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分枝桿菌屬（Mycobacterium）
是一類(lèi)細長(cháng)略帶彎曲的桿菌，有分枝生長(cháng)的趨勢。一般不易著(zhù)色，經(jīng)加溫或延長(cháng)染色時(shí)間才能著(zhù)色，一旦著(zhù)色能抵抗鹽酸酒精的脫色作用，故又稱(chēng)抗酸桿菌。特點(diǎn)：專(zhuān)性需氧，營(yíng)養要求較高，無(wú)特殊結構。細胞壁中含有豐富的脂類(lèi)，對酸、堿抵抗力強。種類(lèi)很多，對人致病的可分為三組：
1、結核分枝桿菌：人型、牛型、非洲型。
2、非結核分枝桿菌：堪薩斯分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌、鳥(niǎo)胞內分枝桿菌。
3、麻風(fēng)桿菌。
結核分枝桿菌(M.tuberculosis )
是結核病的病原體，又稱(chēng)結核桿菌。1882年由科霍發(fā)現。目前，全球大約1/3（19億）人已感染結核桿菌，15歲以下兒童達1.8億；有2億活動(dòng)性結核病患者；每年新發(fā)現病歷1000萬(wàn)人。每年約有300萬(wàn)人死于結核，超過(guò)艾滋病、瘧疾、腹瀉熱帶病死亡數的總和。AIDS患者極易得結核。我國解放前死亡率達200~300人/10萬(wàn)，現在每年仍有12.7萬(wàn)人死于結核病。
一、生物學(xué)性狀
（一）形態(tài)與染色
1、細長(cháng)略帶彎曲的桿菌，有時(shí)可見(jiàn)分枝狀，衰老時(shí)形態(tài)多樣，有球形、絲狀、串狀。
2、齊-尼抗酸染色呈紅色，背景蘭色；熒光染料金胺“O”染色呈橘黃色。
3、在體內可形成L型，與耐藥性或復發(fā)有關(guān)。
（二）培養特性：
專(zhuān)性需氧，3-5%的CO2能促進(jìn)生長(cháng)。營(yíng)養要求較高，必須在含有血清、卵黃、馬鈴薯、甘油、孔雀綠以及含某些無(wú)機鹽類(lèi)的羅氏培養基（固體）、蘇通氏培養基（液體）上生長(cháng)。溫度35~37℃，pH6.5~6.8。
生長(cháng)緩慢，14-18小時(shí)分裂一次；在固體培養基上2-5周才出現肉眼可見(jiàn)的菌落；典型菌落為粗糙型、表面干燥呈顆粒狀、不透明、乳白色或淡黃色菜花樣。液體培養時(shí)生成菌膜；如液體培養液中加入吐溫-80可使細菌分散呈均勻生長(cháng)；有毒株在液體培養基中呈索狀生長(cháng)。
（三）菌體的化學(xué)成分：細胞壁含有脂質(zhì)、多糖和蛋白質(zhì)復合物。
1、脂質(zhì)：結核桿菌含有大量脂質(zhì) ，占胞壁干重的60%，都與蛋白質(zhì)和多糖形成復合物。有磷脂、脂肪酸和蠟質(zhì)，其中蠟質(zhì)所占比例最大，由分枝菌酸、索狀因子和蠟質(zhì)D組成。
（1）磷脂：刺激機體內大單核細胞增生，并能增強菌體蛋白的致敏作用，引起結核結節形成，產(chǎn)生干酪樣壞死。
（2）脂肪酸中的結核菌酸：促進(jìn)結核結節的形成。
（3）蠟質(zhì)：
a.分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)
b.索狀因子：與毒力有關(guān)，能抑制白細胞游走，引起慢性肉芽腫。c. 蠟質(zhì)D：引起遲發(fā)型超敏反應。
2、蛋白質(zhì)：結核菌素，與蠟質(zhì)結合能使機體致敏。
3、多糖：主要與脂質(zhì)結合。
結核桿菌具有免疫佐劑作用：細胞壁骨架、蠟質(zhì)D、核酸，最有效成分是胞壁酸二肽。
（四）抵抗力：
因細胞壁含有大量的脂類(lèi)，故對理化因素抵抗力強。耐干燥，在干燥的痰內可存活6-8個(gè)月；對化學(xué)消毒劑抵抗力也比一般細菌強，在3%HCl或6%H2SO中不被殺死。但結核桿菌對濕熱、酒精和紫外線(xiàn)敏感。
（五）變異性：
可發(fā)生菌落、形態(tài)、毒力、免疫性、耐藥性等變異；卡介苗（BCG）是結核分枝桿菌在含馬鈴薯、甘油、膽汁的培養基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒菌株。另外，耐藥菌株毒力減弱，尤其是耐異煙肼菌株其毒力明顯減弱。
二、致病性與免疫性：
（一）致病物質(zhì)：
1、索狀因子：破壞線(xiàn)粒體影響呼吸。抑制白細胞游走和引起慢性肉芽腫。
2、C-分枝菌酸苷酯：存在于細胞壁表面，圍繞菌體形成一種保護性屏障，能減弱溶酶體酶、抗體和其他殺菌物質(zhì)的殺傷作用。
3、硫酸腦苷脂：抑制吞噬細胞中吞噬體與溶酶體的結合，使結核菌在吞噬細胞中長(cháng)期存活。
4、分枝桿菌生長(cháng)素：是一種脂溶性的鐵螯合物，對鐵有親和力，可將環(huán)境中的鐵轉運到菌體內。鐵是結核菌生長(cháng)所必需微量元素，因結核桿菌能與宿主竟爭鐵，故分枝桿菌生長(cháng)素被認為是一種毒力因素。
3、蠟質(zhì)D：是肽糖脂和分枝菌酸的復合物，具有佐劑作用，可激發(fā)機體產(chǎn)生遲發(fā)反應。
（二）所致疾�。航Y核病
通過(guò)呼吸道、消化道、受損傷的皮膚等多種途徑侵入機體，引起多種臟器組織的結核病皮膚結核（骨結核、肺結核、腸結核、結核性腹膜炎、腎結核、結核性腦膜炎），以肺結核最多見(jiàn)。分為原發(fā)感染和繼發(fā)感染（復活感染）。
1、原發(fā)感染：含菌的飛沫、塵埃經(jīng)呼吸道侵入肺泡，被巨噬細胞吞噬并在其中繁殖，導致巨噬細胞裂解，釋放的細菌可在細胞外繁殖。結核菌是兼性細胞內寄生菌。細菌可再次被巨噬細胞吞噬，將細菌帶到其他部位。這種滲出性炎癥即為原發(fā)感染，包括原發(fā)灶、淋巴管炎及所屬肺門(mén)淋巴結病變。原發(fā)感染見(jiàn)于學(xué)齡前兒童及未受過(guò)感染的成人。
抵抗力低時(shí)：經(jīng)氣管、淋巴管、血流播散引起急性全身粟粒性結核
抵抗力高時(shí)：結核結節，逐漸纖維化和鈣化，不治自愈。但病灶經(jīng)常有一些細菌長(cháng)期潛伏，不斷刺激機體產(chǎn)生免疫或成為今后內源性感染的來(lái)源。
2、繼發(fā)感染（復活感染）：肺尖部位
內源：原發(fā)感染灶的結核結節內活菌重新活動(dòng)。
外源：外界新入的細菌。
特點(diǎn)：慢性肉芽腫炎癥、形成結核結節、干酪化和纖維化。
（三）免疫性：
1、結核的免疫為有菌免疫或叫傳染性免疫：是指結核桿菌（或BCG）進(jìn)入機體后，使機體對細菌再次入侵有免疫力，而當細菌或其成分從體內消失后，則抗菌免疫也隨之消失。
2、細胞免疫有意義，抗體無(wú)意義，但對結核的診斷有意義。
3、機體在對結核桿菌產(chǎn)生免疫的同時(shí)，也產(chǎn)生遲發(fā)超敏反應；可用科霍現象解釋。細菌核糖體中的核糖體酸產(chǎn)生免疫反應；細胞壁的脂類(lèi)產(chǎn)生超敏反應。
結核菌素試驗：舊結核菌素（OT）即結核分枝桿菌蛋白
新結核菌素（PPD）即純蛋白衍生物
1、原理：將結核菌素注入受試者皮下后，如此人已感染結核，則結核菌素與致敏淋巴細胞特異性結合，在局部釋放淋巴因子，形成遲發(fā)超敏反應性炎癥；若受試者未感染過(guò)結核則無(wú)反應。
2、方法：取5單位PPD或OT0.1毫升注射于前臂掌側皮下，經(jīng)48-72小時(shí)檢查反應情況。主要看局部有無(wú)硬結、紅暈。
3、結果分析：
（1）陽(yáng)性：紅腫、硬結直徑0.5~1.5cm之間，機體感染過(guò)結核，出現超敏反應，不表示正患結核。
（2）強陽(yáng)性：紅腫、硬結直徑大于1.5cm，可能有活動(dòng)性結核，應進(jìn)一步檢查。
（3）陰性：紅腫、硬結直徑小于0.5cm，無(wú)結核菌感染，無(wú)超敏反應。
但應考慮：原發(fā)感染的早期；正患嚴重的結核��；患其他傳染病。
4、應用：
①選擇BCG接種對象及測定接種結果
②對嬰幼兒可做診斷之用
③作流行病學(xué)調查
④借用其測定腫瘤病人的細胞免疫功能。
三、微生物學(xué)檢查法：
標本：痰、便、尿、膿汁、胸水、腹水、腦脊液
（一）涂片染色鏡檢：濃縮集菌后（3%HCI、4%NaOH、6%H2SO4處理，離心或漂浮法）抗酸染色
（二）分離培養：
1、固體培養基培養法：羅氏培養基或青霉素血瓊脂培養基
2、液體培養基培養法：
（三）菌種鑒定：
1、PCR反向膜探針雜交ELISA法：
2、DNA探針：
3、16SrRNA基因序列測定、
4、高效液相色譜（HPLC）檢測分枝菌酸：
（四）動(dòng)物接種：豚鼠、小鼠。
（五）免疫學(xué)診斷：
1、結核菌素試驗：適用于嬰幼兒。
2、ELISA：檢測患者的抗PDD的IgG，可作為活動(dòng)性肺結核快速診斷手段之一。肺結核病人的陽(yáng)性率為80~90%。
3、全血干擾素測定法：
（六）藥敏試驗
四、防治原則：
（一）發(fā)現和治療痰菌陽(yáng)性者。
（二）預防接種：新生兒一般在48小時(shí)內接種。6-8周后如結核菌素試驗陽(yáng)性，則表示接種者已產(chǎn)生免疫力，陰性者應復種。陽(yáng)性反應可維持5年左右。但卡介苗不能預防結核病的最流行形式——成人肺結核。
（三）治療：
1、一線(xiàn)抗結核藥物：異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇和鏈霉素。療效好、毒性小。
2、二線(xiàn)抗結核藥物：對氨基水楊酸、卡那霉素、卷曲霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、乙硫異煙肼。
治愈的關(guān)鍵是加強治療管理。用藥原則：早期聯(lián)合、規律、全程、適量。
