唾液尿素酶檢測法診斷兒童幽門(mén)螺桿菌感染的評價(jià)

摘要   目的評價(jià)唾液尿素酶檢測法(HPS)在診斷兒童幽門(mén)螺桿菌感染中的價(jià)值。

方法 采用"幽門(mén)螺桿菌唾液測試版"(HPS)^[1]，在2008年６月至9月，對浙江大學(xué)醫學(xué)院附屬兒童保健院35例有消化不良癥狀的初診患兒進(jìn)行唾液檢測，其中27例同時(shí)接受13C-UBT試檢；同時(shí)對100例體檢的小學(xué)生進(jìn)行HPS檢測。

結果

35例有消化不良癥狀的患兒HPS陽(yáng)性率為88.57%，其中27例接受13CUBT試驗陽(yáng)性率為25.92%；100名體檢兒童HPS陽(yáng)性率為40%，HPS 陽(yáng)性率兩組比較差異顯著(zhù)(X2=24.57，P<0.01)。

結論 唾液中存在高幽門(mén)螺桿菌檢出現象，說(shuō)明在兒童中幽門(mén)螺桿菌感染非常常見(jiàn)，有消化不良癥狀的兒童幽門(mén)螺桿菌感染尤為嚴重。

關(guān)鏈詞  幽門(mén)螺桿菌 抗原 唾液 HPS

兒童患有幽門(mén)螺桿菌(H.Pylori，簡(jiǎn)稱(chēng)Hp)感染是非常常見(jiàn)的。兒童感染幽門(mén)螺桿菌后主要癥狀是消化不良、發(fā)育與營(yíng)養狀況較差和貧血現象等。我們于2008年6月至9月，在浙江大學(xué)醫學(xué)院附屬兒童保健院，對35例有消化不良癥狀的初診患兒采用"幽門(mén)螺桿菌唾液測試板"(HPS)檢測唾液中兒童中幽門(mén)螺桿菌感染抗原，其中27例用時(shí)進(jìn)行13C尿素呼氣試驗(UBT)；同期在杭州市某鐵路小學(xué)對100名體檢的兒童進(jìn)行HPS檢測�，F將結果報道如下;
1 資料和方法
1.1 研究對象 35例有消化不良癥狀的患兒中，男16例，女19例，年齡7.4(3~13)歲。100例體撿狀兒童中，男52例，女48例，年齡9.2(8~13)歲。
1.2 研究方法
1.2.1 唾液螺桿菌感染抗原HPS檢測法 將唾液吐入塑料杯中；用吸管吸取4滴唾液，滴入取樣杯中；滴加2滴緩沖液于取樣杯中；更換吸管，充分混勻后，吸取3-4滴混合液，滴入唾液板的吸樣窗口6,5-15分鐘觀(guān)察結果，如指示窗口5顯示T線(xiàn)、C線(xiàn)，說(shuō)明螺旋桿菌陽(yáng)性；如指示窗口5只顯示C線(xiàn)而沒(méi)有T線(xiàn)，說(shuō)明螺旋桿菌陰性。注意事項：測定前，患者一小時(shí)內不能進(jìn)行飲食和飲水。

1.2. 2 3C-UBT試驗 按常規方法進(jìn)行。
1.3 統計學(xué)處理 采用X2檢驗，P<0.05為差異有統計學(xué)意義。
 2 結果
35例有消化不良癥狀的患兒HPS陽(yáng)性31例(88.57%)；100名無(wú)癥狀體檢兒童HPS陽(yáng)性率為40%。兩組比較HPS陽(yáng)性率有顯著(zhù)性差異(X2=24.57，P<0.01)。35例有消化不良癥狀的患兒中，27例同時(shí)進(jìn)行13CUBT試驗，其中陽(yáng)性7例(25.92%)，此7例HPS均呈陽(yáng)性(100%)。
 3 討論
來(lái)自美國的報道^[2,3,4,]，對一組平均為53月的嬰幼兒進(jìn)行調查，發(fā)現69.4%血清中幽門(mén)螺桿菌抗體陽(yáng)性。瑞士一學(xué)者對858名小學(xué)生進(jìn)行健康調查，發(fā)現81%的兒童患有幽門(mén)螺桿菌感染。有一批巴西的報導，兒童隨著(zhù)年齡的增長(cháng)螺旋桿菌感染率隨著(zhù)增長(cháng)^[8] 。我們的資料顯示，35例有消化不良癥狀的兒童，HPS檢測陽(yáng)性率高達88.57%；100例無(wú)癥狀體撿兒童，HPS陽(yáng)性率為40%。說(shuō)明在兒童中幽門(mén)螺桿菌感染非常常見(jiàn)，有消化不良癥狀的兒童幽門(mén)螺桿菌感染尤為嚴重。
   兒童幽門(mén)螺桿菌感染通常受家庭人員健康狀況的影響^[6]，父母雙方都感染幽門(mén)螺桿菌，兒童感染的機會(huì )是44%；父母一方感染幽門(mén)螺桿菌，兒童感染的機會(huì )是30%；父母都未感染幽門(mén)螺桿菌，兒童感染的機會(huì )是21%。幽門(mén)螺桿菌在兒童中的傳播可能是被污染的食物感染口腔，再從口腔到胃這一途徑。因此，胃幽門(mén)螺桿菌炎癥的源頭在口腔中，幽門(mén)螺桿菌隨著(zhù)唾液不斷吞入胃內，在胃內定植引起胃幽門(mén)螺桿菌炎癥。倫敦大學(xué)醫學(xué)院查了100名兒童，用胃鏡、RUT、切片組織培養的方法診斷胃幽門(mén)螺桿菌感染。從陽(yáng)性?xún)和�的口腔牙菌斑中�?/SPAN>PCR檢測幽門(mén)螺桿菌，發(fā)現68%胃幽門(mén)螺桿菌陽(yáng)性者，其牙菌斑有幽門(mén)螺桿菌存在，同時(shí)在胃幽門(mén)螺桿菌陰性?xún)和�也�?/SPAN>24%在牙菌斑中找到幽門(mén)螺桿菌。彭惠等^[7]采用PCR,SSCP法檢測138例胃潰瘍和159例十二指腸潰瘍患者的唾液和胃黏膜，幽門(mén)螺桿菌的檢出率分別為71.7%和100%，98%口腔與胃內的幽門(mén)螺桿菌呈現相同的單鏈構象。作者對另一組126例成人慢性胃炎初診患者進(jìn)行HPS檢測，同時(shí)接受14CUBT、RUT或WS銀染檢查，結果顯示HPS的陽(yáng)性率為73.02%，14CUBT、RUT、WS銀染總陽(yáng)性率為53.17。本組有消化不良癥狀的患兒HPS陽(yáng)性率為88.57%，13CUBT陽(yáng)性率為25.92%，13CUBT陽(yáng)性率明顯偏低的原因有待進(jìn)一步探討。但7例13CUBT陽(yáng)性的患兒HPS檢測均呈陽(yáng)性，支持胃幽門(mén)螺桿菌感染者唾液中存在高幽門(mén)螺桿菌檢出現象。

來(lái)自東京的報道,他們對283名日本兒童(平均年齡11.5歲)調查發(fā)現83%的幽門(mén)螺旋桿菌者都有口腔螺旋桿菌的感染，這些患病兒童伴也有貧血現象^[8]。朝鮮一篇報導稱(chēng)，兒童有胃螺旋菌感染者，除了一般營(yíng)養不良之外，還通常有明顯血清鐵含量下降^[9]。有人推測患有螺旋菌感染兒童身高、體重都低于同年齡兒童的真正原因正是血清鐵含量的下降^[10]。臺灣報導，成年人胃癌患者，他們多數是在兒童時(shí)期曾患有螺旋菌感染^[11]。

香港的報道說(shuō)有些兒童的螺旋菌感染是由于接受螺旋菌感染患者的輸血而引起的^[12]。

   目前，唾液幽門(mén)螺桿菌抗原檢測方法有PCR法、ELISA法和作者采用HPS法。PCR法需要10萬(wàn)級凈化纟統和貴重儀器設備,有很高的假陽(yáng)性檢,檢測麻煩, 費用昂貴。C¹³呼氣法的精確性和兒童的呼氣動(dòng)作小有關(guān),兒童做吞服C¹³膠囊之后，在收集氣體時(shí)，兒童沒(méi)有做好充分地呼氣動(dòng)作，這樣也影響到收集標本的數量，這也影響到陽(yáng)性率。HPS法是測定唾液中具有毒力標志細胞毒相關(guān)基因A(Cag A) 幽門(mén)螺桿菌釋放的尿素酶，這種尿素酶的結構和口腔中其它細菌產(chǎn)生的尿素酶沒(méi)有交叉反應^[13]。HPS法具有敏感性、特異性高，操作方便、快速等優(yōu)點(diǎn)，可用于口腔幽門(mén)螺桿菌感染的實(shí)驗室診斷，胃幽門(mén)螺桿菌炎癥患者也有很高的陽(yáng)性檢出率。HPS法為臨床提供了一種新的非侵入性無(wú)創(chuàng )幽門(mén)螺桿菌檢測方法^[14]，也可用于臨床流行病學(xué)調查。

患病兒童個(gè)體發(fā)育不良和同年齡的兒童相比，體重身高都要差一些。亞洲兒童個(gè)體發(fā)育和歐洲兒童相比，身高，體重都比較小一些。經(jīng)過(guò)長(cháng)時(shí)期臨床的觀(guān)察發(fā)現這些癥狀是和螺旋桿菌感染有關(guān), 兒童幽門(mén)螺桿菌感染值得重視。
作者感謝浙江大學(xué)醫學(xué)院附屬兒童保健院和杭州鐵路小學(xué)的幫助。

參考文獻

1. 葉國欽.中國專(zhuān)利證書(shū), 第1282313 號,[51] Int. Cl. 2009.G01N 33/569 (2006. 01), G01N 33/558 (2006.01), 專(zhuān)利號 ZL 200820183327.7.

2. Barbara Braden, Hans-Georg Posselt, Peter Ahrens, Richard Kitz, C. F. Dietrich, and Wolfgang F. Caspary . New Immunoassay in Stool Provides an Accurate Noninvasive Diagnostic Method for Helicobacter pylori Screening in Children. Pediatrics. 2000, 106: 115-117

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4. R. P. Allaker, K. A. Young, J. M. Hardie, P. Domizio and N. J. Meadows. Prevalaence of Hellicobacter pylori at oral and gastrointestinal sites in children; evidence for possible oral to oral transmission. J. Med.Microbiolo.2002, 51:312-317

5. Andrea, B. C. et al.Helicobacter pylori Clolonization among Children up to 6 years: Results of a Community-based Study from Northeastern Brazil.Journal of Tropical Pediatrics Advance Access published online on June 19, Journal of Tropical Pediatrics.2007, doi:10.1093/tropej/fmm051

6. Patrizia Dominici et al. Familial clustering of Helicobacter pylori infection: population based study. BMJ. 1999, 319: 537-541

7.彭惠，潘國宗.在唾液中檢測幽門(mén)螺桿菌的意義[J].中華內科雜志.1999, 38:17,1-173

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