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    培養基的組成



    錄入時(shí)間:2010-9-25 11:38:11 來(lái)源:江西化工

    1 前言
    培養基是人工配制的供微生物或動(dòng)植物細胞生長(cháng)、繁殖、代謝和合成人們所需產(chǎn)物的營(yíng)養物質(zhì)和原料,同時(shí),培養基也為微生物等提供除營(yíng)養外的其它生長(cháng)所必須的環(huán)境條件。常用的培養基都應符合一些基本要求:1 ) 都必須含有作為合成細胞組成的原料;2 ) 滿(mǎn)足一般生化反應的基本條件,如碳源、氮源、無(wú)機鹽、生長(cháng)因素;3 ) 一定的pH等條件。 
    2 培養基的組成
    2.1 碳源
    碳源是組成培養基的主要成分之一。常用的碳源有糖類(lèi)、油脂、有機酸和低碳醇。在特殊情況下( 如碳源貧乏時(shí)) ,蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或氨基酸等也可被某些菌種作為碳源使用。
    葡萄糖是碳源中最易利用的糖,幾乎所有的微生物都能利用葡萄糖,所以葡萄糖常作為培養基的一種主要成分,并且作為加速微生物生長(cháng)的一種有效的糖。但是過(guò)多的葡萄糖會(huì )過(guò)分加速菌體的呼吸,以致培養基中的溶解氧不能滿(mǎn)足需要,使一些中間代謝物不能完全氧化而積累在菌體或培養基中,如丙酮酸、乳酸、乙酸等導致pH下降,影響某些酶的活性,從而抑制微生物的生長(cháng)和產(chǎn)物的合成。 
    2.2 氮源
    氮源主要用于構成菌體細胞物質(zhì)( 氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等) 和含氮代謝物。常用的氮源可分為兩大類(lèi): 有機氮源和無(wú)機氮源。 
    2.2.1 有機氮源
    常用的有機氮源有玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉和酒糟等。它們在微生物分泌的蛋白酶作用下,水解成氨基酸,被菌體吸收后再進(jìn)一步分解代謝。 
    有機氮源除含有豐富的蛋白質(zhì)、多肽和游離氨基酸外, 往往還含有少量的糖類(lèi)、脂肪、 無(wú)機鹽、 維生素及某些生長(cháng)因子, 因而微生物在含有機氮源的培養基中常表現出生長(cháng)旺盛, 菌絲濃度增長(cháng)迅速的特點(diǎn)。大多數發(fā)酵工業(yè)都借助于有機氮源,來(lái)獲得所需氨基酸。 
    玉米漿是一種很容易被微生物利用的良好氮源。因為它含有豐富的氨基酸( 丙氨酸、 賴(lài)氨酸、谷氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸等) 、還原糖、磷、微量元素和生長(cháng)素。玉米漿是玉米淀粉生產(chǎn)中的副產(chǎn)物,其中固體物含量在50%左右,還含有較多的有機酸,如乳酸,所以玉米漿的 pH在4左右。 
    2.2.2 無(wú)機氮源
    常用的無(wú)機氮源有銨鹽,硝酸鹽和氨水等。微生物對它們的吸收利用一般比有機氮源快, 所以也稱(chēng)之謂迅速利用的氮源。但無(wú)機氮源的迅速利用常會(huì )引起pH的變化。 
    氨水在發(fā)酵中除可以調節pH外,它也是一種容易被利用的氮源,在許多抗生素的生產(chǎn)中得到普遍使用。氨水因堿性較強,因此使用時(shí)要防止局部過(guò)堿,加強攪拌,并少量多次地加入。 
    2.3 無(wú)機鹽
    微生物在生長(cháng)繁殖和生產(chǎn)過(guò)程中,需要某些無(wú)機鹽和微量元素如磷、 鎂、 硫、 鉀、 鈉、 鐵、氯、錳、鋅、鈣等,以作為其生理活性物質(zhì)的組成或生理活性作用的調節物,這些物質(zhì)一般在低濃度時(shí)對微生物生長(cháng)和產(chǎn)物合成有促進(jìn)作用,在高濃度時(shí)常表現出明顯的抑制作用。
    在培養基中,鎂、磷、鉀、硫、鈣和氯等常以鹽的形式( 如硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、碳酸鈣、氯化鉀等) 加入,而鈷、銅、鐵、錳、鋅、鉬等缺少了對微生物生長(cháng)固然不利,但因其需要量很少,除了合成培養基外,一般在復合培養基中不再另外單獨加入。 
    2.3.1 磷
    是核酸和蛋白質(zhì)的必要成分,也是重要的能量傳遞者——三磷酸腺苷的成分;在代謝途徑的調節方面,磷起著(zhù)很重要的作用,磷有利于糖代謝的進(jìn)行,因此它能促進(jìn)微生物的生長(cháng)。但磷若過(guò)量時(shí),許多產(chǎn)物的合成常受抑制。
    2.3.2鎂
    除了組成某些細胞的葉綠素的成分外,并不參與任何細胞物質(zhì)的組成。但它處于離子狀態(tài)時(shí),則是許多重要酶( 如己糖磷酸化酶、檸檬酸脫氫酶、羧化酶等) 的激活劑,鎂離子不但影響基質(zhì)的氧化,還影響蛋白質(zhì)的合成。鎂常以硫酸鎂的形式加入培養基中。 
    2.3.3 氯
    氯離子在一般微生物中不具有營(yíng)養作用,但對一些嗜鹽菌來(lái)講是需要的,在一些產(chǎn)生含氯代謝物的發(fā)酵中,除了從其它天然原料和水中帶入的氯離子外,還需加入約0.1%氯化鉀以補充氯離子。 
    2.3.4鈉、鉀、鈣
    鈉、鉀、鈣等離子雖不參與細胞的組成,但仍是微生物發(fā)酵培養基的必要成分。鈉、鉀離子與維持細胞滲透壓有關(guān),故在培養基中常加入少量鈉鹽、鉀鹽,但用量不能過(guò)高,否則會(huì )影響微生物生長(cháng)。鈣離子能控制細胞透性,它不能逆轉高濃度無(wú)機磷對某些產(chǎn)品的抑制作用。 
    2.4前體、 促進(jìn)荊和抑制劑
    發(fā)酵培養基中某些成分的加入有助于調節產(chǎn)物的形成,而并不促進(jìn)微生物的生長(cháng)。這些添加的物質(zhì)包括前體、抑制劑和促進(jìn)劑/ 包括誘導劑、生長(cháng)因子等) 。
    2.4.1前體
    指某些化合物加入到發(fā)酵培養基中,能直接被微生物在生物合成過(guò)程中結合到產(chǎn)物分子中去,而其自身的結構并沒(méi)有多大變化,但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。 
    2.4.2促進(jìn)劑
    指那些既不是營(yíng)養物又不是前體,但卻能提高產(chǎn)量的添加劑。 
    2.4.3抑制劑
    在發(fā)酵過(guò)程中加入抑制劑會(huì )抑制某些代謝途徑的進(jìn)行, 同時(shí)會(huì )使另一代謝途徑活躍,從而獲得人們所需的某種產(chǎn)物或使正常代謝的某一代謝中間物積累起來(lái)。 
    2.5 水
    除了少數微生物如藍細菌能利用水中的氫作為還原CO2時(shí)的還原劑外,其他微生物都不是利用水作為營(yíng)養物質(zhì)。即使如此,由于水在微生物的生命活動(dòng)過(guò)程包括營(yíng)養過(guò)程中的重要性,它仍應屬于營(yíng)養要素之一,為培養基的重要組成之一。 
    3 結束語(yǔ)
    對某一微生物和產(chǎn)品來(lái)講,究竟用哪些原料作培養基還需經(jīng)過(guò)一系列實(shí)驗的摸索,能確定一種既有利于微生物生長(cháng),又能保證得到高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的較為理想的培養基配方。另外,工業(yè)生產(chǎn)培養基所用的原材料還必須來(lái)源豐富、價(jià)格低廉、質(zhì)量穩定。當然一種好的培養基配方還應隨菌種的改良、發(fā)酵控制條件( pH、溶解氧、中間補料等工藝條件) 和發(fā)酵設備的變化而作相應的變化。             

     

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