影響花藥培養的主要因素

①基本培養基

基本培養基的選擇因植物種類(lèi)和品種而異。MS培養基和H培養基適合雙子葉植物花藥培養；B5培養基適合豆科與十字花科植物花藥培養；Nitsch培養基適合蕓薹屬和曼佗羅屬植物花藥培養；而禾谷類(lèi)植物的花藥培養常采用N6、C17和W14等培養基。

②無(wú)機鹽

培養基中高濃度的銨離子顯著(zhù)抑制花粉愈傷組織形成。鐵鹽對花粉胚狀體發(fā)育很重要，如在Fe-EDTA濃度小于40μmol/L的低鐵或無(wú)鐵培養基上，煙草花粉胚只形成多細胞原胚體（球形胚）便停止發(fā)育。

③生長(cháng)調節劑

生長(cháng)調節劑的種類(lèi)與濃度對花粉的啟動(dòng)、分裂、分化具有關(guān)鍵的作用。細胞分裂素也椰汁促進(jìn)花粉分化成胚狀體，生長(cháng)素類(lèi)尤其2，4-D促進(jìn)愈傷組織形成，但2，4-D抑制愈傷組織分化成胚狀體。高濃度生長(cháng)素甚至可引起茄科花粉胚狀體轉化為愈傷組織。因此，誘導愈傷組織分化成苗，應將其轉入無(wú)2，4-D或含有低濃度IAA，NAA與較高濃度細胞分裂素的分化培養基上。煙草、水稻等少數植物的花藥可在不含生長(cháng)調節劑的培養基上形成愈傷組織或花粉胚。

④蔗糖

蔗糖作為碳源和調節培養基滲透勢的物質(zhì)，其濃度對花粉愈傷組織誘導率有一定的影響，例如誘導油菜、煙草花粉愈傷組織或胚狀體的適宜蔗糖濃度是2%-3%，水稻則是4%-8%，甘蔗則高達20%，但對大多數植物來(lái)說(shuō)是2%-4%。在許多植物花藥和花粉培養中，誘導花粉形成愈傷組織階段，宜采用較高濃度蔗糖，而愈傷組織分化成苗階段宜用較低濃度的蔗糖。

⑤附加物

添加天然有機物如水解乳蛋白、水解酪蛋白、椰子汁、酵母提取液等，是對基本培養基組成成分和生長(cháng)調節劑的補充，可提高花粉愈傷組織和胚狀體誘導率，對促進(jìn)其生長(cháng)有良好的效果。此外，活性炭也能促進(jìn)胚狀體發(fā)育，提高花粉植株產(chǎn)量，且已經(jīng)在煙草、油菜、馬鈴薯等植物中被先后證實(shí)。