行直線(xiàn),然后看(利用光在不同濃度液體折射不同)。

    注意事項:

    1、如果測定的肉湯培養物不澄清,由培養物的值減去未接種培養基的值來(lái)校正細菌濃度。4號管(肉湯培養物)-1號管(孵育過(guò)的未接種的肉湯管)=3號管(校正讀數)。

    2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標準管的后面讀數即可。

    注:

    1、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋涂布計數。

    2、此濃度是對應的大腸桿菌的濃度,如果是其他細菌,會(huì )有一定的差別,但編者做過(guò)的幾個(gè)菌差別都在一個(gè)數量級之內,適合于普通實(shí)驗。

    3、此種方法測定的準確性不是很高,如果是對細菌數量要求較精確的,請用紫外分光光度計。

     

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