海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
作為流行病學(xué)篩選檢測和臨床診斷檢驗方法，HPS法是一種比較理想的診斷試驗。
(一) 前言
臨床上，螺旋桿菌感染可引起許多上消化道疾病，比較經(jīng)典的檢測方法是在內鏡下取胃粘膜組織切片染色鏡檢、快速尿素酶試驗、細菌培養等，近年來(lái)，有一些非侵入性的試驗進(jìn)入了這個(gè)領(lǐng)域。
血清螺旋桿菌抗體測定法是比較通用的方法，費用不大，但是對于螺旋桿菌根除治療后觀(guān)察其療效來(lái)講，因血清螺旋桿菌抗體IgG陽(yáng)性在治愈之后還可以持續數月，甚至數年以上，因有些螺旋桿菌的菌種在體內可存在 長(cháng)時(shí)間的免疫效應。因此有人認為血清抗體試驗不能作為螺旋桿菌感染的篩選試驗。此外血清抗體測定的靈敏度(1) 85% 和特異性79%,也不是很理想。
C14呼氣法（UBT）自從1970后開(kāi)始在消化科中使用，相繼C13同位素異構體亦用于臨床,UBT診斷方法的原理是基于尿素酶分解尿素過(guò)程中產(chǎn)生CO2。Grahum和Bell差不多在同時(shí)發(fā)現了C14的方法(2,3)，螺旋桿菌產(chǎn)生的尿素酶可將內源性或外源性尿素分解成NH3和CO2, 后者進(jìn)入血液后隨呼氣排出。吞服一定量的C14尿素后用特定儀器測定呼氣中C14的量可以判斷有無(wú)螺旋桿菌的感染。
C14呼氣法在診斷胃螺旋桿菌感染能起到較好的作用，它可以避免用內鏡作侵入性檢查，但是對口腔螺旋桿菌感染則是檢測的盲點(diǎn)。
內鏡下獲取胃粘膜標本作組織切片染色鏡檢及細菌培養仍作為診斷螺旋桿菌感染的金標準。但是采樣過(guò)程有一定的危險性，這種危險性取決于采取標本的位置,及內鏡操作者技術(shù)熟練程度。
(二) 螺旋桿菌的感染率
螺旋桿菌的感染是很普遍的，據疾病預防控制中心估計,全球約二分之一的人口患有螺旋桿菌感染，發(fā)展中國家的感染率高于發(fā)達國家。
螺旋桿菌的感染途徑是通過(guò)污染的水或食物從口傳入。許多人在兒童時(shí)期就感染了螺旋桿菌，尤其是生活在居住條件差的環(huán)境之中。
前瞻性研究顯示,胃幽門(mén)螺旋桿菌感染的患者在10年中有15~20%發(fā)展為消化性潰瘍,胃癌、胃粘膜淋巴肉瘤、胰腺癌，甚至心血管疾病亦與螺旋桿菌感染有關(guān)。但是多數患者感染螺旋桿菌并沒(méi)有多少癥狀, 也不會(huì )發(fā)生如此嚴重的情況。
(三) 齦袋和螺旋桿菌之間的關(guān)系
有報道，牙周的齦袋深度超過(guò)
更進(jìn)一步觀(guān)察, 發(fā)現胃和牙斑中的螺旋桿菌有同一菌種,所以說(shuō)口腔的螺旋桿菌是胃螺旋桿菌的源泉(6)。
越來(lái)越多的研究確認口腔中存在螺旋桿菌這一事實(shí)(7,8,9,10,11,12,13,14,15,16), 最近的研究指出,牙斑是已死亡的細菌和有機化合物,糖蛋白和非有機化合物,鈣和其它礦物質(zhì)組成一層叫生物膠質(zhì)膜（Biofilm）。這一層生物膠質(zhì)膜,對口腔細菌形成了一層保護層。但是并不是所有口腔細菌都是有害的，牙斑是在沒(méi)有良好的口腔衛生習慣下生長(cháng)出來(lái)的東西，它存在于牙齦與牙齒的交界部位。生物膠質(zhì)膜不僅和口腔螺旋桿菌感染同時(shí)存在，并且影響C13、C14對口腔螺桿菌的檢測,但HPS檢測法并不會(huì )因生物膠質(zhì)膜的存在而影響其測試靈敏度。生物膠質(zhì)膜的存在,也是口腔中螺旋桿菌產(chǎn)生對抗抗菌素作用的因素,正因為這個(gè)原因, 抗菌素可以治愈胃的螺旋桿菌炎癥，但對治療口腔螺旋桿菌感染幾乎沒(méi)有什么作用(9,11,12,13,14,16,17)。
Wang等(18)用PCR法分別檢測31例胃病患者的胃粘膜組織與其唾液中4種不同幽門(mén)螺桿菌基因型,CagA、VacAm1、VacAm2以及VacAs1，結果顯示，95%的患者胃粘膜組織與其相應唾液至少有一種幽門(mén)螺桿菌基因型相同，86%二種基因型一致，59%三種基因型一致，27%的患者四基因型均一致。彭惠等(19)用SSCP-PCR法檢測胃粘膜與唾液中幽門(mén)螺桿菌的兩種VacA基因型的一致率為98%。提示口腔和胃幽門(mén)螺桿菌具有同源性。目前,牙斑或唾液細菌培養和口腔粘膜括片染色鏡檢,尚難以在口腔中作出與胃內相同且穩定的結果,口腔中菌群的復雜性和螺旋桿菌在口腔中分布不均勻,可能是影響從口腔中分離出螺旋桿菌的重要因素。
有人認為用細菌培養或PCR的方法檢測口腔（唾液和牙斑）螺旋桿菌不是很可靠，因為口腔內有許多不同的細菌，有些細菌的菌種尚未確定。對于PCR的方法，至少從二個(gè)不同基因體上同時(shí)得到陽(yáng)性，才能確認結果可靠。簡(jiǎn)單地講，用口腔內唾液作細菌培養法或PCR法檢測螺旋桿菌的結果尚不是很可靠。
但也有許多研究（20，21，22，23）認為胃幽門(mén)螺旋桿菌和口腔螺旋桿菌之間并沒(méi)有因果關(guān)系，但是他們的實(shí)驗結果都是從PCR或唾液細菌培養得出來(lái)的，正因為這些研究方法有一定的缺陷，其結論也很難成立。
最近有一個(gè)很關(guān)鍵的研究(23),他指出胃幽門(mén)螺旋桿菌藥物治療的效果和口腔是否有螺旋桿菌有著(zhù)明顯的關(guān)系。他們用Lansoprazole 30mg/天，Methrom-dazile 750mg/天，Calr，thromycin 400mg/天，共2周，同時(shí)他們從患者的唾液，牙斑進(jìn)行PCR的DNA方法測定螺旋桿菌，他們發(fā)現如果口腔有螺旋桿菌感染者，胃螺旋桿菌感染治療效果只有52.1%，在口腔無(wú)螺旋桿菌感染患者中，其胃螺旋桿菌感染治愈率高達91.6%。除了口腔之外，還發(fā)現螺旋桿螺寄居在食道的上端，此處螺旋桿菌密度和胃幽門(mén)處很相似。同樣的道理，用C13、C14的診斷方法很難揭示食道的螺旋桿菌感染，藥物也比較難到達食道處。
(四)螺旋桿菌感染的復發(fā)
患者同時(shí)有口腔和胃螺旋桿菌感染，通常藥物對口腔感染沒(méi)有治療效果(24)。臺灣臺大醫學(xué)院(10) 將患者分為二組，有口腔疾病同時(shí)患有胃螺旋桿菌感染的人群為一組，另一組是單純性胃螺旋桿菌感染，口腔是健康的。跟蹤檢查的方法是C13呼氣法和內鏡下胃粘膜組織切片染色鏡檢。用三聯(lián)藥物治療6周，在第一年末，第二年末和第三年末對二組病人均進(jìn)行復查。在第一年末螺旋桿菌感染復發(fā)率第一組高于第2組病人。同樣在第二年，第三年末時(shí)第一組復發(fā)率均高于第二組病人。他們之間的差別是有顯著(zhù)統計學(xué)意義的。他們的結論是口腔螺旋桿菌感染是復發(fā)率高的原因，所以胃幽門(mén)螺旋桿菌感染經(jīng)過(guò)三聯(lián)藥物治療后，要把病人轉到口腔科進(jìn)一步處理口腔疾病。
(五) 唾液螺旋桿菌抗源檢測技術(shù)-HPS法
1, 原理:
是用免疫夾心法，對唾液中螺旋桿菌釋放的尿素酶抗源起反應的試劑。測試標本是唾液，它可以檢測胃和口腔螺旋桿菌感染。它有高靈敏度和特異性。
2, 測試步驟：
將測試卡長(cháng)端放在口腔內吸收唾液，或者將唾液吐在收集瓶?jì)茸鳛闇y試標本。將標本滴在測試板收集口之后10分鐘左右，在觀(guān)察窗口出現一條紅色線(xiàn)為陰性，二條紅線(xiàn)為陽(yáng)性。
(六) 對比試驗
1, Ameritek唾液螺旋桿菌抗原檢測試驗（HPS）和CLO試驗對比。
我們在德國二家醫院，共選了100個(gè)有消化道癥狀的病人，男性58例，女性42例，年齡38~65歲，平均年齡為57歲。
所有病人都接受胃鏡檢查，并鉗取胃粘膜組織（
其中三名患者HPS顯示陽(yáng)性，而CLO試驗為陰性。其余97名患者的結果，二種方法都是一致的。胃粘膜CLO試驗和HPS相比其靈敏度為100%，特異性為89.3%，陽(yáng)性預計符合率（PPU）為96%，陰性預計符合率（NPU）為100%。
2, Ameritek的HPS和C14呼氣法的對比試驗，我們同步做了169例患者的對比試驗，所有患者為消化道科門(mén)診病人，他們有胃部不適癥狀。年齡26~68歲。男性108例，女性61例。
所有病人接受HPS試驗，然后做C14呼氣試驗。
結果顯示：169例中HPS陽(yáng)性124例，陰性為45例。陽(yáng)性率之比為124/169=73.4%。
C14試驗陽(yáng)性73例，陰性96例。陽(yáng)性率之比為73/169 = 43.2%。C14試驗陽(yáng)性的73例中，71例HPS顯示陽(yáng)性，陽(yáng)性率之比為71/73 = 97.3%。C14試驗陽(yáng)性證實(shí)為胃螺旋桿菌感染病人中，HPS陰性者只占2.7。
醫務(wù)人員都知道C14呼氣法使用同位素，此試驗不適用于婦女和兒童。
3, Ameritek的HPS和血清螺旋桿抗體測定的對比，
44例有胃酸、噯氣等癥狀的患者，每人都測定血清螺旋桿菌抗體（IgG和IgM）和HPS檢測。
44例患者中有35例HPS陽(yáng)性，其陽(yáng)性率為35/44=79.5%。血清總抗體有39例陽(yáng)性，其陽(yáng)性率為39/44 = 88.6%。
在39名例血清總抗體陽(yáng)性的患者中，有35名例HPS陽(yáng)性，陽(yáng)性率之比為35/39 = 90%。
(七) 螺旋桿菌感染的危險性和引用篩選試驗的重要性
螺旋桿菌感染是慢性胃炎主要病因（80%~95%），絕大多數（70%~80%）慢性胃炎患者無(wú)任何癥狀。前贍性研究顯示，10年中約15%~20%的螺旋桿菌感染者發(fā)生消化性潰瘍。1994年WHO屬下國際癌腫研究機構將幽門(mén)螺旋桿菌列為引起胃癌的第1類(lèi)(肯定)致癌原,Correa提出的胃癌發(fā)病多階段模式(自慢性淺表性胃炎依次演變?yōu)槲s性胃炎、腸化/異增生、胃癌)已被普遍接受,故有理由假設幽門(mén)螺旋桿菌感染與胃癌發(fā)病密切相關(guān)。
一個(gè)英國研究小組，以P. H.Whinwp為首在倫敦附近的24個(gè)小城市中調查408人，他們的年齡在40~59歲之間。其中135人有心肌梗死的病史，137人有中風(fēng)的病史，其余沒(méi)有以上病史的136人為對照組。對照組人的年齡和上述二組人員相仿。他們采取所有人血清用酶標法測定螺旋桿菌的抗體 IgG， 結果顯示，有心肌梗死病史的135人中，螺旋桿菌抗體陽(yáng)性95人, 占70.4%； 93 中風(fēng)的病史的137人中，螺旋桿菌抗體陽(yáng)性93人，占67.9%.兩組和對照組比較均有顯著(zhù)統計學(xué)意義。
螺旋桿菌感染還參與許多胃腸外疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程, 如缺鐵性貧血、特發(fā)性血小板, 減少性紫癜、慢性蕁麻疹、兒童生長(cháng)發(fā)育延緩等。螺旋桿菌感染還與許多口腔疾病,如牙周病、齲病、口腔復發(fā)性潰瘍、口腔扁平苔癬、口臭等密切相關(guān)。
螺旋菌桿感染著(zhù)大自然的人群，全球大約有1/2的人群患有此病。篩選檢查是重要的。內鏡下的侵入性檢測和C14尿素呼氣試驗需要設備(25)，費用也比較大，用于螺旋桿菌篩選檢查遠沒(méi)有用唾液螺旋桿菌抗原檢測法優(yōu)越(26,27,28,29,30)。
結論
唾液螺旋桿菌抗原檢測(HPS)法具有73.4%~79.5%的陽(yáng)性率，C14尿素呼氣試驗和血清螺旋桿菌總抗體陽(yáng)性者HPS陽(yáng)性率為88.6%~97.3%。HPS法與C13、C14呼吸法相比較，它還能檢出口腔螺旋桿菌感染，所以HPS法用于大量人群篩選是比較好的技術(shù)。
參考文獻
Loy CT, Irwig LM, Katelaris PH, Talley NJ. Do commercial serological kits for Helicobacter pylori infection differ in accuracy? A meta-analysis. Am J Gastroenterol. 1996, 91:11,38-44
Graham DY, Klein PD, Evans DJ Jr, Evans DG, Alpert L, Opekun AR, et al. Campylobacter pylori detected noninvasively by the
Marshall BJ, Surveyor I. Carbon-14 urea C-urea breath (UBT) test for the diagnosis of Campylobacter pylori associated gastritis. J Nucl Med. 1988, 29:11-6
Bruce A. Dye, Deanna Kruszon-Moran and Geraldine McQuillan. The Relationship Between Periodontal Disease Attributes and Helicobacter Pylori Infection Among Adults in the
P. Kapera at all. Association of the presence the helicobacter pylori in the oral cavity and in the stomach. J.Physiol Pharmacol. 2004, 55;2,105-15
B. Shames, S. Krajden, M. Fuksa, C.Babida and J.L. Penner. Evidence for the Occurrence of the same strain of Camplobacter pylori in the stomach and dental plaque. J. Clin Microbiol. 1989, 27;12, 2849-2850
7. Beck, J. et al. Periodontal disease and cardiovascular disease. Journal of Periodontal Disease. 1996, 67:138-42
8. Bonten, M. et al. The stomach is not a source for colonization of the upper respiratory tract and pneumonia in ICU patients. Chest. 1994, 105:878-84
9. Bruce A. Dye, DDS, MPH, Deanna Kruszon-Moran, MS and Geraldine McQuillan, PhD. The Relationship Between Periodontal Disease Attributes and Helicobacter pylori Infection Among Adults in the
10. B.-S. Sheu, H.-C. Cheng, Y.-J. Yang, H. -B. Yang, J.-J. Wu. The presence of dental disease can be a risk factor for recurrent Helicobacter pylori infection after eradication therapy: A 3-year follow-up. Endoscopy. 2007, 39: 942-947
11. Genco, R. Identification of periodontal pathogens in atheromatous plaque. Journal of Dental Research. 1997, 76 3159
12. Keasden, J. et al. Examination of human stomach biopsies, saliva, and dental plaque for Campylo bacterpylori. Journal of Clinical Microbiology. 1989, 27:1397-8
13. Matmudar, P. et al. Incidence of Helicobacter pylori in dental plaque of healthy volunteers. Indian Journal of Gastroenterology. 1990, 9:271-2
14. Pradeep S. Anand, K. Nandakumar, K.T. Shenoy. Are Dental Plaque, Poor Oral Hygiene, and Periodontal Disease Associated With Helicobacter pylori Infection? Journal of Periodontology. 2006,77(4): 692-698
15. Preusch, Michael R.; Grau, Armin J. MD, PhD; Buggle, Florian MD; Lichy, Christoph MD; Bartel, Jan MD; Black, Carmen MD; Rudi, Jochen MD, PhD. Association Between Cerebral Ischemia and Cytotoxin-Associated Gene-A-Bearing Strains of Helicobacter pylori. Stroke. 2004, 35(8):1800-1804
16. Seymour L. Gottlieb, BS, BDS, DDS, member of NOHA's Professional Advisory Board. RELATIONSHIPS BETWEEN ORAL HEALTH AND MEDICAL CONDITIONS. NOHA NEWS. 1998, 23(4):7-8
17 Stephen G. Baum, MD. Stroke and H. pylori: What's the Story? Journal Watch Infectious Diseases.2002, 23
18. Wang J, Chi DS, Laffan JJ,et al. Comparison of cytotxin genotypes of Helicobacter pylori in stomach and saliva. Dig Dis Sci, 2002, 47(8):1850-1856
１９. 彭惠，潘國宗. 在唾液中檢測幽門(mén)螺桿菌的意義［Ｊ］．中華內科雜志，１９９９，３８（３）：１７１－１７３．
20. Parsonnet, J., H. Shmuely, and T.Haggerty. Fecal and oral shedding of Helicobacter pylori from heathy infected adults. JAMA. 1999, 282:2240-2245
21. M.Czesnikiewicz-Guzik, E. Karczewska, W.Bielanski, T.J.Guzik, P. Kapera, A. Targosz, S. J. Konturek, B. Loster. Association of the presence the Helicobacter pylori in the oral cavity and in the stomach. J. Physiology and Pharmacology. 2004, 55(2): 105-115
22. Kignel S, de Almeida Pina F. Abdre EA, Alves Mayer MP, Birman EG. Occurrence of Helicobacter pylori in dental plaque and saliva of dyspeptic patients. Oral Dis. 2005, 11(1): 17-21
23. Czesnikiewicz-Guzik M, Loster B, Bielanski W. Guzik TJ, Konturek PC, Zapala J, Konturek SJ. Implications of oral Helicobacter pylori for the outcome of its gastric eradication therapy. J. Clin Gastroenterol. 2007, 41(2): 145-51
24. Czesnikiewicz-Guzik M, Loster B, Bielanski W, Guzik TJ, Konturek PC, Zapala J, Konturek SJ. Implications of oral Helicobacter pylori for the outcome of its gastric eradication therapy. J Clin Gastroenterol. 2007, 41(2):145-51
25. 葉國欽; 碳14同位素呼氣法可能給中國環(huán)境污染帶來(lái)隱患. 中國醫療前沿.2009, 笫四卷, 第15 期1-6
26. 葉國欽;胃幽門(mén)螺旋菌的危害及快速診斷的進(jìn)展. 國際檢驗醫學(xué)雜志. 2008,29:6,576-577
27. 葉國欽.葉小欽，葉小培.唾液幽門(mén)螺桿菌抗原檢測法.中國醫療前沿.2009,4(20):18-19
28. 葉國欽. 葉小欽，葉小培. 唾液尿素酶檢測法-HPS診斷兒童幽門(mén)螺桿菌感染的評價(jià).中國醫療前沿.2009,4(21):16-52
29. 葉國欽;中國專(zhuān)利證書(shū),第1282313號,[51]Int.Cl. 2009.G01N33/569(2006.01),G01N 33/558(2006.01), 專(zhuān)利號ZL200820183327.7.
30. 葉國欽;中國專(zhuān)利,專(zhuān)利號 ZL 2009201514524
